Enzimek, vagy enzimek(a lat. Fermentum- kovász) - általában fehérjemolekulák vagy RNS-molekulák (ribozimek) vagy ezek komplexei, amelyek felgyorsítják (katalizálják) az élő rendszerek kémiai reakcióit. Az enzimek által katalizált reakcióban lévő reagenseket szubsztrátoknak, a keletkező anyagokat pedig termékeknek nevezzük. Az enzimek specifikusak a szubsztrátokra (az ATPáz csak az ATP hasítását katalizálja, a foszforiláz kináz pedig csak a foszforilázt).

Az enzimaktivitás szabályozható aktivátorokkal és inhibitorokkal (aktivátorok - növekedés, inhibitorok - csökkenés).

A fehérje enzimek a riboszómákon, míg az RNS a sejtmagban szintetizálódnak.

Az "enzim" és az "enzim" kifejezéseket régóta szinonimaként használják (az elsőt főleg az orosz és német tudományos irodalomban, a másodikat angolul és franciául használják).

Az enzimek tudományát ún enzimológia, és nem fermentológia (hogy ne keveredjenek a latin és a görög szavak gyökerei).

Tanulmánytörténet

Term enzim században javasolta van Helmont kémikus az emésztés mechanizmusainak tárgyalásakor.

In con. XVIII - korai. 19. század már korábban is ismerték, hogy a húst a gyomornedv emészti fel, a keményítő pedig a nyál hatására alakul cukorrá. Ezeknek a jelenségeknek a mechanizmusa azonban ismeretlen volt.

A 19. században Louis Pasteur a szénhidrátok etil-alkohollá való átalakulását vizsgálva élesztő hatására arra a következtetésre jutott, hogy ezt a folyamatot (fermentációt) az élesztősejtekben található valamilyen életerő katalizálja.

Több mint száz évvel ezelőtt a feltételek enzimÉs enzim eltérő álláspontokat tükrözött egyrészt L. Pasteur, másrészt M. Berthelot és J. Liebig között az alkoholos erjesztés természetéről folyó elméleti vitában. Tulajdonképpen enzimek(a lat. fermentum- kovász) "szervezett enzimeknek" (vagyis maguknak az élő mikroorganizmusoknak) nevezték, és a kifejezést enzim(a görögül ἐν- - in- és ζύμη - élesztő, kovász) 1876-ban W. Kuehne javasolta a sejtek által például a gyomorba (pepszin) vagy a belekben (tripszin, amiláz) kiválasztott "szervezetlen enzimekre". Két évvel L. Pasteur 1897-es halála után E. Buchner kiadta az „Alkoholikus erjesztés élesztősejtek nélkül” című munkáját, amelyben kísérletileg kimutatta, hogy a sejtmentes élesztőlé ugyanúgy alkoholos erjedést hajt végre, mint az el nem pusztított élesztősejtek. 1907-ben ezért a munkájáért Nobel-díjat kapott. J. Sumner 1926-ban izolált először nagy tisztaságú kristályos enzimet (ureázt). Az elkövetkező 10 évben több enzimet izoláltak, és végre bebizonyosodott az enzimek fehérjetermészete.

Az RNS katalitikus aktivitását először az 1980-as években fedezte fel a pre-rRNS-ben Thomas Check, aki az RNS splicingjét vizsgálta csillósokban. Tetrahymena thermophila. Kiderült, hogy a ribozim a Tetrahymena pre-rRNS-molekula egy része, amelyet az extrakromoszómális rDNS-gén intronja kódol; ez a régió autosplicingot hajtott végre, azaz kivágta magát az rRNS érés során.

Enzim funkciók

Az enzimek minden élő sejtben jelen vannak, és hozzájárulnak egyes anyagok (szubsztrátok) más anyagokká (termékekké) való átalakulásához. Az enzimek katalizátorként működnek szinte minden élő szervezetben végbemenő biokémiai reakcióban. 2013-ig több mint 5000 különböző enzimet írtak le. Minden életfolyamatban fontos szerepet játszanak, irányítják és szabályozzák a szervezet anyagcseréjét.

Mint minden katalizátor, az enzimek is felgyorsítják az előre és fordított reakciókat azáltal, hogy csökkentik a folyamat aktiválási energiáját. Ebben az esetben a kémiai egyensúly nem tolódik el sem előre, sem az ellenkező irányba. Az enzimek megkülönböztető jellemzője a nem fehérje katalizátorokhoz képest a nagy specificitásuk: egyes szubsztrátok kötési állandója egy fehérjéhez elérheti a 10-10 mol/l-t vagy az alatti értéket is. Minden enzimmolekula több ezertől több millió "művelet" végrehajtására képes másodpercenként.

Például egy borjú gyomrának nyálkahártyájában található renin enzim egyik molekulája 37 °C-os hőmérsékleten 10 perc alatt körülbelül 106 molekula tejkazeinogént alvasztott meg.

Ugyanakkor az enzimek hatékonysága jóval magasabb, mint a nem fehérje katalizátoroké - az enzimek milliós és milliárdos, a nem fehérje katalizátorok százai és ezrei gyorsítják a reakciót. Lásd még: katalitikusan tökéletes enzim

FejezetIV.3.

Enzimek

A szervezetben zajló anyagcsere úgy definiálható, mint a kívülről érkező vegyületek által végbemenő összes kémiai átalakulás összessége. Ezek az átalakulások magukban foglalják a kémiai reakciók összes ismert típusát: funkciós csoportok intermolekuláris átvitele, kémiai kötések hidrolitikus és nem hidrolitikus felhasadása, intramolekuláris átrendeződés, kémiai kötések új kialakulása és oxidatív - redukáló reakciók. Az ilyen reakciók a szervezetben rendkívül nagy sebességgel csak katalizátorok jelenlétében mennek végbe. Minden biológiai katalizátor fehérje jellegű anyag, és enzimeknek (a továbbiakban F) vagy enzimeknek (E) nevezik.

Az enzimek nem összetevői a reakcióknak, csak felgyorsítják az egyensúly elérését azáltal, hogy mind a direkt, mind a fordított átalakulások sebességét növelik. A reakció felgyorsulása az aktiválási energia csökkenése miatt következik be - ez az energiagát, amely elválasztja a rendszer egyik állapotát (kezdeti kémiai vegyület) másiktól (reakciótermék).

Az enzimek sokféle reakciót gyorsítanak fel a szervezetben. Tehát a hagyományos kémia szempontjából egészen egyszerű, a szénsavból a víz leválasztásának reakciójához CO 2 képződéssel egy enzim részvétele szükséges, mert e nélkül túl lassan halad a vér pH-jának szabályozásához. Az enzimek katalitikus hatásának köszönhetően a szervezetben lehetővé válik olyan reakciók lefolytatása, amelyek katalizátor nélkül százszor és ezerszer lassabban mennének végbe.

Enzim tulajdonságok

1. Befolyás a kémiai reakció sebességére: az enzimek növelik a kémiai reakció sebességét, de maguk nem fogyasztódnak el.

A reakciósebesség a reakciókomponensek koncentrációjának egységnyi idő alatti változása. Ha előre megy, akkor arányos a reaktánsok koncentrációjával, ha ellenkező irányba, akkor arányos a reakciótermékek koncentrációjával. Az előre és fordított reakciók sebességének arányát egyensúlyi állandónak nevezzük. Az enzimek nem tudják megváltoztatni az egyensúlyi állandó értékeit, de az egyensúlyi állapot enzimek jelenlétében gyorsabban jön létre.

2. Az enzimek hatásának sajátossága. A szervezet sejtjeiben 2-3 ezer reakció játszódik le, melyek mindegyikét egy bizonyos enzim katalizálja. Egy enzim hatásának sajátossága az a képesség, hogy felgyorsítson egy adott reakció lefolyását anélkül, hogy befolyásolná a többi, még nagyon hasonló reakció sebességét is.

Megkülönböztetni:

Abszolút– amikor F csak egy konkrét reakciót katalizál ( argináz- az arginin lebontása)

Relatív(speciális csoport) - F katalizálja a reakciók egy bizonyos osztályát (pl. hidrolitikus hasítás), vagy olyan reakciókat, amelyekben egy bizonyos anyagcsoport vesz részt.

Az enzimek specifitása az egyedi aminosav-szekvenciának köszönhető, amely meghatározza a reakciókomponensekkel kölcsönhatásba lépő aktív centrum konformációját.

Az olyan anyagot, amelynek kémiai átalakulását egy enzim katalizálja, ún szubsztrát ( S ) .

3. Az enzimek aktivitása a reakciósebesség változó mértékű gyorsításának képessége. Az aktivitást a következők fejezik ki:

1) Nemzetközi aktivitási egység - (NE) az 1 μM szubsztrát 1 perc alatti átalakulását katalizáló enzim mennyisége.

2) Katalakh (macska) - a katalizátor (enzim) mennyisége, amely képes 1 mól szubsztrátot 1 másodperc alatt átalakítani.

3) Fajlagos aktivitás – a vizsgált mintában lévő aktivitási egységek száma (a fentiek bármelyike) a mintában lévő fehérje teljes tömegéhez viszonyítva.

4) Ritkábban moláris aktivitást alkalmaznak - percenként egy enzimmolekulával átalakított szubsztrátmolekulák száma.

tevékenység attól függ hőfok . Ez vagy az az enzim mutatja a legnagyobb aktivitást optimális hőmérsékleten. Élő szervezet F értékénél ez az érték +37,0 és +39,0 között van° C, az állat típusától függően. A hőmérséklet csökkenésével a Brown-mozgás lelassul, a diffúzió sebessége csökken, és ennek következtében az enzim és a reakciókomponensek (szubsztrátok) közötti komplexképződés folyamata lelassul. +40 - +50 feletti hőmérséklet-emelkedés esetén° Az enzimmolekula, amely egy fehérje, denaturációs folyamaton megy keresztül. Ugyanakkor a kémiai reakció sebessége érezhetően csökken (4.3.1. ábra).

Az enzimaktivitás attól is függ közepes pH . Legtöbbjüknél van egy bizonyos optimális pH-érték, amelynél aktivitásuk maximális. Mivel a sejt több száz enzimet tartalmaz, és mindegyiknek megvannak a saját pH-határai, a pH változása az egyik fontos tényező az enzimaktivitás szabályozásában. Tehát egy kémiai reakció eredményeként egy bizonyos enzim részvételével, amelynek pH-értéke 7,0-7,2 tartományban van, termék keletkezik, amely sav. Ebben az esetben a pH-érték 5,5-6,0 tartományba tolódik el. Az enzim aktivitása meredeken csökken, a termékképződés sebessége lelassul, de egy másik enzim aktiválódik, amelyhez ezek a pH-értékek optimálisak, és az első reakció terméke további kémiai átalakuláson megy keresztül. (Egy másik példa a pepszinről és a tripszinről).

Az enzimek kémiai természete. Az enzim szerkezete. Aktív és alloszterikus központok

Minden enzim 15 000 és több millió Da közötti molekulatömegű fehérje. A kémiai szerkezet szerint azok egyszerű enzimek (csak AA-ból állnak) és összetett enzimek (nem fehérje részük vagy protéziscsoportjuk van). A fehérje részt ún apoenzim, és nem fehérje, ha kovalensen kapcsolódik egy apoenzimhez, akkor az ún koenzim, és ha a kötés nem kovalens (ionos, hidrogénes) - kofaktor . A protéziscsoport funkciói a következők: részvétel a katalízisben, az enzim és a szubsztrát érintkezése, az enzimmolekula térbeli stabilizálása.

A szervetlen anyagok általában kofaktorként működnek - cink, réz, kálium, magnézium, kalcium, vas, molibdén ionjai.

A koenzimek az enzimmolekula szerves részének tekinthetők. Ezek szerves anyagok, amelyek között vannak: nukleotidok ( ATP, UMF stb.), vitaminok vagy származékaik ( TDF- tiaminból ( AZ 1-BEN), FMN- riboflavinból ( IN 2), koenzim A- pantoténsavból ( 3-BAN), NAD stb.) és tetrapirrol koenzimek - hemek.

A reakció katalízise során nem a teljes enzimmolekula kerül érintkezésbe a szubsztráttal, hanem annak egy bizonyos része, amely ún. aktív központ. A molekulának ez a zónája nem aminosavszekvenciából áll, hanem akkor jön létre, amikor a fehérjemolekula harmadlagos szerkezetbe csavarodik. Az aminosavak külön szakaszai közelednek egymáshoz, és az aktív centrum bizonyos konfigurációját alkotják. Fontos tulajdonság az aktív centrum szerkezete - felülete komplementer a szubsztrát felületével, azaz. Az enzim ezen zónájának AA-maradékai képesek kémiai kölcsönhatásba lépni a szubsztrát bizonyos csoportjaival. Ezt el lehet képzelni az enzim aktív helye kulcsként és zárként illeszkedik a szubsztrát szerkezetéhez.

BAN BEN aktív központ két zónát különböztetünk meg: kötőközpont, az aljzat rögzítéséért felelős, ill katalitikus központ felelős a szubsztrát kémiai átalakulásáért. A legtöbb enzim katalitikus centrumának összetétele olyan AA-kat tartalmaz, mint a Ser, Cys, His, Tyr, Lys. A katalitikus központban lévő komplex enzimek kofaktorral vagy koenzimmel rendelkeznek.

Az aktív központon kívül számos enzim szabályozó (allosztérikus) központtal van felszerelve. A katalitikus aktivitását befolyásoló anyagok kölcsönhatásba lépnek az enzim ezen zónájával.

Az enzimek hatásmechanizmusa

A katalízis aktusa három egymást követő szakaszból áll.

1. Az aktív centrumon keresztüli kölcsönhatás során enzim-szubsztrát komplex kialakulása.

2. A szubsztrát kötődése az aktív centrum több pontján történik, ami a szubsztrát szerkezetének megváltozásához, deformációjához vezet a molekulában lévő kötési energia változása miatt. Ez a második szakasz, amelyet szubsztrát aktiválásnak neveznek. Amikor ez megtörténik, a szubsztrátum bizonyos kémiai módosítása és átalakulása új termékké vagy termékekké.

3. Egy ilyen átalakulás következtében az új anyag (termék) elveszti az enzim aktív centrumában való megtartási képességét, és az enzim-szubsztrát, pontosabban az enzim-termék komplex disszociál (szétbomlik).

A katalitikus reakciók típusai:

A + E \u003d AE \u003d BE \u003d E + B

A + B + E \u003d AE + B \u003d ABE \u003d AB + E

AB + E \u003d ABE \u003d A + B + E, ahol E egy enzim, A és B szubsztrátok vagy reakciótermékek.

Enzimatikus effektorok - olyan anyagok, amelyek megváltoztatják az enzimatikus katalízis sebességét, és ezáltal szabályozzák az anyagcserét. Közülük megkülönböztethetők inhibitorok - a reakció sebességének lassítása és aktivátorok - az enzimatikus reakció felgyorsítása.

A reakció gátlásának mechanizmusától függően kompetitív és nem kompetitív inhibitorokat különböztetünk meg. A kompetitív inhibitor molekula szerkezete hasonló a szubsztrát szerkezetéhez, és egybeesik az aktív centrum felületével, mint egy kulcs a zárral (vagy majdnem egybeesik). Ennek a hasonlóságnak a mértéke még nagyobb is lehet, mint a hordozónál.

Ha A + E \u003d AE \u003d BE \u003d E + B, akkor I + E \u003d IE¹

A katalizálni képes enzim koncentrációja csökken, és a reakciótermékek képződésének sebessége meredeken csökken (4.3.2. ábra).

Számos endogén és exogén eredetű (azaz a szervezetben képződő és kívülről érkező – xenobiotikum) vegyi anyag kompetitív inhibitorként működik. Az endogén anyagok az anyagcsere szabályozói, és antimetabolitoknak nevezik. Sokukat talán onkológiai és mikrobiális betegségek kezelésére használják. gátolják a mikroorganizmusok (szulfonamidok) és a daganatsejtek kulcsfontosságú metabolikus reakcióit. De a szubsztrát feleslegével és a kompetitív inhibitor alacsony koncentrációjával a hatása megszűnik.

A második típusú inhibitorok nem kompetitívek. Kölcsönhatásba lépnek az enzimmel az aktív helyen kívül, és a szubsztrát felesleg nem befolyásolja gátló képességüket, mint a kompetitív inhibitorok esetében. Ezek az inhibitorok vagy az enzim bizonyos csoportjaival lépnek kölcsönhatásba (a nehézfémek a Cys tiolcsoportjaihoz kötődnek), vagy leggyakrabban a szabályozó központtal, ami csökkenti az aktív centrum kötőképességét. A gátlás tényleges folyamata az enzimaktivitás teljes vagy részleges elnyomása, miközben megtartja annak elsődleges és térbeli szerkezetét.

Vannak reverzibilis és irreverzibilis gátlások is. Az irreverzibilis inhibitorok inaktiválják az enzimet azáltal, hogy kémiai kötést hoznak létre az AA-val vagy más szerkezeti komponensekkel. Általában ez egy kovalens kötés az aktív központ egyik helyével. Egy ilyen komplex fiziológiás körülmények között gyakorlatilag nem disszociál. Egy másik esetben az inhibitor megzavarja az enzimmolekula konformációs szerkezetét - denaturációt okozva.

A reverzibilis inhibitorok hatása szubsztrát felesleggel vagy olyan anyagok hatására eltávolítható, amelyek megváltoztatják az inhibitor kémiai szerkezetét. A kompetitív és nem kompetitív inhibitorok a legtöbb esetben reverzibilisek.

Az inhibitorokon kívül ismertek az enzimatikus katalízis aktivátorai is. Ők:

1) megvédi az enzimmolekulát az inaktiváló hatásoktól,

2) komplexet képez a szubsztráttal, amely aktívabban kötődik az F aktív centrumához,

3) Egy kvaterner szerkezetű enzimmel kölcsönhatásba lépve elválasztják annak alegységeit, és ezáltal megnyitják a szubsztrát hozzáférését az aktív centrumhoz.

Az enzimek eloszlása ​​a szervezetben

A fehérjék, nukleinsavak és az energia-anyagcsere enzimek szintézisében részt vevő enzimek a szervezet minden sejtjében jelen vannak. De a sejtek, amelyek teljesítenek speciális funkciók speciális enzimeket tartalmaznak. Tehát a hasnyálmirigy Langerhans-szigeteinek sejtjei olyan enzimeket tartalmaznak, amelyek katalizálják az inzulin és a glukagon hormonok szintézisét. Azokat az enzimeket, amelyek csak bizonyos szervek sejtjeire jellemzőek, szervspecifikusnak nevezzük: argináz ill. urokináz- máj, savas foszfatáz- prosztata. Az ilyen enzimek koncentrációjának megváltoztatásával a vérben megítélik a patológiák jelenlétét ezekben a szervekben.

A sejtben az egyes enzimek a citoplazmában eloszlanak, mások a mitokondriumok membránjaiba és az endoplazmatikus retikulumba ágyazódnak, ilyen enzimek képződnek. rekeszek, amelyekben az anyagcsere bizonyos, egymással szorosan összefüggő szakaszai következnek be.

Számos enzim képződik a sejtekben, és inaktív állapotban kiválasztódik az anatómiai üregekbe - ezek proenzimek. Gyakran proenzimek formájában proteolitikus enzimek (lebontják a fehérjéket) képződnek. Ezután pH vagy más enzimek, szubsztrátok hatására kémiai módosulásuk következik be, és az aktív centrum elérhetővé válik a szubsztrátok számára.

Vannak még izoenzimek - molekulaszerkezetükben eltérő, de ugyanazt a funkciót betöltő enzimek.

Az enzimek nómenklatúrája és osztályozása

Az enzim neve a következő részekből áll:

1. annak a hordozónak a neve, amellyel kölcsönhatásba lép

2. a katalizált reakció természete

3. az enzimosztály neve (de ez nem kötelező)

4. utótag -aza-

piruvát - dekarboxil - aza, szukcinát - dehidrogén - aza

Mivel körülbelül 3 ezer enzimet ismerünk már, ezeket osztályozni kell. Jelenleg az enzimek nemzetközi osztályozását fogadták el, amely a katalizált reakció típusán alapul. 6 osztály van, amelyek viszont számos alosztályra oszlanak (ebben a könyvben csak szelektíven szerepelnek):

1. Oxidoreduktázok. Redox reakciókat katalizálni. 17 alosztályra vannak osztva. Minden enzim tartalmaz egy nem fehérje részt hem vagy a B 2, B 5 vitaminok származékai formájában. Az oxidáción átesett szubsztrát hidrogéndonorként működik.

1.1. A dehidrogenázok eltávolítják a hidrogént az egyik szubsztrátumról, és átadják más szubsztrátumoknak. Koenzimek NAD, NADP, FAD, FMN. Az enzim által lehasított hidrogént befogadják, redukált formába (NADH, NADPH, FADH) alakulnak, és egy másik enzim-szubsztrát komplexbe juttatják, ahol leadják.

1.2. Oxidáz - katalizálja a hidrogén oxigénbe történő átvitelét víz vagy H 2 O 2 képződésével. F. Citokromoxiszdáz légzőlánc.

RH + NAD H + O 2 = ROH + NAD + H 2 O

1.3. Monooxidázok - citokróm P450. Szerkezete szerint hemo- és flavoprotein egyaránt. A lipofil xenobiotikumokat hidroxilezi (a fent leírt mechanizmus szerint).

1.4. PeroxidázokÉs kataláz- katalizálja az anyagcsere-reakciók során képződő hidrogén-peroxid bomlását.

1.5. Oxigenázok – katalizálják a szubsztráthoz történő oxigén hozzáadásának reakcióit.

2. Transzferázok - katalizálja a különböző gyökök átvitelét a donor molekuláról az akceptor molekulára.

DE de+ E + B = E de+ A + B = E + B de+ A

2.1. Metiltranszferáz (CH 3 -).

2.2 Karboxil- és karbamoiltranszferázok.

2.2. Aciltranszferázok – Koenzim A (acilcsoport transzfer – R-C=O).

Példa: az acetilkolin neurotranszmitter szintézise (lásd a "Fehérje anyagcsere" fejezetet).

2.3. A hexozil-transzferázok katalizálják a glikozil-maradékok átvitelét.

Példa: egy glükózmolekula leválasztása a glikogénből a következő hatására foszforiláz.

2.4. Aminotranszferázok - aminocsoportok átvitele

R1-CO-R2+R1-CH- NH 3 - R 2 \u003d R 1 - CH - NH 3 - R2 + R1 - CO - R2

játszanak fontos szerep az AK átalakulásában. A közös koenzim a piridoxál-foszfát.

Példa: alanin aminotranszferáz(AlAT): piruvát + glutamát = alanin + alfa-ketoglutarát (lásd a "Fehérjeanyagcsere" fejezetet).

2.5. Foszfotranszferézis (kináz) - katalizálja a foszforsav-maradék átvitelét. A legtöbb esetben az ATP a foszfát donor. Az ebbe az osztályba tartozó enzimek főként a glükóz lebontási folyamatában vesznek részt.

Példa: Hexo (glüko) kináz.

3. Hidrolázok - katalizálja a hidrolízis reakcióit, azaz anyagok felhasadása hozzáadással a vízkötés megszakadásának helyén. Ebbe az osztályba főleg az emésztőenzimek tartoznak, ezek egykomponensűek (nem tartalmaznak fehérjementes részt)

R1-R2 + H 2O \u003d R1H + R2OH

3.1. Eszterázok - lebontják az alapvető kötéseket. Ez az enzimek nagy alosztálya, amelyek a tiol-észterek, foszfoészterek hidrolízisét katalizálják.
Példa: NH 2 ).

Példa: argináz(karbamid ciklus).

4. Liases - katalizálja a molekulák hasítási reakcióit víz hozzáadása nélkül. Ezeknek az enzimeknek van egy nem fehérje része, tiamin-pirofoszfát (B 1) és piridoxál-foszfát (B 6) formájában.

4.1. C-C kötés liázok. Ezeket általában dekarboxilázoknak nevezik.

Példa: piruvát-dekarboxiláz.

5.Izomerázok - katalizálja az izomerizációs reakciókat.

Példa: foszfopentóz izomeráz, pentóz-foszfát izomeráz(a pentóz-foszfát út nem oxidatív ágának enzimei).

6. Ligázok katalizálja a bonyolultabb anyagok szintézisét az egyszerű anyagokból. Az ilyen reakciók az ATP energia felhasználásával mennek végbe. Az ilyen enzimek nevéhez hozzáadják a szintetázt.

IRODALOM A FEJEZETHEZ IV.3.

1. Byshevsky A. Sh., Tersenov O. A. Biokémia egy orvos számára // Jekatyerinburg: Ural worker, 1994, 384 p.;

2. Knorre D. G., Myzina S. D. biológiai kémia. - M .: Magasabb. iskola 1998, 479 pp.;

3. Filippovich Yu. B., Egorova T. A., Sevastyanova G. A. Workshop az általános biokémiáról // M.: Prosveschenie, 1982, 311 pp.;

4. Lehninger A. Biokémia. A sejt szerkezetének és funkcióinak molekuláris alapjai // M.: Mir, 1974, 956 p.;

5. Pustovalova L.M. Műhely a biokémiáról // Rostov-on-Don: Phoenix, 1999, 540 p.

Küldje el a jó munkát a tudásbázis egyszerű. Használja az alábbi űrlapot

Azok a hallgatók, végzős hallgatók, fiatal tudósok, akik tanulmányaikban és munkájuk során használják fel a tudásbázist, nagyon hálásak lesznek Önnek.

Házigazda: http://www.allbest.ru/

Bevezetés

biológiai enzim fehérje

Tudomásunk szerint nagyon sok olyan enzim található a szervezetünkben, amelyek hozzájárulnak az anyagcsere folyamatok (légzés, emésztés, izomösszehúzódás, fotoszintézis) végrehajtásához, amelyek meghatározzák az élet folyamatát. Ezért a gyógyszereket széles körben alkalmazzák a gennyes-nekrotikus folyamatokkal járó betegségek, trombózis és thromboembolia, valamint emésztési zavarok kezelésében. Az enzimkészítmények az onkológiai betegségek kezelésében is alkalmazásra kerültek.

Az enzimek igen fontos szerepet játszanak számos technológiai folyamatban. Enzimek Jó minőség lehetővé teszi a technológia fejlesztését, a költségek csökkentését, sőt új termékek beszerzését is.

Jelenleg több mint 25 iparágban alkalmazzák az enzimeket: ez az élelmiszeripar, valamint a gyógyszeripar, a cellulóz- és papíripar, a könnyűipar, valamint mezőgazdaság.

Összefoglalóm célja: az enzim és az enzimatikus katalízis (biokatalízis) fogalmának részletes tanulmányozása.

1) Mik azok az enzimek, milyen szerepük van?

2) Az enzimek szerkezete és hatásmechanizmusa.

3) Tekintsük az enzimek funkcióit!

4) Az enzimek működési elve.

5) Az enzimek osztályozása.

6) Az enzimek köre.

7) Az enzimek izolálásának módszerei.

8) Az enzimreakciókat befolyásoló tényezők?

1. Mik azok az enzimek, és milyen szerepük van?

Az enzimek fehérje jellegű szerves anyagok, amelyek a sejtekben szintetizálódnak, és sokszorosára gyorsítják a bennük lezajló reakciókat anélkül, hogy kémiai átalakuláson mennének keresztül. A hasonló hatású anyagok az élettelen természetben léteznek, és katalizátoroknak nevezzük. Az enzimeket néha enzimeknek is nevezik (a görög. en - belül, zyme - kovász). Minden élő sejt nagyon nagy mennyiségű enzimet tartalmaz, amelyek katalitikus aktivitásától függ a sejtek működése. A sejtben előforduló sokféle reakció közül szinte mindegyikhez egy adott enzim részvétele szükséges. Tanulással kémiai tulajdonságok Az enzimek és az általuk katalizált reakciók a biokémia egy speciális, nagyon fontos területén, az enzimológiában vesznek részt.

Sok enzim szabad állapotban van a sejtben, egyszerűen feloldódnak a citoplazmában; mások összetett, magasan szervezett struktúrákhoz kapcsolódnak. Vannak olyan enzimek is, amelyek általában a sejten kívül vannak; így a keményítő és a fehérjék lebontását katalizáló enzimeket a hasnyálmirigy kiválasztja a belekbe. Enzimeket és sok mikroorganizmust választ ki.

Az enzimekre vonatkozó első adatokat az erjedési és emésztési folyamatok tanulmányozásával nyertük. L. Pasteur nagyban hozzájárult a fermentáció tanulmányozásához, de úgy gondolta, hogy csak az élő sejtek képesek a megfelelő reakciókat végrehajtani. A 20. század elején E. Buchner kimutatta, hogy a szacharóz erjesztése szén-dioxid és etil-alkohol képződésével sejtmentes élesztőkivonattal katalizálható. Ez fontos felfedezésösztönzőként szolgált a sejtenzimek izolálásához és tanulmányozásához. 1926-ban J. Sumner, a Cornell Egyetem (USA) munkatársa izolálta az ureázt; ez volt az első gyakorlatilag tiszta formában kapott enzim. Azóta több mint 700 enzimet fedeztek fel és izoláltak, de sokkal több létezik élő szervezetekben. Az egyes enzimek azonosítása, izolálása és tulajdonságainak vizsgálata központi helyet foglal el a modern enzimológiában.

Az energiaátalakítás alapvető folyamataiban, például a cukrok lebontásában, a nagy energiájú adenozin-trifoszfát (ATP) képződésében és hidrolízisében részt vevő enzimek minden sejttípusban – állati, növényi, bakteriális – jelen vannak. Vannak azonban olyan enzimek, amelyek csak bizonyos szervezetek szöveteiben termelődnek. Így a cellulóz szintézisében részt vevő enzimek a növényi sejtekben megtalálhatók, az állati sejtekben azonban nem. Ezért fontos különbséget tenni az "univerzális" enzimek és bizonyos sejttípusokra specifikus enzimek között. Általánosságban elmondható, hogy minél specializáltabb egy sejt, annál valószínűbb, hogy szintetizálja azt az enzimkészletet, amely egy adott sejtfunkció elvégzéséhez szükséges.

Jelenleg több mint 3000 enzim ismeretes. Mindegyiknek számos sajátos tulajdonsága van, amelyek megkülönböztetik őket a szervetlen katalizátoroktól. Csak az emberi testben másodpercenként több ezer enzimreakció megy végbe. Az enzimek minden életfolyamatban fontos szerepet játszanak, irányítják és szabályozzák a szervezet anyagcseréjét.

Azt is meg kell jegyezni, hogy minden természet kizárólag biokatalízis révén létezik. Nem csoda, hogy a nagy orosz fiziológus, Nobel díjas I.P. Pavlov az enzimeket az élet hordozóinak nevezte.

2. Az enzimek felépítése és hatásmechanizmusa

Mint minden fehérjét, az enzimeket is aminosavak lineáris láncaként szintetizálják, amelyek meghatározott módon hajtódnak össze. Minden aminosav szekvencia meghatározott módon hajtódik össze, és az így létrejövő molekula (fehérjegömb) egyedi tulajdonságokkal rendelkezik. Több fehérjelánc kombinálható fehérjekomplexbe. A fehérjék harmadlagos szerkezete megsemmisül, ha hevítik vagy bizonyos vegyi anyagoknak vannak kitéve.

A reakció katalizálásához egy enzimnek egy vagy több szubsztráthoz kell kötődnie. Az enzim fehérjelánca úgy hajtódik fel, hogy a gömböcske felületén rés, vagy mélyedés képződik, ahol a szubsztrátok megkötődnek. Ezt a régiót szubsztrátkötő helynek nevezik.

Rizs. 1. Az enzim szerkezete

3. Enzim funkciók

Az enzimek minden élő sejtben jelen vannak, és hozzájárulnak bizonyos anyagok átalakulásához (szubsztrátok) másoknak (Termékek).

Az enzimek katalizátorként működnek szinte minden élő szervezetben végbemenő biokémiai reakcióban – több mint 4000 különböző biokémiai reakciót katalizálnak.

Az enzimek minden életfolyamatban fontos szerepet játszanak, irányítják és szabályozzák a szervezet anyagcseréjét.

Mint minden katalizátor, az enzimek is felgyorsítják az előre és fordított reakciókat azáltal, hogy csökkentik a folyamat aktiválási energiáját. Ebben az esetben a kémiai egyensúly nem tolódik el sem előre, sem az ellenkező irányba.

Az enzimek megkülönböztető jellemzője a nem fehérje katalizátorokhoz képest nagy specifitásuk - egyes szubsztrátok kötési állandója egy fehérjéhez elérheti a 10? 10 mol/l vagy kevesebb. Minden enzimmolekula több ezertől több millió "művelet" végrehajtására képes másodpercenként.

Például egy borjú gyomrának nyálkahártyájában található renin enzim egyik molekulája 37 °C-on 10 perc alatt körülbelül 106 molekula tejkazeinogént alvasztott meg.

Ugyanakkor az enzimek hatékonysága jóval magasabb, mint a nem fehérje katalizátoroké - az enzimek milliós és milliárdos, a nem fehérje katalizátorok százai és ezrei gyorsítják a reakciót.

4. Hogyan működnek az enzimek

Az olyan anyagot, amely enzim jelenlétében átalakul, szubsztrátnak nevezzük. A szubsztrát csatlakozik az enzimhez, ami felgyorsítja molekulájában egyes kémiai kötések felbomlását és mások létrejöttét; a keletkező termék leválik az enzimről.

Az enzimek nem kopnak a reakció során. A reakció befejeződése után felszabadulnak, és azonnal készen állnak a következő reakció elindítására. Elméletileg ez a végtelenségig folytatódhat, legalábbis addig, amíg az összes hordozót el nem használják. A gyakorlatban érzékenységük és szerves összetételük miatt az enzimek élettartama korlátozott.

A biokémiai irodalomban használt figuratív kifejezés szerint az enzim úgy közelít a szubsztráthoz, mint egy „zár kulcsa”. Ezt a szabályt E. Fischer fogalmazta meg 1894-ben azon a tényen alapulva, hogy az enzimhatás specifitását a szubsztrát geometriai szerkezete és az enzim aktív központja közötti szigorú megfelelés határozza meg. Az enzim a szubsztráthoz kötve rövid életű enzim-szubsztrát komplexet képez (köztes komplex képződés). Ez a modell azonban megmagyarázza az enzimek nagy specifitását, de nem magyarázza meg a gyakorlatban megfigyelhető átmeneti állapot stabilizáció jelenségét. Az 1950-es években ezt a statikus nézetet felváltotta D. Koshland hipotézise a szubsztrát és az enzim indukált konformitásáról. Lényege abban rejlik, hogy a szubsztrát szerkezete és az enzim aktív centruma közötti térbeli megfelelés az egymással való kölcsönhatás pillanatában jön létre, ami a „kesztyű-kéz” képlettel fejezhető ki. Az enzimek általában nem merev, hanem rugalmas molekulák. Egy enzim aktív helye megváltoztathatja a konformációt a szubsztrát megkötése után. Az aktív hely aminosavainak oldalsó csoportjai olyan pozíciót foglalnak el, amely lehetővé teszi az enzim számára katalitikus funkciójának ellátását. Egyes esetekben a szubsztrát molekula is megváltoztatja a konformációt az aktív helyhez való kötődés után. A kulcszáras modellel ellentétben az indukált illeszkedési modell nemcsak az enzimek specificitását magyarázza, hanem az átmeneti állapot stabilizálását is.

De közben nagyobb fejlődés tudomány, a Koshland-hipotézist fokozatosan felváltja a topokémiai megfelelés hipotézise. Megtartva a szubsztrát és az enzim kölcsönösen indukált beállításának hipotézisének főbb rendelkezéseit, felhívja a figyelmet arra, hogy az enzimek hatásának specifitása elsősorban a szubsztrát azon részének felismeréséből adódik, amely a katalízis során nem változik. . A szubsztrát ezen része és az enzim szubsztrát központja között számos pontszerű hidrofób kölcsönhatás és hidrogénkötés jön létre.

5. Az enzimek osztályozása

Jelenleg körülbelül 2 ezer enzim ismert, de ez a lista nem teljes. A katalizált reakció típusától függően az összes enzim 6 osztályba sorolható:

Ш Az oxidoreduktáz redox reakcióit katalizáló enzimek;

Ш Különféle csoportok (metil-, amino- és foszfocsoportok és mások) transzferenzimei - transzferázok.

Ш A kémiai kötések hidrolízisét végző enzimek - hidrolázok

Ш Különböző csoportok (NH3, CO2, H2O és mások) szubsztrátjáról nem hidrolitikus hasítás enzimei - liázok.

Ш Enzimek, amelyek felgyorsítják a kötések szintézisét a biológiai molekulákban energiadonorok részvételével, mint például az ATP - ligázok.

III Az izomerek egymásmá alakulását katalizáló enzimek az izomerázok.

Oxidoreduktáz olyan enzimek, amelyek katalizálják a redox folyamatokat a szervezetben. Hidrogén és elektronok átvitelét végzik, és általános nevükön dehidrogenázok, oxidázok és peroxidázok néven ismertek. Ezek az enzimek abban különböznek egymástól, hogy specifikus koenzimeket és protetikus csoportokat tartalmaznak. Funkciós donorcsoportokra oszthatók, amelyekből hidrogént vagy elektronokat fogadnak el, és akceptorokra, amelyekbe továbbítják őket (CH-OH csoport, CH - NH csoport, C-NH csoport és mások).

Transzferázok- ezek az atomcsoportokat átadó enzimek (attól függően, hogy melyik csoportot adják át, ennek megfelelően nevezik őket). A transzferázok az általuk hordozott maradékanyagok sokfélesége miatt részt vesznek az intermedier anyagcserében.

Hidrolázok- ezek olyan enzimek, amelyek katalizálják a különböző szubsztrátok hidrolitikus hasítását (vízmolekulák részvételével). Ettől függően megkülönböztetünk köztük észterázokat, amelyek a tiol-észterek karbonsavai (lipáz) közötti észterkötést, a foszfoészter kötést stb. glikozidázok, amelyek a glikozidkötéseket hasítják, a peptid-hidrolázok, amelyek a peptidkötésekre hatnak, és mások.

Liase- ebbe a csoportba tartoznak azok az enzimek, amelyek nem hidrolitikus módon, kettős kötések kialakításával képesek a szubsztrátról különböző csoportokat lehasítani, vagy éppen ellenkezőleg, csoportokat hozzáadni kettős kötés. A hasítás H2O-t vagy CO2-t vagy nagy maradékanyagokat, például acetil-CoA-t termel. A liázok nagyon fontos szerepet játszanak az anyagcsere folyamatokban.

Izomerázok- olyan enzimek, amelyek katalizálják az izomer formák egymásba való átalakulását, azaz különböző csoportok intramolekuláris átalakulását végzik. Nemcsak az optikai és geometriai izomerek kölcsönös átalakulásának reakcióit serkentő enzimek tartoznak ide, hanem azok is, amelyek elősegíthetik az aldózok ketózokká történő átalakulását.

Ligázok. Korábban ezeket az enzimeket nem különítették el a liázoktól, mivel az utóbbiak reakciója gyakran két irányban megy végbe, de mostanában kiderült, hogy a szintézis és a bomlás a legtöbb esetben különböző enzimek hatására megy végbe, és ennek alapján egy külön osztály. ligázokat (szintetázokat) izoláltak. A kettős hatású enzimeket bifunkcionálisnak nevezzük. A ligázok két molekula kapcsolódási reakciójában vesznek részt, vagyis olyan szintetikus folyamatokban, amelyek az ATP vagy más makroergek makroenergia kötéseinek felhasadásával járnak.

„Az enzimek első felosztása a legnagyobb csoportokra (6 osztály) nem a szubsztrát nevén, hanem az enzim által katalizált kémiai reakció természetén alapul. Továbbá az osztályokon belül az enzimeket alosztályokra osztják, a szubsztrát szerkezetétől függően. Az alosztályok egy adott osztály enzimeit egyesítik, amelyek hasonló felépítésű szubsztrátokon hatnak. A megosztottság ezzel nem ér véget. Az egyes alosztályok enzimei alosztályokra vannak osztva, amelyekben a szerkezet még szigorúbban finomodik. kémiai csoportok a szubsztrátumok megkülönböztetése egymástól. Az alosztály az osztályozás utolsó legalacsonyabb szintje. Az alosztályokon belül az egyes enzimek már felsorolva vannak.

6. Az enzimek terjedelme

Birtoklás magas fok szelektivitás, az enzimeket az élő szervezetek arra használják, hogy nagy sebességgel kémiai reakciókat hajtsanak végre; nem csak a sejt mikroterében, hanem a testen kívül is megtartják aktivitásukat. Az enzimeket széles körben használják olyan iparágakban, mint a sütés, sörfőzés, borkészítés, tea-, bőr- és szőrmegyártás, sajtkészítés, főzés (húsfeldolgozáshoz) stb. BAN BEN utóbbi évek az enzimeket a finomvegyiparban kezdték használni ilyen reakciók végrehajtására szerves kémia, mint oxidáció, redukció, dezaminálás, dekarboxilezés, dehidratálás, kondenzáció, valamint az L-sorozatú aminosavak izomereinek elválasztására és izolálására (a kémiai szintézis során L- és D-izomerek racém keverékei keletkeznek), amelyek iparban, mezőgazdaságban, gyógyászatban használják. Az enzimek finom hatásmechanizmusainak elsajátítása kétségtelenül korlátlan lehetőségeket biztosít a hasznos anyagok nagy mennyiségben és nagy sebességgel történő beszerzésére. laboratóriumi körülmények közel 100%-os hozam. Jelenleg egy új tudományág alakul ki - az ipari enzimológia, amely a biotechnológia alapja. Bármilyen szerves vagy szervetlen polimer hordozóhoz (mátrixhoz) kovalensen kapcsolt ("varrt") enzimet immobilizáltnak nevezünk. Az enzimrögzítési technika számos kulcsfontosságú enzimológiai kérdés megoldását teszi lehetővé: az enzimek hatásának magas specifitásának biztosítása és stabilitásuk növelése, a könnyű kezelhetőség, az újrafelhasználás lehetősége, valamint a szintetikus reakciókban való felhasználásuk folyamban. Ennek a technikának az iparban való alkalmazását mérnöki enzimológiának nevezik. Számos példa tanúskodik a mérnöki enzimológia óriási lehetőségeiről az ipar, az orvostudomány és a mezőgazdaság különböző területein. Különösen a mágneses keverőrúdhoz rögzített immobilizált β-galaktozidázt alkalmazzák a tej laktóztartalmának csökkentésére, pl. örökletes laktózérzékenységben szenvedő beteg gyermek szervezetében nem bomló termék. Az így kezelt tejet is sokkal tovább tárolják fagyasztva, és nem sűrűsödik be. Projekteket dolgoztak ki élelmiszeripari termékek cellulózból történő előállítására, immobilizált enzimek - cellulázok - segítségével glükózzá alakítására, amely élelmiszertermékké - keményítővé - alakítható. Az enzimtechnológia segítségével elvileg folyékony tüzelőanyagból (olajból) lehet élelmiszereket, elsősorban szénhidrátokat előállítani, glicerinaldehiddé bontani, majd enzimek közreműködésével glükózt és keményítőt szintetizálni belőle. Kétségtelenül nagy jövő előtt áll a fotoszintézis folyamatának mérnöki enzimológia segítségével történő modellezése, i.e. a CO2 rögzítésének természetes folyamata; Az immobilizálás mellett ez az egész emberiség számára létfontosságú folyamat új eredeti megközelítések kidolgozását és számos specifikus immobilizált koenzim alkalmazását teszi szükségessé. Példaként az enzimek immobilizálására és ipari felhasználására mutatunk be egy alanin aminosav előállítására és a koenzim (különösen NAD) regenerálására szolgáló folyamatos folyamat diagramját egy modellrendszerben (2. ábra). Ebben a rendszerben a kiindulási szubsztrátot (tejsavat) egy reaktorkamrába pumpálják, amely NAD+-t és két, dextránon immobilizált NAD-függő dehidrogenázt tartalmaz: laktát- és alanin-dehidrogenázokat; a reaktor másik végéből a reakciótermék - alanin - adott sebességgel távozik.

Rizs. 2. Egy aminosav előállítására szolgáló folyamatos eljárás vázlata

Az ilyen reaktorokat a gyógyszeriparban alkalmazták, például a prednizolon reumaellenes gyógyszer hidrokortizonból történő szintézisében. Emellett modellként szolgálhatnak az esszenciális faktorok szintézisében és előállításában, hiszen immobilizált enzimek és koenzimek segítségével kapcsolt kémiai reakciók (beleértve az esszenciális metabolitok bioszintézisét is) irányíthatók, kiküszöbölve ezzel a örökletes anyagcsere-rendellenességekben szenvedő anyagok. Így egy új módszertani megközelítés segítségével a tudomány megteszi első lépéseit a „szintetikus biokémia” területén. Nem kevésbé fontos kutatási terület a sejtrögzítés, valamint a vitaminokat és esszenciális aminosavakat termelő ipari mikroorganizmustörzsek géntechnológiai (génsebészeti) módszerekkel történő létrehozása. A biotechnológiai vívmányok orvosi alkalmazására példa a pajzsmirigysejtek immobilizálása a pajzsmirigy-stimuláló hormon biológiai folyadékokban vagy szövetkivonatokban történő meghatározására. A következő a sorban egy biotechnológiai módszer megalkotása a kalóriamentes édességek előállítására, azaz. étel édesítőszerek, amelyek édes érzetet keltenek anélkül, hogy magas kalóriatartalmúak lennének. Az egyik ilyen ígéretes anyag az aszpartám, amely az aszpartil-fenilalanin dipeptid metilésztere (lásd korábban). Az aszpartám csaknem 300-szor édesebb, mint a cukor, ártalmatlan, és a szervezetben természetesen előforduló szabad aminosavakra bomlik: aszparaginsavra (aszpartátra) és fenilalaninra. Az aszpartám kétségtelenül széles körben alkalmazható lesz mind az orvostudományban, mind az élelmiszeriparban (az USA-ban például bébiételekhez használják, és cukor helyett hozzáadják a Coca-Colához). Az aszpartám géntechnológiai módszerekkel történő előállításához nemcsak szabad aszparaginsavat és fenilalanint (prekurzorokat) kell előállítani, hanem egy bakteriális enzimet is, amely katalizálja ennek a dipeptidnek a bioszintézisét. A mérnöki enzimológia, valamint általában a biotechnológia jelentősége a jövőben megnő. Szakértők szerint a világon egy év alatt elért összes biotechnológiai folyamat termelése a vegyiparban, gyógyszeriparban, élelmiszeriparban, gyógyszeriparban és mezőgazdaságban 2000-re több tízmilliárd dollárt tesz ki. Hazánkban 2000-re , az L-treonin és a B2-vitamin génsebészeti módszereinek előállítása. 1998-ra már számos enzim, antibiotikum, β1-, β-, r-interferon termelése várható; Az inzulin és a növekedési hormon készítmények klinikai vizsgálatok alatt állnak. Az országban hibridóma technológiával indult meg a biológiai folyadékok számos kémiai komponensének meghatározására szolgáló enzim-immunoassay módszerek reagenseinek gyártása.

7. Enzimes extrakciós módszerek

A fehérje izolálásának folyamata a szöveti fehérjék oldatba való átvitelével kezdődik. Ehhez a szövetet (anyagot), amelyből az enzimet nyerik, óvatosan őröljük homogenizátorban pufferoldat jelenlétében. A jobb sejtpusztítás érdekében kvarchomokot adnak az anyaghoz, ha az anyagot habarcsban őrlik. Ennek eredményeként szuszpenziót kapunk - homogenizátumot. Ha a sejtszervecskék előzetes frakcionálását nem végezték el, a homogenizátum sejtfragmenseket, sejtmagokat, kloroplasztiszokat és más sejtszervecskéket, oldható pigmenteket és fehérjéket tartalmaz.

Az enzimek izolálásakor az élő szervezetek szöveteiből, beleértve a növényeket is, olyan körülményeket kell megfigyelni, amelyek nem okoznak fehérje denaturációt. Minden munkát alacsony hőmérsékleten (40 C) és a pufferoldat pH-értékein végeznek, amelyek optimálisak ehhez az enzimhez.

A szövetből az enzimek oldott állapotba való átvitele után a homogenizátumot centrifugálásnak vetjük alá az anyag oldhatatlan részének elválasztására, majd az alábbi enzimeket izoláljuk az extraktum-centrifugátum külön frakcióiban.

Mivel minden enzim fehérje, a tisztított enzimkészítmények előállításához ugyanazokat az izolálási módszereket alkalmazzák, mint a fehérjékkel végzett munka során.

Kiválasztási módszerek:

fehérje kicsapása szerves oldószerekkel;

kisózni;

az elektroforézis módszere;

ioncserélő kromatográfia módszere;

A centrifugálási módszer

gélszűrés módszere;

affinitáskromatográfiás módszer vagy affinitáskromatográfiás módszer;

szelektív denaturáció.

8. Az enzimreakciókat befolyásoló tényezők

Az enzimek aktivitását, és ezáltal az enzimatikus katalízis reakcióinak sebességét számos tényező befolyásolja:

Ш Az aljzat koncentrációja és elérhetősége. Állandó enzimmennyiség mellett a sebesség a szubsztrátkoncentráció növekedésével növekszik. Ez a reakció a törvény hatálya alá tartozik színjátszó tömegekés a Michaelis-Menton elmélet tükrében tekinthető.

Ø Enzimkoncentráció. Az enzimek koncentrációja mindig viszonylag alacsony. Bármely enzimatikus folyamat sebessége nagymértékben függ az enzim koncentrációjától. A legtöbb élelmiszer-felhasználásnál a reakciók sebessége arányos az enzimek koncentrációjával. Ez alól kivételt képez, ha a reakciókat nagyon alacsony szubsztrátszintekre állítják be.

W Reakció hőmérséklet. Egy bizonyos hőmérsékletig (átlagosan 50 °C-ig) a katalitikus aktivitás növekszik, és minden 10 °C-on a szubsztrát átalakulási sebessége körülbelül 2-szeresére nő. Általában az állati eredetű enzimek esetében 40 és 50°C között, a növényi eredetű enzimeknél pedig 50 és 60°C között van. A legoptimálisabb hőmérséklet 37 o C, amelynél az élő szervezetben a folyamatok gyorsan, takarékosan mennek végbe nagyszámú energia. Vannak azonban olyan enzimek, amelyeknél magasabb a hőmérsékleti optimum, például a papainnak 80°C az optimuma. Ugyanakkor a kataláz optimális működési hőmérséklete 0 és -10°C között van.

SH pH reakció. Minden enzimnek van egy meghatározott pH-értéke, amelynél az enzim maximális aktivitást mutat. Működésük legjobb feltételei azonban a semleges pH-értékek közelében vannak. Erősen savas vagy erősen lúgos környezetben csak néhány enzim működik jól. A tápközeg pH-jának az enzimek hatására gyakorolt ​​hatása azon alapul, hogy az enzim aktív centrumában a különböző fehérjecsoportok töltése megváltozik, ami jelentős változást okoz a polipeptidlánc konformációjában. .

Ш A folyamat időtartama. Egy elsőrendű enzimatikus katalízis reakció esetén a reakciósebesség idővel csökken, ahogy a szubsztrát hozzáférhetősége csökken. Az enzimatikus katalízis ilyen reakciói meglehetősen hosszú ideig tartanak.

III Inhibitorok vagy aktivátorok jelenléte. Vegyszerek, amelyek előidézhetik káros hatása a fermentációs reakciót "inhibitoroknak" nevezik. A fémek (réz, vas, kalcium) vagy a szubsztrátumokból származó vegyületek ilyen anyagként működhetnek. Egyes anyagok képesek aktiválni vagy stabilizálni az enzimeket. Bizonyos ionok jelenléte a reakcióközegben aktiválhatja az enzimkomplex aktív szubsztrátjának képződését, és ebben az esetben az enzimatikus reakció sebessége megnő. Az ilyen anyagokat aktivátoroknak nevezik.

Következtetés

Ebben a dolgozatban az egyik biológiailag aktív anyagot, nevezetesen az enzimeket vizsgáltuk. Az enzimek fehérje természetű biológiai katalizátorok, amelyek felgyorsítják a kémiai reakciókat az élő szervezetekben és azon kívül. Az enzimek egyedi tulajdonságokkal rendelkeznek, amelyek megkülönböztetik őket a hagyományos szerves katalizátoroktól. Ez mindenekelőtt szokatlanul magas katalitikus aktivitás. Az enzimek másik fontos tulajdonsága a hatásuk szelektivitása.

Az enzimek fontos tulajdonsága, amelyet gyakorlati felhasználásuk során figyelembe kell venni, a stabilitás, i. katalitikus aktivitás fenntartására való képességük.

Az enzimek nagy specifitása miatt a káosz nem uralkodik a szervezetben: mindegyik enzim ellátja szigorúan meghatározott funkcióit, anélkül, hogy befolyásolná a környezetében lezajló sok tíz és száz egyéb reakció lefolyását. Az enzimek szerepe a szervezetek életében nagy.

Az enzimek jövője nagyon érdekes. Az új enzimek felfedezésének és előállításának technológiája gyors ütemben fejlődik. Korábban az enzimek felhasználása és előállítása nagyrészt próba és hiba útján fejlődött ki. Mivel az enzimek kémiáját és hatását befolyásoló részletek kevéssé ismertek, a legsokoldalúbb enzimek keverékeit használták fel a készítményekben. Az új kutatásoknak köszönhetően specifikusabb enzimek alkalmazhatók a forgalomba hozott termékek előállításában.

Napjainkban a fejlődő technológiák az élet teremtésének újabb és újabb csodáit tárják fel, és a „biomimetika” mint tudomány az élőlények szervezetében található kiváló rendszereket választja példaként, s ezek képére és hasonlatosságára találmányokat hoz létre az élet hasznára és javára. emberek. A tudósok megpróbálják megtalálni az enzimek kémiai analógjait, és ezek alapján új ipari folyamatokat létrehozni.

Irodalom

1. "Biofizikai kémia" / A.G. Pasynsky [Szöveg] -375 p.

2. Nechaev A.P., Kochetkova A.A., Zaitsev A.N. / Élelmiszer-adalékanyagok [Szöveg] // M., 2001. - 232 p.

3. "A biokémia alapjai" / G.A. Szmirnova. [Szöveg] -278 p.

4. "Az élet enzimei-motorjai" / V.I. Rosengart. [Szöveg] -378 p.

öt." enciklopédikus szótár fiatal biológus” / M.S. Gilyarov. [Szöveg] -488 p.

Az Allbest.ru oldalon található

...

Hasonló dokumentumok

Az élő szervezetek működéséhez szükséges reakciókat felgyorsító fehérje jellegű enzimek, szerves katalizátorok jellemzői. Hatáskörülmények, enzimek előállítása és felhasználása. Az enzimek károsodott termelésével kapcsolatos betegségek.

bemutató, hozzáadva 2013.10.19


Az enzimek osztályozása, funkcióik. Az enzimek elnevezési konvenciói, felépítésük és hatásmechanizmusuk. Az egyszubsztrát enzimes reakciók kinetikájának leírása. Modellek "kulcszár", indukált levelezés. Módosítások, enzimkofaktorok.

bemutató, hozzáadva 2012.10.17


Kémiai összetétel, a fehérjék természete és szerkezete. Az enzimek hatásmechanizmusa, aktiválásuk és gátlásuk típusai. Az enzimek és vitaminok modern osztályozása és nómenklatúrája. A biológiai oxidáció mechanizmusa, a légúti enzimek fő lánca.

csalólap, hozzáadva 2013.06.20


Az enzimek biológiai szerepének vizsgálata az adrenerg és peptiderg rendszerek közötti kölcsönhatás mechanizmusában. Az enzimaktivitás meghatározása fluorometriás módszerrel. Hím patkányok hipofízisének, hipotalamuszának, agyféltekéjének és quadrigeminájának vizsgálata.

cikk, hozzáadva: 2013.09.01


Az enzimek meghatározása a biológiai katalizátorok minden élő sejtjében jelen lévő specifikus fehérjékként. Az enzimek szerkezeti molekulájának térbelisége, az oxidoreduktáz, transzferáz, hidroláz, liáz, izomeráz és ligáz bioszintézisének folyamata.

teszt, hozzáadva: 2011.01.27


Az enzimek olyan globuláris fehérjék fogalma, amelyek egy vagy több polipeptidláncból állnak. Egyszerű és összetett enzimek szerkezeti jellemzői. Szubsztrát, alloszterikus és katalitikus centrumok egyszerű és összetett enzimek szerkezetében.

bemutató, hozzáadva 2017.02.07


Az enzimek (enzimek) katalitikus fehérjék. Az enzimek jellemzői, működése, felépítésének elvei. A maximális aktivitás feltételei, kofaktorok és koenzimek. Az enzimek eloszlása ​​a szervezetben. Marker, szekréciós és izoenzimek diagnosztikai értéke.

bemutató, hozzáadva 2015.11.28


Az enzimek biológiai jelentősége, osztályozása, tanulmányozása, katalitikus aktivitásának szabályozása biológiai membrán, különbségeik az oldható enzimektől. Fehérje rekonstrukciós módszerek. A lipidek funkciói és a membránenzimekre gyakorolt ​​hatásuk vizsgálati módszerei.

szakdolgozat, hozzáadva 2009.04.13


A bioszintézis, mint a sejtekben előforduló szerves anyagok képződési folyamatának jellemzése enzimek és intracelluláris struktúrák segítségével. A fehérje bioszintézis tagjai. RNS szintézise DNS-templátként. A riboszómák szerepe és jelentősége.

bemutató, hozzáadva 2013.12.21


Enzimek vagy enzimek - fehérjemolekulák vagy komplexeik, amelyek felgyorsítják a kémiai reakciókat az élő rendszerekben; koenzimek és szubsztrátok: vizsgálattörténet, osztályozás, nómenklatúra, funkciók. Az enzimek felépítése, hatásmechanizmusa, orvosbiológiai jelentősége.

Tanulmánytörténet

Term enzim században javasolta van Helmont kémikus az emésztés mechanizmusainak tárgyalásakor.

In con. XVIII - korai. 19. század már korábban is ismerték, hogy a húst a gyomornedv emészti fel, a keményítő pedig a nyál hatására alakul cukorrá. Ezeknek a jelenségeknek a mechanizmusa azonban ismeretlen volt.

Az enzimek osztályozása

A katalizált reakciók típusa szerint az enzimek 6 osztályba sorolhatók az enzimek hierarchikus osztályozása szerint (KF, - Enzyme Comission kód). Az osztályozást a Biokémia és Molekuláris Biológia Nemzetközi Szövetsége (Nemzetközi Biokémia és Molekuláris Biológia Szövetség) javasolta. Minden osztály alosztályokat tartalmaz, így egy enzimet négy, pontokkal elválasztott számból álló halmaz ír le. Például a pepszin neve EC 3.4.23.1. Az első szám nagyjából az enzim által katalizált reakció mechanizmusát írja le:

• CF 1: Oxidoreduktáz amelyek oxidációt vagy redukciót katalizálnak. Példa: kataláz, alkohol-dehidrogenáz.
• CF 2: Transzferázok amelyek katalizálják a kémiai csoportok átvitelét egyik szubsztrátmolekuláról a másikra. A transzferázok közül különösen megkülönböztethetők a kinázok, amelyek általában egy foszfátcsoportot visznek át egy ATP-molekuláról.
• CF 3: Hidrolázok amelyek katalizálják a kémiai kötések hidrolízisét. Példa: észterázok, pepszin, tripszin, amiláz, lipoprotein lipáz.
• CF 4: Liase, katalizálja a kémiai kötések hidrolízis nélküli felszakítását az egyik termékben kettős kötés képződésével.
• CF 5: Izomerázok, katalizáló szerkezeti ill geometriai változások a szubsztrát molekulában.
• CF 6: Ligázok, katalizálja a szubsztrátok közötti kémiai kötések kialakulását az ATP hidrolízis következtében. Példa: DNS polimeráz.

Kinetikai kutatás

A legegyszerűbb leírás kinetika egyszubsztrát enzimreakciók a Michaelis-Menten egyenlet (lásd ábra). A mai napig számos enzimhatásmechanizmust írtak le. Például számos enzim hatását a „ping-pong” mechanizmus séma írja le.

1972-1973-ban. létrejött az enzimatikus katalízis első kvantummechanikai modellje (szerzők: M. V. Volkenshtein, R. R. Dogonadze, Z. D. Urushadze és mások).

Az enzimek szerkezete és hatásmechanizmusa

Az enzimek aktivitását háromdimenziós szerkezetük határozza meg.

Mint minden fehérjét, az enzimeket is aminosavak lineáris láncaként szintetizálják, amelyek meghatározott módon hajtódnak össze. Minden aminosav szekvencia meghatározott módon hajtódik össze, és az így létrejövő molekula (fehérjegömb) egyedi tulajdonságokkal rendelkezik. Több fehérjelánc kombinálható fehérjekomplexbe. A fehérjék harmadlagos szerkezete megsemmisül, ha hevítik vagy bizonyos vegyi anyagoknak vannak kitéve.

Az enzimek aktív helye

Az aktív központban feltételesen kiosztani:

• katalitikus központ - közvetlenül kémiai kölcsönhatásba lép a szubsztrátummal;
• kötőközpont (érintkezési vagy "horgonyzó" hely) - specifikus affinitást biztosít a szubsztráthoz és az enzim-szubsztrát komplex kialakulásához.

A reakció katalizálásához egy enzimnek egy vagy több szubsztráthoz kell kötődnie. Az enzim fehérjelánca úgy hajtódik fel, hogy a gömböcske felületén rés, vagy mélyedés képződik, ahol a szubsztrátok megkötődnek. Ezt a régiót szubsztrátkötő helynek nevezik. Általában egybeesik az enzim aktív helyével, vagy annak közelében található. Egyes enzimek kötőhelyeket is tartalmaznak kofaktorokhoz vagy fémionokhoz.

Az enzim a szubsztrátumhoz kötődik:

• megtisztítja az aljzatot a víz "bundától"
• a reagáló szubsztrát molekulákat a térben a reakció lezajlásához szükséges módon rendezi el
• előkészíti a reakciót (például polarizálja) a szubsztrát molekulákat.

Általában egy enzim szubsztráthoz kötődése ionos vagy hidrogénkötések, ritkán kovalens kötések következtében történik. A reakció végén terméke (vagy termékei) elválik az enzimtől.

Ennek eredményeként az enzim csökkenti a reakció aktiválási energiáját. Ennek az az oka, hogy az enzim jelenlétében a reakció más úton megy végbe (sőt, más reakció megy végbe), például:

Enzim hiányában:

• A+B = AB

Enzim jelenlétében:

• A+F = AF
• AF+V = AVF
• AVF \u003d AV + F

ahol A, B - szubsztrátok, AB - reakciótermék, F - enzim.

Az enzimek önmagukban nem képesek energiát biztosítani az endergon reakciókhoz (amelyekhez energiára van szükség). Ezért az ilyen reakciókat végrehajtó enzimek exergonikus reakciókkal párosítják őket, amelyek több energia felszabadulásával járnak. Például a biopolimer szintézis reakciói gyakran kapcsolódnak az ATP hidrolízis reakciójához.

Egyes enzimek aktív központjait a kooperativitás jelensége jellemzi.

Specificitás

Az enzimek általában nagy specifitást mutatnak szubsztrátjaikra (szubsztrátspecifitás). Ezt az alak, a töltéseloszlás és a hidrofób régiók részleges komplementaritása révén érik el a szubsztrát molekulán és az enzim szubsztrátkötő helyén. Az enzimek általában azt is mutatják magas szint sztereospecificitás (termékként a lehetséges sztereoizomerek közül csak egyet képez, vagy csak egy sztereoizomert használ szubsztrátként), regioszelektivitás (a szubsztrát csak egy lehetséges pozíciójában hoz létre vagy szakít kémiai kötést) és kemoszelektivitás (csak egy kémiai reakciót katalizál adott feltételekhez több lehetséges közül ). Az általánosan magas specifitás ellenére az enzimek szubsztrát- és reakcióspecifitása eltérő lehet. Például az endopeptidáz-tripszin csak az arginin vagy a lizin után bontja meg a peptidkötést, hacsak nem prolin követi őket, és a pepszin sokkal kevésbé specifikus, és számos aminosav után képes megszakítani a peptidkötést.

Kulcszáras modell

Koshland indukált illeszkedési sejtése

Reálisabb helyzet az indukált párosítás esetén. A nem megfelelő aljzatok - túl nagy vagy túl kicsi - nem illeszkednek az aktív helyre

1890-ben Emil Fischer azt javasolta, hogy az enzimek specificitását az enzim formája és a szubsztrát pontos megfeleltetése határozza meg. Ezt a feltevést hívjuk zár és kulcs modellnek. Az enzim a szubsztráthoz kötve rövid életű enzim-szubsztrát komplexet képez. Ez a modell azonban megmagyarázza az enzimek nagy specifitását, de nem magyarázza meg a gyakorlatban megfigyelhető átmeneti állapot stabilizáció jelenségét.

Indukált illeszkedési modell

1958-ban Daniel Koshland javasolta a kulcsos zármodell módosítását. Az enzimek általában nem merev, hanem rugalmas molekulák. Egy enzim aktív helye megváltoztathatja a konformációt a szubsztrát megkötése után. Az aktív hely aminosavainak oldalsó csoportjai olyan pozíciót foglalnak el, amely lehetővé teszi az enzim számára katalitikus funkciójának ellátását. Egyes esetekben a szubsztrát molekula is megváltoztatja a konformációt az aktív helyhez való kötődés után. A kulcszáras modellel ellentétben az indukált illeszkedési modell nemcsak az enzimek specificitását magyarázza, hanem az átmeneti állapot stabilizálását is. Ezt a modellt "kézkesztyűnek" hívták.

Módosítások

Sok enzim a fehérjelánc szintézise után olyan módosulásokon megy keresztül, amelyek nélkül az enzim nem mutatja ki teljes mértékben aktivitását. Az ilyen módosításokat poszttranszlációs módosításoknak (feldolgozásnak) nevezzük. A módosítások egyik leggyakoribb típusa a kémiai csoportok hozzáadása a polipeptid lánc oldalmaradékaihoz. Például egy foszforsav-maradék hozzáadását foszforilációnak nevezik, és a kináz enzim katalizálja. Sok eukarióta enzim glikozilált, azaz szénhidrát oligomerekkel módosított.

A poszttranszlációs módosítások másik gyakori típusa a polipeptidlánc hasítása. Például a kimotripszint (az emésztésben részt vevő proteázt) úgy állítják elő, hogy a kimotripszinogénből egy polipeptid régiót lehasítanak. A kimotripszinogén a kimotripszin inaktív prekurzora, és a hasnyálmirigyben szintetizálódik. Az inaktív forma a gyomorba kerül, ahol kimotripszinné alakul. Ez a mechanizmus azért szükséges, hogy elkerüljük a hasnyálmirigy és más szövetek felhasadását, mielőtt az enzim bejutna a gyomorba. Az inaktív enzim-prekurzort „zimogénnek” is nevezik.

Enzim kofaktorok

Egyes enzimek a katalitikus funkciót önállóan látják el, további komponensek nélkül. Vannak azonban olyan enzimek, amelyek katalíziséhez nem fehérje komponensekre van szükség. A kofaktorok lehetnek szervetlen molekulák (fémionok, vas-kén klaszterek stb.) vagy szervesek (például flavin vagy hem). Az enzimhez erősen kapcsolódó szerves kofaktorokat protetikus csoportoknak is nevezik. Az enzimtől elválasztható szerves kofaktorokat koenzimeknek nevezzük.

Apo-enzimnek nevezzük azt az enzimet, amely kofaktort igényel a katalitikus aktivitás kifejtéséhez, de nem kötődik hozzá. Az apo-enzimet egy kofaktorral kombinálva holoenzimnek nevezzük. A kofaktorok többsége nem kovalens, de meglehetősen erős kölcsönhatások révén kapcsolódik az enzimhez. Vannak olyan protetikus csoportok is, amelyek kovalensen kapcsolódnak az enzimhez, ilyen például a tiamin-pirofoszfát a piruvát-dehidrogenázban.

Enzimszabályozás

Egyes enzimek kis molekulakötő helyekkel rendelkeznek, és szubsztrátjai vagy termékei lehetnek annak az anyagcsereútnak, amelybe az enzim belép. Csökkentik vagy növelik az enzim aktivitását, ami lehetővé teszi a Visszacsatolás.

A végtermék gátlása

Metabolikus útvonal - egymást követő enzimatikus reakciók láncolata. Az anyagcsereút végterméke gyakran egy enzim inhibitora, amely felgyorsítja az adott anyagcsereútban az első reakciót. Ha a végtermék túl sok, akkor a legelső enzim gátlásaként működik, ha pedig ezután a végtermék túl kicsi lesz, akkor az első enzim ismét aktiválódik. Így a végtermék általi gátlás a negatív visszacsatolás elve szerint a homeosztázis (a szervezet belső környezetének relatív állandósága) fenntartásának fontos módja.

A környezeti feltételek hatása az enzimaktivitásra

Az enzimek aktivitása függ a sejtben vagy szervezetben uralkodó körülményektől - nyomás, a környezet savassága, hőmérséklet, az oldott sók koncentrációja (az oldat ionerőssége) stb.

Az enzimek többféle formája

Az enzimek többféle formája két kategóriába sorolható:

• Izoenzimek
• Helyes többes számú alakok (igaz)

Izoenzimek- Ezek olyan enzimek, amelyek szintézisét más-más gének kódolják, más-más primer szerkezettel és eltérő tulajdonságokkal rendelkeznek, de ugyanazt a reakciót katalizálják. Az izoenzimek típusai:

• Szerves - glikolízis enzimek a májban és az izmokban.
• Sejt-citoplazmatikus és mitokondriális malát-dehidrogenáz (az enzimek különbözőek, de ugyanazt a reakciót katalizálják).
• Hibrid - kvaterner szerkezetű enzimek, az egyes alegységek nem kovalens kötődése eredményeként jönnek létre (laktát-dehidrogenáz - 4 alegység 2 típusból).
• Mutáns - egy gén egyetlen mutációja eredményeként jön létre.
• Alloenzimek - ugyanazon gén különböző alléljai kódolják.

Helyes többes számú alakok(igaz) olyan enzimek, amelyek szintézisét ugyanannak a génnek ugyanaz az allélja kódolja, azonos primer szerkezettel és tulajdonságokkal rendelkeznek, de a riboszómákon történő szintézis után módosulnak és különbözővé válnak, bár ugyanazt a reakciót katalizálják.

Az izoenzimek genetikai szinten különböznek, és eltérnek az elsődleges szekvenciától, és a valódi többszörös formák eltérőek lesznek a poszttranszlációs szinten.

orvosi jelentősége

Először állapították meg az enzimek és az örökletes anyagcsere-betegségek közötti kapcsolatot A. Garrodom az 1910-es években Garrod az enzimhibákkal kapcsolatos betegségeket „az anyagcsere veleszületett hibáinak” nevezte.

Ha egy bizonyos enzimet kódoló génben mutáció lép fel, az enzim aminosavszekvenciája megváltozhat. Ugyanakkor a legtöbb mutáció következtében katalitikus aktivitása csökken vagy teljesen eltűnik. Ha egy szervezet két mutáns gént kap (mindegyik szülőtől egyet), akkor az enzim által katalizált kémiai reakció leáll a szervezetben. Például az albínók megjelenése összefügg a tirozináz enzim termelésének leállásával, amely a sötét pigment melanin szintézisének egyik szakaszáért felelős. A fenilketonuria a fenilalanin-4-hidroxiláz enzim aktivitásának csökkenésével vagy hiányával jár a májban.

Jelenleg több száz enzimhibával összefüggő örökletes betegség ismert. Sok ilyen betegség kezelésére és megelőzésére módszereket dolgoztak ki.

Gyakorlati használat

Az enzimeket széles körben használják a nemzetgazdaságban - élelmiszeriparban, textiliparban, farmakológiában és gyógyászatban. A legtöbb gyógyszer befolyásolja az enzimatikus folyamatok lefolyását a szervezetben, elindítva vagy leállítva bizonyos reakciókat.

Az enzimek még szélesebb alkalmazási területe tudományos kutatásés az orvostudományban.

Megjegyzések

Irodalom

• Volkenstein M. V., Dogonadze R. R., Madumarov A. K., Urushadze Z. D., Kharkats Yu. I. Az enzimatikus katalízis elméletéről. - Molekuláris biológia, 6. köt. 3, 1972, art. 431-439.
• Dixon, M. Enzymes / M. Dixon, E. Webb. - 3 kötetben - Per. angolról. - V.1-2. - M.: Mir, 1982. - 808 p.
Nagy Orvosi Enciklopédia

- (lat. fermentum fermentációból, kovász), enzimek, biokatalizátorok, specifikus. fehérjék, amelyek minden élő sejtben jelen vannak, és a biol. katalizátorok. Rajtuk keresztül valósul meg a genetika. információ és minden cserefolyamat végrehajtásra kerül ...... Biológiai enciklopédikus szótár

- (lat. Fermentum kovász, fervere-ből forró legyen). szerves anyag, más szerves testek erjedését idézik elő, anélkül, hogy maguk rothadnának. Az orosz nyelvben szereplő idegen szavak szótára. Chudinov A.N., 1910. ENZIMEK ...... Orosz nyelv idegen szavak szótára

- (a lat. fermentum kovász szóból) (enzimek) minden élő sejtben jelenlévő biológiai katalizátorok. Végezze el az anyagok átalakítását a szervezetben, ezáltal irányítja és szabályozza az anyagcserét. A fehérjék kémiai természete. Enzimek...... Nagy enciklopédikus szótár

- (a latin fermentum kovász szóból), biológiai katalizátorok, amelyek minden élő sejtben jelen vannak. Végezze el az anyagok átalakulását (anyagcseréjét) a szervezetben. A fehérjék kémiai természete. Számos biokémiai reakcióban vesz részt a sejtben ... Modern Enciklopédia

Létezik., szinonimák száma: 2 biokatalizátor (1) enzim (2) ASIS szinonim szótár. V.N. Trishin. 2013... Szinonima szótár

Enzimek. Lásd az enzimeket. (