Validacija metode kvantitativnog određivanja u vodenim rastvorima. Granica kvantitacije

MINISTARSTVO ZDRAVLJA RUJSKE FEDERACIJE

OPĆE FARMAKOPSKO OVLAŠĆENJE

Validacija analitičkih procedura OFS.1.1.0012.15

Uveden po prvi put

Validacija analitičke tehnike je eksperimentalni dokaz da je tehnika pogodna za rješavanje predviđenih problema.

Ovom monografijom Opće farmakopeje uređuju se karakteristike analitičkih metoda utvrđenih radi njihove validacije, te odgovarajući kriteriji za prikladnost validiranih metoda namijenjenih kontroli kvaliteta lijekova: farmaceutskih supstanci i lijekova.

Metode kvantitativnog određivanja, uključujući metode za određivanje nečistoća i metode za određivanje granice sadržaja, podliježu validaciji. Metode provjere autentičnosti se provjeravaju ako je potrebno da se potvrdi njihova specifičnost.

Tokom validacije, analitička metoda se ocjenjuje prema dolje navedenim karakteristikama, odabranim uzimajući u obzir tipične preporuke date u tabeli:

specifičnost;
granica detekcije;
granica kvantitativnog određivanja (granica kvantitacije);
analitičko područje (opseg);
linearnost (linearnost);
ispravnost (istinitost);
preciznost (preciznost);
stabilnost (robustnost).

Tabela 1 — Karakteristike metoda utvrđenih tokom validacije

Ime karakteristike	Glavne vrste metoda
	Test autentičnosti	Strana materija		kvantitacija
	Test autentičnosti	Kvantitativne metode	Ograničenje sadržaja	Glavna aktivna tvar, standardizirane komponente	Aktivni sastojak u testu "Otapanje".
Specifičnost **)	Da	Da	Da	Da	Da
Granica detekcije	Ne	Ne	Da	Ne	Ne
Granica kvantitacije	Ne	Da	Ne	Ne	Ne
Analitičko područje	Ne	Da	Ne	Da	Da
Linearnost	Ne	Da	Ne	Da	Da
U redu	Ne	Da	*	Da	Da
preciznost : – ponovljivost (konvergencija) – srednji (intralaboratorijska) preciznost
Održivost	Ne	*	*	*	*

*) može se odrediti ako je potrebno;

**) nedostatak specifičnosti jedne analitičke metode može se nadoknaditi upotrebom druge analitičke metode.

Ponovna validacija (ponovna validacija) metoda se vrši kada:

tehnologije za dobijanje predmeta analize;
sastav lijeka (predmet analize);
prethodno odobrena metodologija analize.

Specifičnost

Specifičnost je sposobnost analitičkog postupka da nedvosmisleno proceni analit u prisustvu pratećih komponenti.

Dokaz specifičnosti validirane tehnike obično se zasniva na razmatranju podataka dobijenih pomoću nje iz analize modelskih mješavina poznatog sastava.

Specifičnost validirane tehnike može se dokazati i odgovarajućom statističkom obradom rezultata analiza stvarnih objekata koja se njome obavljaju i, paralelno, upotrebom druge, očigledno specifične, tehnike (tehnike čija je specifičnost dokazana).

1.1 Za procedure testiranja identiteta

Validirana metoda (ili skup metoda) treba da pruži pouzdane informacije o prisutnosti date aktivne tvari u tvari ili doznom obliku ako sadrži komponente predviđene u formulaciji, što je podložno eksperimentalnoj potvrdi.

Autentičnost aktivne supstance u farmaceutskoj supstanci ili leku utvrđuje se u poređenju sa standardnim uzorkom ili fizičko-hemijskim ili hemijska svojstva nije karakteristično za druge komponente.

1.2 Za kvantifikaciju i postupke ispitivanja nečistoća

Za validiranu metodu kvantifikacije i ispitivanje nečistoća koriste se isti pristupi - mora se procijeniti njegova specifičnost u odnosu na analit, odnosno eksperimentalno potvrditi da prisustvo pratećih komponenti ne utiče na rezultat analize u nenamjernom slučaju. način.

Dozvoljeno je ocijeniti specifičnost validirane metode kako analizom modelskih mješavina poznatog sastava koje sadrže analit, tako i poređenjem rezultata analiza stvarnih objekata dobijenih istovremeno uz korištenje validiranih i drugih, očigledno specifičnih, metoda. Rezultate relevantnih eksperimenata treba statistički obraditi.

Nedostatak specifičnosti testa može se nadoknaditi drugim dodatnim testom(ovima).

Prilikom validacije metoda, ako je prikladno, uzorci lijekova koji su podvrgnuti ekstremnim uvjetima (svjetlo, temperatura, vlažnost) ili kemijski modificirani na bilo koji prikladan način mogu se koristiti za akumulaciju nečistoća u njima.

Za hromatografske tehnike, pokažite rezoluciju između dvije supstance koje se najbliže eluiraju u odgovarajućim koncentracijama.

GRANICA DETEKCIJE

Granica detekcije je najmanja količina (koncentracija) analita u uzorku koja se može detektovati (ili aproksimirati) korištenjem validirane tehnike.

Granica detekcije u slučajevima navedenim u tabeli obično se izražava kao koncentracija analita (u relativnim % ili dijelovima na milion - ppm).

U zavisnosti od vrste tehnike (vizuelne ili instrumentalne), koriste se različite metode za određivanje granice detekcije.

2.1 Za metode sa vizuelnom procenom rezultata analize

Uzorci se testiraju različitim poznatim količinama (koncentracijama) analita i utvrđuje se minimalna vrijednost na kojoj se rezultat analize može vizualno procijeniti. Ova vrijednost je procjena granice detekcije.

2.2 Za metode sa instrumentalnom evaluacijom rezultata analize

2.2.1 Odnosom signal-šum

Ovaj pristup je primjenjiv na metode za koje se promatra osnovni šum. Usporedite vrijednosti signala dobijene za kontrolni eksperiment i za uzorke s niskim koncentracijama analita. Instaliraj minimalni iznos(koncentracija) analita u uzorku, pri čemu je odnos analitičkog signala i nivoa šuma 3.

Pronađena vrijednost je procjena granice detekcije.

2.2.2 Po vrijednosti standardne devijacije signala i nagibu kalibracione krive

Granica detekcije (LO) nalazi se jednadžbom:

UKLJUČENO = 3.3 S/b,

gdje S

b je koeficijent osjetljivosti, koji je omjer analitičkog signala i utvrđene vrijednosti (tangenta nagiba kalibracijske krive).

S I b

S S a slobodni član jednačine ovog grafa. Dobijena vrijednost granice detekcije, ako je potrebno, može se potvrditi direktnim eksperimentom pri količinama (koncentracijama) analita blizu pronađene vrijednosti granice detekcije.

U pravilu, ako postoji dokaz o prikladnosti metode za pouzdano određivanje tvari u koncentracijama i iznad i ispod granice njenog sadržaja utvrđene specifikacijom, nije potrebno odrediti stvarnu granicu detekcije za takvu metodu. .

GRANICA KVANTIFIKACIJE

Granica kvantitacije je najmanja količina (koncentracija) supstance u uzorku koja se može kvantificirati pomoću validirane metode sa potrebnom preciznošću i unutar laboratorijske (srednje) preciznosti.

Granica kvantitacije je neophodna validacijska karakteristika postupaka koji se koriste za procjenu malih količina (koncentracija) supstanci u uzorku i, posebno, za procjenu sadržaja nečistoća.

Ovisno o vrsti tehnike, za pronalaženje granice kvantifikacije koriste se sljedeće metode.

3.1 Za metode sa vizuelnom procjenom rezultata analize

Testirajte uzorke sa različitim poznatim količinama (koncentracijama) analita i utvrdite minimalnu vrijednost pri kojoj se rezultat analize može dobiti vizualno sa potrebnom tačnošću i unutarlaboratorijskom (srednje) preciznošću.

3.2 Za metode sa instrumentalnom evaluacijom rezultata analize

3.2.1 Odnos signal-šum

Postavite minimalnu koncentraciju analita u uzorku, pri kojoj je odnos analitičkog signala i nivoa buke oko 10:1.

3.2.2 Po vrijednosti standardne devijacije signala i nagibu kalibracione krive

Granica kvantifikacije (LOQ) se izračunava pomoću jednadžbe:

FSP = 10 S/b,

gdje S – standardna devijacija analitički signal;

b je koeficijent osjetljivosti, koji je odnos analitičkog signala prema utvrđenoj vrijednosti.

U prisustvu eksperimentalnih podataka u širokom rasponu izmjerenih vrijednosti S I b može se procijeniti metodom najmanjih kvadrata.

Za linearnu kalibraciju, vrijednost S uzeto jednako standardnoj devijaciji S a slobodni član jednačine ovog grafa. Dobijena vrijednost granice kvantitativnog određivanja, ako je potrebno, može se potvrditi direktnim eksperimentom na količinama (koncentracijama) analita blizu pronađene vrijednosti granice kvantitativnog određivanja.

Ako postoje dokazi o sposobnosti metode da pouzdano otkrije analit pri koncentracijama iznad i ispod njegove granice specifikacije, općenito nije potrebno odrediti stvarnu vrijednost granice kvantitacije za tu metodu.

ANALITIČKO PODRUČJE METODE

Analitičko područje tehnike je interval između gornje i donje vrijednosti analitičkih karakteristika određene komponente u objektu analize (njena količina, koncentracija, aktivnost itd.). Unutar ovog opsega, rezultati dobijeni metodom koja se validira treba da imaju prihvatljiv nivo tačnosti i unutar laboratorijske (srednje) preciznosti.

Na veličinu analitičkog područja metoda postavljaju se sljedeći zahtjevi:

– metode kvantitativnog određivanja treba da budu primenljive u rasponu od 80 do 120% nominalne vrednosti utvrđene analitičke karakteristike;

- metode za procjenu ujednačenosti doziranja treba da budu primjenjive u rasponu od 70 do 130% nominalne doze;

- metode kvantitacije koje se koriste u testu rastvaranja trebale bi općenito biti primjenjive u rasponu od 50 do 120% očekivane koncentracije aktivne tvari u mediju za otapanje;

- metode ispitivanja čistoće treba da budu primjenjive u rasponu od "Granice kvantifikacije" ili "Granice detekcije" do 120% dozvoljenog sadržaja utvrđene nečistoće.

Analitički domen tehnike može se postaviti opsegom eksperimentalnih podataka koji zadovoljavaju linearni model.

LINEARNOST

Linearnost tehnike je prisustvo linearne zavisnosti analitičkog signala o koncentraciji ili količini analita u analiziranom uzorku unutar analitičkog područja tehnike.

Prilikom validacije metode, njena linearnost u analitičkom području se provjerava eksperimentalno mjerenjem analitičkih signala za najmanje 5 uzoraka s različitim količinama ili koncentracijama analita. Eksperimentalni podaci se obrađuju metodom najmanjih kvadrata koristeći linearni model:

y = b · x + a,

X- količinu ili koncentraciju analita;

y je veličina odgovora;

b- ugaoni koeficijent;

a- slobodni termin (OFS "Statistička obrada rezultata hemijskog eksperimenta").

Vrijednosti se moraju izračunati i prezentirati. b, a i koeficijent korelacije r. U većini slučajeva koriste se linearne zavisnosti koje ispunjavaju uslov 0,99, a tek kada se analiziraju količine tragova uzimaju se u obzir linearne zavisnosti za koje je 0,9.

U nekim slučajevima, mogućnost linearne aproksimacije eksperimentalnih podataka pruža se tek nakon njihove matematičke transformacije (na primjer, uzimanje logaritama).

Za neke metode analize, na kojima se u principu ne može zasnivati linearna zavisnost između eksperimentalnih podataka, određivanje koncentracije ili količine supstance vrši se korišćenjem nelinearnih kalibracionih grafikona. U ovom slučaju, dijagram zavisnosti analitičkog signala o količini ili koncentraciji analita može se aproksimirati odgovarajućom nelinearnom funkcijom koristeći metodu najmanjih kvadrata, što je izvodljivo uz odgovarajući validirani softver.

PRAVO

Ispravnost tehnike karakterizira odstupanje prosječnog rezultata određivanja napravljenih njenom upotrebom od vrijednosti koja se uzima kao istinita.

Validirana tehnika se priznaje kao ispravna ako vrijednosti uzete kao istinite leže unutar intervala povjerenja odgovarajućih prosječnih rezultata analiza dobijenih eksperimentalno korištenjem ove tehnike.

Za ocjenu valjanosti kvantitacijskih postupaka primjenjivi su sljedeći pristupi:

a) analizu pomoću validirane metode standardnih uzoraka ili modelnih mješavina sa poznatim sadržajem (koncentracijom) analita;

b) poređenje rezultata dobijenih primenom validirane metode i uzorne metode, čija je ispravnost prethodno utvrđena;

c) razmatranje rezultata proučavanja linearnosti validirane metodologije: ako se slobodni član u jednačini datoj u Odjeljku 5 statistički značajno ne razlikuje od nule, onda korištenje takve metodologije daje rezultate bez sistematske greške.

Za pristupe "a" i "b" moguće je dobijene podatke prikazati u obliku jednačine linearne zavisnosti (regresije) između eksperimentalno pronađenih i prave vrednosti. Za ovu jednačinu provjeravaju se hipoteze o jednakosti tangente ugla nagiba prema jedinici b i o jednakosti na nulu slobodnog člana a. Po pravilu, ako se ove hipoteze prepoznaju kao tačne sa stepenom pouzdanosti jednakim 0,05, onda upotreba validirane metodologije daje tačne, odnosno bez sistematske greške, rezultate.

PRECIZNOST

Preciznost tehnike karakteriše disperzija rezultata dobijenih njenom upotrebom u odnosu na vrednost prosečnog rezultata. Mjera takve disperzije je vrijednost standardne devijacije rezultata jednog određivanja, dobijenog za uzorak dovoljno velike veličine.

Preciznost se ocjenjuje za bilo koju proceduru kvantitacije na osnovu rezultata najmanje tri određivanja za svaki od tri nivoa analita (donji, srednji i gornji) koji se nalaze unutar analitičkog raspona metode. Ponovljivost se takođe može proceniti za bilo koju tehniku ispitivanja iz najmanje šest određivanja za uzorke sa skoro nominalnim sadržajem analita. U mnogim slučajevima, procjena preciznosti se može izvršiti na osnovu rezultata obrade eksperimentalnih podataka metodom najmanjih kvadrata, kao što je navedeno u Monografiji Opće farmakopeje "Statistička obrada rezultata hemijskog eksperimenta".

Preciznost treba testirati na homogenim uzorcima i može se ocijeniti na tri načina:

– kao ponovljivost (konvergencija);

– kao intralaboratorijska (srednja) preciznost;

– kao međulaboratorijska preciznost (ponovljivost).

Rezultate procene metode analize za svaku od opcija preciznosti obično karakteriše odgovarajuća vrednost standardne devijacije rezultata posebnog određivanja.

Obično se prilikom razvoja originalne tehnike utvrđuje ponovljivost (konvergencija) rezultata dobijenih njenom upotrebom. Ukoliko je potrebno razvijenu metodu uvrstiti u regulatornu dokumentaciju, dodatno se utvrđuje njena unutarlaboratorijska (srednja) preciznost. Međulaboratorijska preciznost (reproducibilnost) metode se ocjenjuje kada se ona treba uključiti u nacrt opće farmakopejske monografije, farmakopejske monografije ili u regulatornu dokumentaciju za farmakopejske referentne materijale.

7.1 Ponovljivost (konvergencija)

Ponovljivost analitičkog postupka se ocenjuje nezavisnim rezultatima dobijenim pod istim propisanim uslovima u istoj laboratoriji (isti izvođač, ista oprema, isti set reagenasa) u kratkom vremenskom periodu.

7.2 Intralaboratorijska (srednja) preciznost

Unutarlaboratorijska (srednja) preciznost metode koja se validira procjenjuje se u uslovima iste laboratorije (različiti dani, različiti izvođači, različita oprema, itd.).

7.3 Međulaboratorijska preciznost (ponovljivost)

Međulaboratorijska preciznost (ponovljivost) validirane metode ocjenjuje se testiranjem u različitim laboratorijama.

STABILNOST

Stabilnost validirane tehnike je sposobnost da se održe karakteristike koje su za nju pronađene u optimalnim (nominalnim) uslovima, datim u tabeli, sa verovatnim malim odstupanjima od ovih uslova analize.

Robusnost metode ne treba određivati u odnosu na lako kontrolirane uslove analize. Ovo drastično smanjuje potrebu za posebnom studijom stabilnosti.

Stabilnost treba proučavati samo kada je metoda koja se validira zasnovana na upotrebi posebno ekološki osjetljivih metoda analize, kao što su različite vrste hromatografije i funkcionalne analize. Po potrebi se vrši procjena stabilnosti metodologije u fazi njenog razvoja. Ako je vjerovatno niska stabilnost tehnike, njena prikladnost se provjerava bez greške direktno u procesu praktične upotrebe.

Validacija analitičkog sistema

Validacija podobnosti analitičkog sistema je provjera ispunjenosti osnovnih zahtjeva za njega. Sistem čija se prikladnost ispituje je zbirka specifičnih instrumenata, reagensa, standarda i uzoraka koji se analiziraju. Zahtjevi za takav sistem obično su specificirani u opštoj monografiji za odgovarajuću analitičku metodu. Dakle, testiranje podobnosti analitičkog sistema postaje postupak uključen u metodu koja se validira.

Prezentacija rezultata validacije

Protokol validacije analitičke metode treba da sadrži:

– njen potpuni opis, dovoljan za reprodukciju i koji odražava sve uslove neophodne za obavljanje analize;

– procijenjene karakteristike;

- svi primarni rezultati koji su uključeni u statističku obradu podataka;

- rezultati statistička obrada podaci dobijeni eksperimentalno u razvoju ili verifikaciji validirane metodologije;

- ilustrativni materijali, kao što su kopije hromatograma dobijenih tečnom hromatografijom visokih performansi ili gasnom hromatografijom; elektroforegrami, elektronski i infracrveni spektri; fotografije ili crteži kromatograma dobiveni tankoslojnom ili papirnom hromatografijom; crteži titracionih krivulja, kalibracioni grafikoni;

– zaključak o podobnosti metode koja se validira za uključivanje u regulatorni dokument.

Materijale za validaciju pojedinačnih analitičkih metoda treba predstaviti u obliku kombinovanog izveštaja o validaciji.

Granica kvantitacije

"...Granica kvantifikacije (LOQ) (u analitičkim definicijama): najniža koncentracija ili analita u analitu koji se može kvantificirati s prihvatljivim nivoom tačnosti i pouzdanosti, što se može pokazati zajedničkim laboratorijskim testiranjem ili drugim odgovarajućim validacija metode..."

izvor:

"PREHRAMBENI PROIZVODI. METODE ANALIZE ZA DETEKCIJU GENETSKI MODIFIKOVANIH ORGANIZAMA I OD NJIH PROIZVODA. OPŠTI ZAHTJEVI I DEFINICIJE. GOST R 53214-2008 (ISO 24066)":

(odobreno Naredbom Rostekhregulirovanie od 25. decembra 2008. N 708-st)

Zvanična terminologija. Akademik.ru. 2012 .

Pogledajte šta je "Limit of Quantitation" u drugim rječnicima:

granica kvantifikacije- 3.7 granica kvantifikacije [LOQ] desetostruka procjena standardne devijacije mase uzorka Napomena LOQ vrijednost se koristi kao granična vrijednost iznad koje masa ... ...

granica ponovljivosti- Granica ponovljivosti 3,7 Rječnik-priručnik pojmova normativne i tehničke dokumentacije

granica reproduktivnosti- 2.9 granična vrijednost ponovljivosti ispod koje, s vjerovatnoćom od 95 %, leži apsolutna vrijednost razlike između dva rezultata testa dobijenih pod uvjetima ponovljivosti Izvor… Rječnik-priručnik pojmova normativne i tehničke dokumentacije

granica ponovljivosti (konvergencije). 3.11 granična vrijednost ponovljivosti (ponovljivost): granična vrijednost koja, uz razinu pouzdanosti od 95 %, nije premašena apsolutnom vrijednošću razlike između rezultata dva mjerenja (ili ispitivanja) dobijenih u uvjetima ponovljivosti... Rječnik-priručnik pojmova normativne i tehničke dokumentacije

Granica unutarlaboratorijske preciznosti- 3.11 granica preciznosti unutar laboratorije apsolutna razlika dozvoljena za pretpostavljenu vjerovatnoću P između dva analitička rezultata dobijena pod uslovima unutar laboratorijske preciznosti. Izvor… Rječnik-priručnik pojmova normativne i tehničke dokumentacije

granica reproduktivnosti R- 2.19.2 granica reproduktivnosti R 2.19.1, 2.19.2 (Promijenjeno izdanje, naslov = Promjena br. 1, IUS 12 2002). ... ... Rječnik-priručnik pojmova normativne i tehničke dokumentacije

MI 2881-2004: Preporuka. GSI. Metode kvantitativne hemijske analize. Procedure za provjeru prihvatljivosti rezultata analize- Terminologija MI 2881 2004: Preporuka. GSI. Metode kvantitativne hemijska analiza. Procedure za provjeru prihvatljivosti rezultata analize: 3.17 kritična razlika: Apsolutna razlika dozvoljena za prihvaćenu vjerovatnoću od 95% između ... ... Rječnik-priručnik pojmova normativne i tehničke dokumentacije

GOST R 50779.11-2000: Statističke metode. Statistička kontrola kvaliteta. Termini i definicije- Terminologija GOST R 50779.11 2000: Statističke metode. Statistička kontrola kvaliteta. Pojmovi i definicije originalnog dokumenta: 3.4.3 (gornje i donje) granice regulacije Granica na kontrolnoj karti, iznad koje je gornja granica, ... ... Rječnik-priručnik pojmova normativne i tehničke dokumentacije

GOST R 50779.10-2000: Statističke metode. Vjerovatnoća i osnove statistike. Termini i definicije- Terminologija GOST R 50779.10 2000: Statističke metode. Vjerovatnoća i osnove statistike. Termini i definicije originalni dokument: 2.3. (opći) skup Skup svih razmatranih jedinica. Napomena za slučajna varijabla… … Rječnik-priručnik pojmova normativne i tehničke dokumentacije

RMG 61-2003: Državni sistem za osiguranje ujednačenosti mjerenja. Pokazatelji tačnosti, ispravnosti, preciznosti metoda kvantitativne hemijske analize. Metode ocjenjivanja- Terminologija RMG 61 2003: Državni sistem za osiguranje ujednačenosti mjerenja. Pokazatelji tačnosti, ispravnosti, preciznosti metoda kvantitativne hemijske analize. Metode evaluacije: 3.12 preciznost unutar laboratorije: Preciznost … Rječnik-priručnik pojmova normativne i tehničke dokumentacije

BOARD

RJEŠENJE

U skladu sa članom 30. Ugovora o Evroazijskoj ekonomskoj uniji od 29. maja 2014. godine i stavom 2. člana 3. Sporazuma o jedinstvenim principima i pravilima za promet lekova u okviru Evroazijske ekonomske unije od 23. decembra 2014. godine, Kolegijum Evroazijske ekonomske komisije

odlučio:

1. Odobreti priložene Smjernice za validaciju analitičkih metoda za ispitivanje medicinskih proizvoda.

2. Ova Odluka stupa na snagu nakon 6 mjeseci od dana zvaničnog objavljivanja.

Predsjednik odbora
Evroazijska ekonomska komisija
T. Sargsyan

Smjernice o validaciji analitičkih metoda za ispitivanje medicinskih proizvoda

ODOBREN
Odluka odbora
Evroazijska ekonomska komisija
od 17. jula 2018. godine N 113

I. Opće odredbe

1. Ovaj Vodič definiše pravila za validaciju analitičkih metoda za ispitivanje medicinskih proizvoda, kao i spisak karakteristika koje treba procijeniti tokom validacije ovih metoda i uključiti u registracione dosijee koji se dostavljaju ovlaštenim tijelima država članica Evroazijska ekonomska unija (u daljem tekstu države članice, Unija).

2. Svrha validacije analitičke metode za ispitivanje medicinskih proizvoda je dokumentovanje njene podobnosti za predviđenu svrhu.

II. Definicije

3. Za potrebe ovog Vodiča koriste se izrazi koji znače sljedeće:

"analitički postupak" (analitički postupak) - metodologija za ispitivanje medicinskih proizvoda, koja uključuje detaljan opis redoslijeda radnji potrebnih za obavljanje analitičkog ispitivanja (uključujući opis pripreme ispitnih uzoraka, referentnih materijala, reagensa, upotrebe oprema, konstrukcija kalibracione krive, korišćene formule za proračun, itd.);

"ponovljivost" - svojstvo koje karakteriše preciznost u međulaboratorijskim testovima;

"opseg primjene (analitičko područje)" (opseg) - interval između najveće i najniže koncentracije (količine) analita u uzorku (uključujući ove koncentracije), za koji se pokazuje da analitička metoda ima prihvatljiv nivo preciznosti , tačnost i linearnost;

"linearnost" (linearnost) - direktno proporcionalna zavisnost analitičkog signala od koncentracije (količine) analita u uzorku u opsegu primene (analitičko područje) tehnike;

"otkrivanje (oporavak)" (oporavak) - odnos između dobijenih prosječnih i pravih (referentnih) vrijednosti, uzimajući u obzir odgovarajuće intervale povjerenja;

"ponovljivost (intra-assay preciznost)" - preciznost metode kada se ponovljeni testovi izvode pod istim radnim uslovima (na primjer, od strane istog analitičara ili grupe analitičara, na istoj opremi, s istim i istim reagensima itd.) za kratak vremenski period;

"ispravnost" (tačnost, istinitost) - blizina između prihvaćene prave (referentne) vrijednosti i primljene vrijednosti, koja se izražava vrijednošću otvorenosti;

"granica kvantitacije" - najmanja količina supstance u uzorku koja se može kvantifikovati sa odgovarajućom preciznošću i tačnošću;

"granica detekcije" - najmanja količina analita u uzorku koja se može detektovati, ali ne mora nužno i precizno kvantificirati;

"preciznost" (preciznost) - izraz bliskosti (stepena širenja) rezultata (vrijednosti) između serija mjerenja izvršenih na više uzoraka uzetih iz istog homogenog uzorka, pod uslovima propisanim postupkom;

"srednja (intralaboratorijska) preciznost" (intermediate precision) - efekat varijacija unutar laboratorije (različiti dani, različiti analitičari, različita oprema, različite serije (serija) reagensa, itd.) na rezultate ispitivanja identičnih uzoraka uzetih iz laboratorije ista serija;

"specifičnost" (specifičnost) - sposobnost analitičke tehnike da nedvosmisleno procijeni supstancu koja se utvrđuje, bez obzira na druge supstance (nečistoće, produkti razgradnje, ekscipijenti, matriks (okolina) itd.) prisutne u uzorku za ispitivanje;

„stabilnost (robustnost)“ (robustnost) – sposobnost analitičke metode da bude otporna na uticaj malih specificiranih promena u uslovima ispitivanja, što ukazuje na njenu pouzdanost u normalnoj (standardnoj) upotrebi.

III. Vrste analitičkih metoda koje treba validirati

4. Ovaj vodič pokriva pristupe validacije za 4 najčešće vrste analitičkih metoda:

a) testovi identifikacije (autentičnost);

b) ispitivanja za određivanje kvantitativnog sadržaja nečistoća (kvantitativna ispitivanja sadržaja nečistoća);

c) ispitivanja za određivanje granice nečistoća u uzorku (granični testovi za kontrolne nečistoće);

d) kvantitativni testovi aktivnog dijela za određivanje aktivnog dijela molekula aktivne tvari u uzorku za ispitivanje.

5. Sve analitičke metode koje se koriste za kontrolu kvaliteta medicinskih proizvoda moraju biti validirane. Ovaj Vodič ne pokriva validaciju analitičkih metoda za tipove testova koji nisu obuhvaćeni stavom 4 ovog Vodiča (na primjer, testovi za otapanje ili određivanje veličine čestica (disperzije) farmaceutske supstance, itd.).

6. Testovi za identifikaciju (autentičnost) obično se sastoje od poređenja svojstava (npr. spektralnih karakteristika, hromatografskog ponašanja, reaktivnosti, itd.) testnih i referentnih uzoraka.

7. Ispitivanja za određivanje kvantitativnog sadržaja nečistoća i ispitivanja za određivanje granice sadržaja nečistoća u uzorku imaju za cilj tačan opis karakteristika čistoće uzorka. Zahtjevi za validaciju metoda za kvantitativno određivanje nečistoća razlikuju se od zahtjeva za validaciju metoda za određivanje graničnog sadržaja nečistoća u uzorku.

8. Metode kvantitativnog ispitivanja imaju za cilj mjerenje sadržaja analita u ispitivanom uzorku. U ovim Smjernicama, kvantifikacija se odnosi na kvantitativno mjerenje glavnih komponenti farmaceutske supstance. Slični parametri validacije važe za analizu aktivne supstance ili drugih komponenti medicinski proizvod. Parametri kvantitacije validacije mogu se koristiti u drugim analitičkim postupcima (npr. ispitivanje rastvaranja).

Svrha analitičkih metoda treba biti jasno definisana, jer to određuje izbor validacijskih karakteristika koje treba vrednovati tokom validacije.

9. Sljedeće tipične karakteristike validacije analitičke metode podliježu evaluaciji:

a) ispravnost (tačnost (istinitost));

b) preciznost (preciznost):

ponovljivost;

srednja (intralaboratorijska) preciznost (srednja preciznost);

c) specifičnost;

d) granica detekcije;

e) kvantitativno ograničenje;

f) linearnost;

g) opseg primjene (analitičko područje) (opseg).

10. Najvažnije karakteristike validacije za validaciju razne vrste analitičke metode su date u tabeli.

Table. Validacijske karakteristike za validaciju različitih tipova analitičkih metoda


Validacija		Vrsta analitičke metode
karakteristika		testovi za identifikaciju	ispitivanja nečistoća		kvantitativni testovi
		(autentičnost)	kvantitativno sadržaja	ograničiti sadržaj	rastvaranje (samo mjerenje), sadržaj (aktivnost)
U redu
preciznost
	ponovljivost
	srednja preciznost
Specifičnost**
Granica detekcije
Granica kvantitacije
Linearnost
Raspon primjene

________________
* Ako je ponovljivost određena, određivanje srednje preciznosti nije potrebno.

** Nedovoljna specifičnost jedne analitičke metode može se nadoknaditi upotrebom jedne ili više dodatnih analitičkih metoda.

*** Može biti potrebno u nekim slučajevima (na primjer, kada su granica detekcije i normalizirana granica sadržaja utvrđene nečistoće blizu).

Bilješka. "-" - karakteristika se ne vrednuje, "+" - karakteristika se vrednuje.

Navedenu listu treba smatrati tipičnom prilikom validacije analitičkih metoda. Mogu postojati izuzeci koji zahtijevaju posebno opravdanje od strane proizvođača lijeka. Takva karakteristika analitičke metode kao što je stabilnost (robustnost) nije navedena u tabeli, ali je treba razmotriti u odgovarajućoj fazi razvoja analitičke metode.

Ponovna validacija (ponovljenje) može biti potrebna u sljedećim slučajevima (ali ne ograničavajući se na):

promjena u shemi sinteze farmaceutske supstance;

promjena u sastavu lijeka;

promjena analitičke metodologije.

Ponovna validacija se ne provodi ako proizvođač pruži odgovarajuće opravdanje. Obim produženja važenja zavisi od prirode izvršenih promjena.

IV. Metodologija za validaciju analitičkih metoda

1. Opšti zahtjevi za metodologiju validacije analitičkih metoda

11. Ovaj odjeljak navodi karakteristike koje treba uzeti u obzir u validaciji analitičkih metoda i daje neke pristupe i preporuke za utvrđivanje različitih karakteristika validacije svake analitičke metode.

12. U nekim slučajevima (na primjer, prilikom dokazivanja specifičnosti) može se koristiti kombinacija nekoliko analitičkih metoda kako bi se osigurala kvaliteta farmaceutske supstance ili lijeka.

13. Treba prikazati i analizirati sve relevantne podatke prikupljene tokom validacije i formule koje se koriste za izračunavanje učinka validacije.

14. Mogu se koristiti pristupi koji nisu navedeni u ovom Vodiču. Izbor procedure i protokola validacije je odgovornost podnosioca. Istovremeno, glavni cilj validacije analitičke metode je potvrditi prikladnost metode za predviđenu svrhu. Zbog svoje složenosti, pristupi analitičkim metodama za biološke i biotehnološke proizvode mogu se razlikovati od onih opisanih u ovom Vodiču.

15. Referentni materijali sa poznatim, dokumentovanim karakteristikama treba da se koriste tokom čitave studije učinka validacije. Potreban stepen čistoće referentnih materijala zavisi od nameravane upotrebe.

16. Različite karakteristike validacije razmatraju se u posebnim pododjeljcima ovog odjeljka. Struktura ovog odjeljka odražava proces razvoja i evaluacije analitičke metodologije.

17. Eksperimentalni rad treba planirati tako da se relevantne karakteristike validacije proučavaju istovremeno, dajući pouzdane podatke o mogućnostima analitičke metode (npr. specifičnost, linearnost, opseg primjene, istinitost i preciznost).

2. Specifičnost

18. Studije specifičnosti treba sprovesti tokom validacije testova za identifikaciju, nečistoće i kvantitaciju. Procedure validacije specifičnosti zavise od nameravane upotrebe analitičke metode.

19. Način na koji se potvrđuje specifičnost zavisi od zadataka za koje je analitička metoda namijenjena. Nije u svim slučajevima moguće potvrditi da je analitička metoda specifična za ovaj analit (potpuna selektivnost). U ovom slučaju preporučuje se korištenje kombinacije 2 ili više analitičkih metoda.

Nedostatak specifičnosti jedne analitičke metode može se nadoknaditi upotrebom jedne ili više dodatnih analitičkih metoda.

20. Specifičnost za različite vrste testova znači sljedeće:

a) prilikom testiranja za identifikaciju - potvrda da vam metoda omogućava da tačno identifikujete supstancu koja se utvrđuje;

b) prilikom ispitivanja na nečistoće, potvrdu da postupak ispravno identifikuje nečistoće u uzorku (na primjer, ispitivanje srodnih jedinjenja, teški metali, sadržaj ostatka rastvarača, itd.);

c) u kvantitativnim testovima - potvrda da metoda omogućava određivanje sadržaja ili aktivnosti supstance koja se utvrđuje u uzorku.

Identifikacija

21. Zadovoljavajući testovi identifikacije treba da budu u stanju da razlikuju strukturno blisko povezana jedinjenja koja mogu biti prisutna u uzorku. Selektivnost analitičkog postupka može se potvrditi dobijanjem pozitivnih rezultata (možda poređenjem sa poznatim standardom) za uzorke koji sadrže analit i negativnih rezultata za uzorke koji ga ne sadrže.

22. Da bi se potvrdilo odsustvo lažno pozitivnih rezultata, može se izvršiti test identifikacije za supstance slične strukture ili supstance povezane sa analitom.

23. Izbor potencijalno interferirajućih supstanci treba biti opravdan.

Kvantifikacija i ispitivanje na nečistoće

24. Prilikom potvrđivanja specifičnosti za analitičku proceduru upotrebom metode hromatografskog odvajanja, reprezentativni hromatogrami treba da budu obezbeđeni sa odgovarajućom identifikacijom pojedinačnih komponenti. Slične pristupe treba koristiti za druge tehnike zasnovane na separaciji.

25. Kritična odvajanja u hromatografiji treba proučavati na odgovarajućem nivou. U slučaju kritičnog odvajanja, treba postaviti rezolucionu vrijednost 2 komponente koje se najbliže eluiraju.

26. Kada se koristi nespecifična metoda kvantifikacije, treba koristiti dodatne analitičke metode i potvrditi specifičnost cjelokupnog skupa metoda. Na primjer, ako se, tijekom puštanja farmaceutske supstance, izvrši kvantitativno određivanje titrimetrijska metoda, može se dopuniti odgovarajućim ispitivanjem nečistoća.

27. Pristup je sličan i za kvantifikaciju i za ispitivanje nečistoća.

Prisustvo uzoraka nečistoća

28. U prisustvu uzoraka nečistoća, utvrđivanje specifičnosti analitičkog postupka je kako slijedi:

a) prilikom kvantifikacije potrebno je potvrditi selektivnost određivanja supstance u prisustvu nečistoća i (ili) drugih komponenti uzorka. U praksi se to radi dodavanjem nečistoća i (ili) pomoćnih tvari uzorku (farmaceutske supstance ili lijeka) u odgovarajućoj količini i ako postoje dokazi o odsustvu njihovog utjecaja na rezultat kvantitativnog određivanja aktivne tvari. ;

b) pri ispitivanju na nečistoće specifičnost se može utvrditi dodavanjem određenih količina nečistoća u farmaceutsku supstancu ili proizvod lijeka i ako postoje dokazi o odvajanju ovih nečistoća jedne od druge i (ili) od ostalih komponenti uzorka.

Nema uzoraka nečistoća

29. Ako referentni uzorci nečistoća ili proizvoda razgradnje nisu dostupni, specifičnost se može potvrditi poređenjem rezultata ispitivanja uzoraka koji sadrže nečistoće ili produkte razgradnje s rezultatima druge validirane metode (na primjer, farmakopeja ili drugog validiranog analitičkog (nezavisnog)) metoda). Tamo gdje je prikladno, referentni standardi za nečistoće trebaju uključivati uzorke koji se čuvaju pod određenim stresnim uvjetima (svjetlo, toplina, vlažnost, kisela (bazna) hidroliza i oksidacija).

30. U slučaju kvantitativnog određivanja, moraju se uporediti 2 rezultata.

31. U slučaju ispitivanja nečistoća, treba uporediti profile nečistoća.

32. Da bi se dokazalo da pik analita odgovara samo jednoj komponenti, preporučljivo je provesti studije o čistoći pikova (na primjer, korištenje detekcije niza dioda, masena spektrometrija).

3. Linearnost

33. Linearni odnos se mora procijeniti u cijelom opsegu primjene analitičke tehnike. Može se potvrditi direktno na farmaceutskoj supstanci (razblaživanjem glavnog standardnog rastvora) i (ili) na odvojenim uzorcima veštačkih (modelnih) mešavina komponenti leka primenom predložene metode. Potonji aspekt se može proučavati u toku određivanja opsega primjene (analitičke oblasti) metodologije.

34. Linearnost se procjenjuje vizuelno crtanjem analitičkog signala kao funkcije koncentracije ili količine analita. Ako postoji jasna linearna veza, dobijeni rezultati se moraju obraditi odgovarajućim statističke metode(na primjer, izračunavanjem linije regresije korištenjem metode najmanjih kvadrata). Matematička transformacija rezultata testa može biti potrebna da bi se dobila linearnost između rezultata kvantitacije i koncentracija uzorka prije regresione analize. Rezultati analize regresione linije mogu se koristiti za matematičku procjenu stepena linearnosti.

35. Ako nema linearnosti, podatke testa treba podvrgnuti matematičkoj transformaciji prije regresione analize.

36. Da bi se potvrdila linearnost, mora se odrediti i prikazati koeficijent korelacije ili koeficijent determinacije, konstantni član linearne regresije, tangenta nagiba linije regresije i rezidualni zbir kvadrata odstupanja, te graf sa svim eksperimentalnim podaci su u prilogu.

37. Ako linearnost nije uočena ni pri jednom tipu matematičke transformacije (na primjer, pri validaciji metoda imunoeseja), analitički signal mora biti opisan korištenjem odgovarajuće funkcije koncentracije (količine) analita u uzorku.

V. Raspon primjene (analitičko područje)

39. Opseg primjene analitičke tehnike zavisi od njene namjene i određuje se u proučavanju linearnosti. U okviru područja primjene, tehnika treba da obezbijedi potrebnu linearnost, ispravnost i preciznost.

40. Sljedeće opsege primjene (analitičke oblasti) analitičkih metoda treba smatrati minimalno dozvoljenim:

a) za kvantitativno određivanje aktivne supstance u farmaceutskoj supstanci ili leku - od koncentracije (sadržaja) od 80 odsto do koncentracije (sadržaja) od 120 odsto nazivne koncentracije (sadržaja);

b) za ujednačenost doziranja - od koncentracije (sadržaja) od 70 posto do koncentracije (sadržaja) od 130 posto, osim ako je za lijek opravdan širi raspon u zavisnosti od doznog oblika (na primjer, inhalatori za doziranje);

c) za test rastvaranja, ±20 posto (apsolutno) nazivnog opsega primjene. Na primjer, ako specifikacije za proizvod s modificiranim oslobađanjem pokrivaju raspon od 20 posto u prvom satu do 90 posto traženog sadržaja u 24 sata, potvrđeni opseg upotrebe trebao bi biti od 0 do 110 posto traženog sadržaja;

d) za određivanje nečistoća - od granice detekcije nečistoće do 120% vrednosti navedene u specifikaciji;

e) za nečistoće koje su izuzetno potentne ili imaju toksični ili neočekivani farmakološki efekat, granica detekcije i granica kvantifikacije treba da budu proporcionalne nivou na kojem se ove nečistoće kontrolišu. Da bi se potvrdile metode ispitivanja nečistoća koje se koriste tokom razvoja, možda će biti potrebno postaviti analitičko područje blizu očekivane (moguće) granice;

f) ako se kvantitacija i čistoća proučavaju istovremeno sa istim testom i koristi se samo 100% standard, odnos bi trebao biti linearan u cijelom opsegu primjene analitičke metode od praga izvješćivanja za nečistoću (u skladu sa pravila za proučavanje nečistoća u lijekovima i postavljanje zahtjeva prema njima u specifikacijama koje je odobrila Evroazijska ekonomska komisija) do 120 posto sadržaja navedenog u specifikaciji za kvantitativno određivanje.

VI. U redu

41. Treba utvrditi ispravnost za cijeli opseg primjene analitičkog postupka.

1. Kvantitativno određivanje aktivne farmaceutske supstance

Farmaceutska supstanca

42. Može se koristiti nekoliko metoda procjene ispravnosti:

primjena analitičke tehnike na analiziranu supstancu poznatog stepena čistoće (na primjer, na referentni materijal);

poređenje rezultata analize dobijenih validiranom analitičkom metodom i rezultata dobijenih metodom čija je ispravnost poznata i (ili) nezavisnom metodom.

Zaključak o ispravnosti može se donijeti nakon utvrđivanja preciznosti, linearnosti i specifičnosti.

medicinski proizvod

43. Može se koristiti nekoliko metoda procjene ispravnosti:

primjena analitičke tehnike na vještačke (modelne) mješavine komponenti medicinskog proizvoda, kojima je dodana prethodno poznata količina analita;

u nedostatku uzoraka svih sastojaka lijeka, moguće je lijeku dodati prethodno poznatu količinu farmaceutske supstance ili uporediti rezultate dobijene drugom metodom čija je ispravnost poznata, i (ili) nezavisna metoda.

Zaključak o ispravnosti može se donijeti nakon utvrđivanja preciznosti, linearnosti i specifičnosti.

2. Kvantifikacija nečistoća

44. Tačnost se utvrđuje na uzorcima (farmaceutske supstance i lijeka) kojima je dodana poznata količina nečistoća.

45. U nedostatku uzoraka detektabilnih nečistoća i (ili) proizvoda razgradnje, prihvatljivo je uporediti rezultate sa rezultatima dobijenim nezavisnom metodom. Dozvoljena je upotreba analitičkog signala aktivne supstance.

46. Potrebno je navesti konkretan način izražavanja sadržaja pojedinačnih nečistoća ili njihove sume (npr. u masenim procentima ili u procentima u odnosu na površinu vrha, ali u svim slučajevima u odnosu na glavni analit) .

47. Ispravnost se ocjenjuje za najmanje 9 određivanja 3 različite koncentracije koje pokrivaju cijeli raspon primjene (tj. 3 koncentracije i 3 ponavljanja za svaku koncentraciju). Definicije trebaju uključiti sve korake metodologije.

48. Tačnost se izražava vrijednošću otvorenosti u procentima na osnovu rezultata kvantitativnog određivanja supstance dodane u poznatoj količini u analizirani uzorak, odnosno razlikom između dobijenih prosječnih i pravih (referentnih) vrijednosti, uzimajući u obzir odgovarajući intervali pouzdanosti.

VII. preciznost

49. Validacija testova za kvantitaciju i nečistoće uključuje određivanje preciznosti.

50. Preciznost je postavljena na 3 nivoa: ponovljivost, srednja preciznost i reproduktivnost. Preciznost treba utvrditi korištenjem jednoobraznih, autentičnih uzoraka. Ako je nemoguće dobiti homogeni uzorak, dozvoljeno je odrediti preciznost pomoću umjetno pripremljenih (modelnih) uzoraka ili otopine uzorka. Preciznost analitičkog postupka obično se izražava u smislu varijanse, standardne devijacije ili koeficijenta varijacije serije mjerenja.

VIII. Ponovljivost

51. Ponovljivost se utvrđuje izvođenjem najmanje 9 određivanja koncentracije u opsegu primjene analitičke tehnike (3 koncentracije i 3 ponavljanja za svaku koncentraciju), odnosno najmanje 6 određivanja koncentracije za uzorke sa 100% sadržajem analita.

IX. Srednja (intralaboratorijska) preciznost

52. Stepen do kojeg se uspostavlja srednja preciznost zavisi od uslova pod kojima se koristi analitička metoda. Podnosilac prijave mora utvrditi uticaj slučajnih faktora na preciznost analitičkog postupka. Tipični istraženi (varijabilni) faktori su različiti dani, analitičari, oprema itd. Nije potrebno posebno proučavati ove uticaje. Prilikom proučavanja uticaja razni faktori poželjno je koristiti dizajn eksperimenta.

X. Reproducibilnost

53. Reproducibilnost karakteriše preciznost u međulaboratorijskom eksperimentu. Reproducibilnost treba utvrditi u slučaju standardizacije analitičke metode (na primjer, kada je uključena u Farmakopeju Unije ili u farmakopeje država članica). Uključivanje podataka o reproduktivnosti u registracioni dosije nije potrebno.

XI. Reprezentacija podataka

54. Za svaku vrstu preciznosti treba navesti standardnu devijaciju, relativnu standardnu devijaciju (koeficijent varijacije) i interval pouzdanosti.

XII. Granica detekcije

55. Mogući su različiti pristupi određivanju granice detekcije u zavisnosti od toga da li je tehnika instrumentalna ili neinstrumentalna. Mogu se koristiti i drugi pristupi.

XIII. vizuelna procjena

56. Vizuelna procjena se može koristiti i za neinstrumentalne i za instrumentalne metode. Granica detekcije se utvrđuje analizom uzoraka sa poznatim koncentracijama analita i određivanjem njegovog minimalnog sadržaja pri kojem se pouzdano detektuje.

XIV. Procjena granice detekcije u smislu odnosa signal-šum

57. Ovaj pristup je primjenjiv samo na analitičke procedure za koje se opaža osnovni šum.

58. Određivanje odnosa signal-šum se vrši upoređivanjem signala dobijenih iz uzoraka sa poznatim niskim koncentracijama sa signalima dobijenim iz slijepih uzoraka i utvrđivanjem minimalne koncentracije pri kojoj se analit može pouzdano detektirati. Za procjenu granice detekcije prihvatljivim se smatra odnos signal-šum od 3:1 do 2:1.

XV. Procjena granice detekcije iz standardne devijacije analitičkog signala i nagiba kalibracijske krivulje

59. Granica detekcije (LO) može se izraziti na sljedeći način:

gdje:

60. Vrijednost k se izračunava iz kalibracione krive za analit. Procjena s može se izvršiti na nekoliko načina:

b) prema kalibracionoj krivulji. Potrebno je analizirati rezultujuću kalibracionu krivu, konstruisanu za uzorke sa sadržajem analita blizu granice detekcije. Preostala standardna devijacija linije regresije ili standardna devijacija tačke preseka sa y-osom (standardna devijacija slobodnog člana linearne regresije) može se koristiti kao standardna devijacija.

XVI. Reprezentacija podataka

61. Potrebno je navesti granicu detekcije i način njenog određivanja. Ako se određivanje granice detekcije zasniva na vizuelnoj proceni ili proceni odnosa signal-šum, predstavljanje relevantnih hromatograma smatra se dovoljnim da to opravda.

62. Ako se vrijednost granice detekcije dobije proračunom ili ekstrapolacijom, procjena mora biti potvrđena nezavisnim ispitivanjem dovoljnog broja uzoraka sa sadržajem analita koji odgovara granici detekcije ili joj je blizu.

XVII. Granica kvantitacije

63. Granica kvantitacije je neophodna karakteristika validacije postupaka koji se koriste za određivanje niskog sadržaja supstanci u uzorku, posebno za određivanje nečistoća i/ili proizvoda razgradnje.

64. Moguće je nekoliko pristupa određivanju granice kvantitacije, u zavisnosti od toga da li je tehnika instrumentalna ili neinstrumentalna. Drugi pristupi su dozvoljeni.

XVIII. vizuelna procjena

65. Vizuelna procjena se može koristiti i za neinstrumentalne i za instrumentalne metode.

66. Granica kvantitacije se obično utvrđuje analizom uzoraka sa poznatim koncentracijama analita i procjenom minimalnog sadržaja pri kojem se analit može kvantificirati s prihvatljivom tačnošću i preciznošću.

XIX. Procjena granice kvantifikacije odnosom signal-šum

67. Ovaj pristup je primjenjiv samo na metode mjerenja gdje se uočava osnovni šum.

68. Određivanje omjera signal-šum se vrši upoređivanjem izmjerenih signala dobijenih iz uzoraka sa poznatim niskim koncentracijama analita sa signalima dobijenim iz slijepih uzoraka, te utvrđivanjem minimalne koncentracije pri kojoj se analit može pouzdano nalaziti. kvantificirano. Tipičan odnos signal-šum je 10:1.

XX. Procjena granice kvantifikacije od standardne devijacije signala i nagiba kalibracijske krive

69. Granica kvantifikacije (LOQ) može se izraziti na sljedeći način:

gdje:

s je standardna devijacija analitičkog signala;

k je tangenta nagiba kalibracione krive.

70. Vrijednost k se izračunava iz kalibracione krive za analit. Procjena s može se izvršiti na nekoliko načina:

a) prema standardnoj devijaciji slijepog uzorka. Za dovoljan broj slijepih uzoraka mjeri se veličina analitičkog signala i izračunava se standardna devijacija njihovih vrijednosti;

b) prema kalibracionoj krivulji. Potrebno je analizirati rezultujuću kalibracionu krivu, konstruisanu za uzorke sa sadržajem analita blizu granice kvantitativnog određivanja. Preostala standardna devijacija linije regresije ili standardna devijacija tačke preseka sa y-osom (standardna devijacija slobodnog člana linearne regresije) može se koristiti kao standardna devijacija.

XXI. Reprezentacija podataka

71. Potrebno je navesti granicu kvantifikacije i način njenog određivanja.

72. Granica kvantitacije mora se naknadno potvrditi analizom dovoljnog broja uzoraka sa sadržajem analita koji je jednak ili blizu granice kvantitacije.

73. Drugi pristupi osim gore navedenih mogu biti prihvatljivi.

XXII. Stabilnost (robustnost)

74. Proučavanje stabilnosti (robustnosti) treba provesti u fazi razvoja, obim studija zavisi od analitičke metode koja se razmatra. Potrebno je pokazati pouzdanost analize pri namjernim varijacijama parametara (uslova) metode.

75. Ukoliko rezultati mjerenja zavise od promjena uslova primjene analitičke metode, potrebno je strogo kontrolisati poštovanje tih uslova ili predvidjeti mjere opreza tokom ispitivanja.

76. Kako bi se osiguralo da se validnost analitičke metode održava kada se koristi, jedna od posljedica studija robusnosti treba da bude uspostavljanje niza parametara prikladnosti sistema (npr. test rezolucije).

77. Uobičajene varijacije parametara su:

stabilnost rastvora koji se koriste u analitičkim postupcima;

vrijeme ekstrakcije.

Parametri varijacije za tečnu hromatografiju su:

promjena pH mobilne faze;

promjena u sastavu mobilne faze;

različite kolone (različite serije i dobavljači);

temperatura;

brzina mobilne faze (brzina protoka).

Parametri varijacije za plinsku hromatografiju su:

različite kolone (različite serije i dobavljači);

temperatura;

brzina gasa nosača.

XXIII. Procjena prikladnosti sistema

78. Procjena prikladnosti sistema je sastavni dio mnogih analitičkih procedura. Ovi testovi se zasnivaju na konceptu da oprema, elektronika, analitičke operacije i uzorci koji se analiziraju čine kompletan sistem i kao takvi treba da budu vrednovani. Kriterijumi podobnosti sistema treba da budu uspostavljeni za određenu metodu i da zavise od tipa analitičke metode koja se validira. Dodatne informacije dostupno u farmakopeji Unije ili u farmakopejama država članica.

Elektronski tekst dokumenta
pripremio Kodeks dd i verificirao prema:
službena stranica
Evroazijska ekonomska unija
www.eaeunion.org, 20.07.2018