Kalit so'zlar

erkin radikal/antioksidant/ antioksidant faollik / umumiy antioksidant qobiliyati / kimyoluminesans/ luminol / erkin radikal / antioksidant / antioksidant faollik / umumiy antioksidant quvvat / xemiluminesans / luminol

izoh kimyo fanlari bo'yicha ilmiy maqola, ilmiy maqola muallifi - Georgiy Konstantinovich Vladimirov, E. V. Sergunova, D. Yu. Izmailov, Yu. A. Vladimirov

Dorivor o'simlik materiallari inson tanasi uchun antioksidantlar manbalaridan biridir. O'simlik ob'ektlarida antioksidantlar miqdorini aniqlash usullari orasida xemilyuminessent tahlil usuli keng tarqalgan. Hozirgi ishda u taxmin qilish uchun ishlatilgan umumiy antioksidant qobiliyati(OAU) rovon, yovvoyi gul va do'lana mevalaridan tayyorlangan qaynatmalar va malina mevalari infuzioni. Tajribada kinetika qayd etildi kimyoluminesans horseradish peroksidaz, vodorod peroksid va luminoldan tashkil topgan tizimda. Namunadagi tizim komponentlarining kontsentratsiyasi va hajmlari kuchli antioksidantlar (askorbin kislota) va o'rtacha kuchli antioksidantlar (kversetin) o'lchash vaqtida (10 minut) to'liq oksidlanishi uchun tanlangan. Yorug'lik yig'indisining o'zgarishiga asoslangan TAUni hisoblash usuli taklif etiladi va asoslanadi. kimyoluminesans o'simlik namunalari mavjudligida. Kinetik tahlil kimyoluminesans o'rganilayotgan ob'ektlarda o'rtacha kuchli antioksidantlar, jumladan flavonoidlar va kuchsiz antioksidantlar (tokoferol va boshqalar) ustun ekanligini ko'rsatdi. O'rganilayotgan ob'ektlar va ularning ma'lumotlari uchun hisoblangan RAU qiymatlarini taqqoslash kimyoviy tahlil bir xil miqdordagi antioksidantlarni o'z ichiga olgan, turi bo'yicha turli nisbatlarga ega bo'lgan oziq-ovqatlar tanani himoya qilish qobiliyatida farq qilishi mumkinligini ko'rsatdi. zararli ta'sirlar erkin radikallar. Ta'riflangan texnika har xil turdagi antioksidantlar aralashmasini o'z ichiga olgan o'simlik ob'ektlarini o'rganish uchun istiqbolli hisoblanadi.

Aloqador mavzular kimyo fanlari bo'yicha ilmiy ishlar, ilmiy maqola mualliflari - Georgiy Konstantinovich Vladimirov, E. V. Sergunova, D. Yu. Izmailov, Yu. A. Vladimirov

2016 yil / Georgiy Vladimirov, Sergunova E.V., Izmaylov D.Yu., Vladimirov Yu.A.
2,2"-azo-bis (2-amidinopropan) yordamida faollashtirilgan xemiluminesans orqali antioksidantlarni aniqlash
2012 yil / Alekseev A.V., Proskurnina E.V., Vladimirov Yu.A.
Sitokrom c tomonidan katalizlangan peroksidaza reaktsiyalarida dihidrokersetin va rutinning antioksidant ta'siri
2008 yil / Demin E.M., Proskurnina E.V., Vladimirov Yu.A.
Fenton reaktsiyasi natijasida kelib chiqqan xemiluminesans orqali biologik substratlarning oksidlovchi va antioksidant qobiliyatini baholash.
2016 yil / Piskarev Igor Mixaylovich, I.P. Ivanova
Mikroperoksidaza-luminol tizimi yordamida qon zardobidagi lipoproteinlar tarkibidagi lipohidroperoksidlar miqdorini aniqlash.
2011 yil / Teselkin Yuriy Olegovich, Babenkova Irina Vladimirovna
Antioksidantlarni o'rganish usullari
2004 yil / Xasanov V. V., Ryjova G. L., Maltseva E. V.
Tuva etnomedicisida ishlatiladigan o'simliklarning antioksidant faolligi
2012 yil / Chexani N.R., Teselkin Yu.O., Pavlova L.A., Kozin S.V., Lyubitskiy O.B.
Turli biologik test tizimlarida Fosprenilning antioksidant xususiyatlarini o'rganish
2017 yil / A. V. Sanin, A. N. Narovlyanskiy, A. V. Pronin, T. N. Kozhevnikova, V. Yu. Sanina, A. D. Agafonova
Poliklorli bifenillarning turli dozalarini to'liq qonning spontan va immunoglobulin bilan bog'liq luminolga bog'liq xemiluminesans holatiga ta'siri.
2016 yil / Gabdulxakova I.R., Qayumova A.F., Samohodova O.V.
Spektrofotometriya va xemiluminesans usullaridan foydalangan holda muhim arterial gipertenziyasi bo'lgan bolalarda antioksidantlarni himoya qilishning lipid peroksidlanish tizimini baholash.
2014 yil / Natyaganova Larisa Viktorovna, Gavrilova Oksana Aleksandrovna, Kolesnikova Larisa Romanovna

Dorivor o'simlik materialida umumiy antioksidant qobiliyatini kimyoluminesans yordamida aniqlash

Dorivor o'simlik materiali inson tanasi uchun antioksidantlar manbalaridan biridir. Xemiluminesans tahlili o'simlik materiallaridagi antioksidantlar tarkibini aniqlashning keng tarqalgan usullaridan biridir. Bizning ishimizda tog 'kuli, atirgul va do'lana meva qaynatmalari, shuningdek, malinali meva infuzionining umumiy antioksidant qobiliyatini (TAC) aniqlash uchun xemiluminesans tahlilidan foydalanildi. Tajribalar xren peroksidaza, vodorod peroksid va luminoldan tashkil topgan tizimning xemiluminesans kinetikasini aniqladi. Tizim tarkibiy qismlarining kontsentratsiyasi va hajmlari shunday tanlanganki, kuchli antioksidantlar (askorbin kislotasi) va o'rtacha quvvatdagi antioksidantlar (kversetin) o'lchash vaqtida (10 daqiqa) to'liq oksidlanadi. O'simlik namunalari mavjud bo'lganda xemiluminesans yorug'lik yig'indisining o'zgarishiga asoslangan TACni hisoblash usuli taklif qilindi va asoslandi. Xemiluminesans kinetikasining tahlili shuni ko'rsatdiki, o'rganilayotgan ob'ektlarda o'rtacha kuchli antioksidantlar, jumladan flavonoidlar va zaif antioksidantlar (tokoferol va boshqalar) ustunlik qiladi. O'rganilayotgan ob'ektlar uchun hisoblangan TAC qiymatlarini taqqoslash va ularning kimyoviy tahlil ma'lumotlari shuni ko'rsatdiki, bir xil miqdordagi antioksidantlarni o'z ichiga olgan mahsulotlar turlari bo'yicha turli xil nisbatlarda antioksidantlar tanani erkin radikallarning zararli ta'siridan himoya qilish qobiliyatida farq qilishi mumkin. . Ta'riflangan texnika har xil turdagi antioksidantlar aralashmasini o'z ichiga olgan o'simlik ob'ektlarini o'rganish uchun istiqbolli hisoblanadi.

Ilmiy ish matni "Dorivor o'simlik materiallarining umumiy antioksidant qobiliyatini aniqlashning xemiluminesans usuli" mavzusida

dorivor o'simlik materiallarining umumiy antioksidant qobiliyatini aniqlash uchun kimyoluminesans usuli

G. K. Vladimirov1^, E. V. Sergunova2, D. Yu. Izmailov1, Yu. A. Vladimirov1

1 Tibbiy biofizika kafedrasi, fakultet fundamental tibbiyot, Moskva Davlat universiteti M.V.Lomonosov nomidagi, Moskva

2 Farmakognoziya kafedrasi, Farmatsevtika fakulteti,

I. M. Sechenov nomidagi Birinchi Moskva davlat tibbiyot universiteti, Moskva

Dorivor o'simlik materiallari inson tanasi uchun antioksidantlar manbalaridan biridir. O'simlik ob'ektlarida antioksidantlar miqdorini aniqlash usullari orasida xemilyuminessent tahlil usuli keng tarqalgan. Ushbu ishda u rovon, yovvoyi atirgul va do'lana mevalari va malina mevasi infuzioni qaynatmalarining umumiy antioksidant qobiliyatini (TOA) baholash uchun ishlatilgan. Tajribada xemilyuminesans kinetikasi xren peroksidaza, vodorod peroksid va luminoldan tashkil topgan tizimda qayd etilgan. Namunadagi tizim komponentlarining kontsentratsiyasi va hajmlari kuchli antioksidantlar (askorbin kislota) va o'rtacha kuchli antioksidantlar (kversetin) o'lchash vaqtida (10 minut) to'liq oksidlanishi uchun tanlangan. O'simlik namunalari mavjud bo'lganda kimilyuminesans yorug'lik yig'indisining o'zgarishiga asoslangan RAE ni hisoblash usuli taklif qilingan va asoslangan. Xemiluminesans kinetikasining tahlili shuni ko'rsatdiki, o'rganilayotgan ob'ektlarda o'rtacha kuchli antioksidantlar, jumladan flavonoidlar va kuchsiz antioksidantlar (tokoferol va boshqalar) ustunlik qiladi. O'rganilayotgan ob'ektlar uchun hisoblangan TAU qiymatlarini taqqoslash va ularning kimyoviy tahlili ma'lumotlari shuni ko'rsatdiki, bir xil miqdordagi antioksidantlarni o'z ichiga olgan mahsulotlar turlari bo'yicha har xil nisbatlarda tanani erkin radikallarning zararli ta'siridan himoya qilish qobiliyatida farq qilishi mumkin. Ta'riflangan texnika har xil turdagi antioksidantlar aralashmasini o'z ichiga olgan o'simlik ob'ektlarini o'rganish uchun istiqbolli hisoblanadi.

Kalit so'zlar: erkin radikal, antioksidant, antioksidant faollik, umumiy antioksidant sig'im, xemiluminesans, luminol

Moliyalashtirish: Ish Rossiya Ilmiy Jamg'armasi tomonidan qo'llab-quvvatlandi, grant No 14-15-00375.

Ex3 Yozuvlarga murojaat qilish kerak: Georgiy Konstantinovich Vladimirov

119192, Moskva, Lomonosovskiy pr-t, 31, 5-bino; [elektron pochta himoyalangan]

Qabul qilingan maqola: 10.03.2016 Maqola nashrga qabul qilingan: 18.03.2016

dorivor o'simlik materialida umumiy antioksidant qobiliyatini kimyoluminesans bilan aniqlash

1 Tibbiyot biofizikasi kafedrasi, Lomonosov nomidagi Moskva davlat universiteti, fundamental tibbiyot fakulteti, Moskva, Rossiya

2 Farmakognoziya kafedrasi, Farmatsevtika fakulteti,

Sechenov nomidagi Birinchi Moskva Davlat Tibbiyot Universiteti, Moskva, Rossiya

Dorivor o'simlik materiali inson tanasi uchun antioksidantlar manbalaridan biridir. Xemiluminesans tahlili o'simlik materiallaridagi antioksidantlar tarkibini aniqlashning keng tarqalgan usullaridan biridir. Bizning ishimizda tog 'kuli, atirgul va do'lana meva qaynatmalari, shuningdek, malina meva infuzionining umumiy antioksidant qobiliyatini (TAC) aniqlash uchun xemiluminesans tahlilidan foydalanildi. Tajribalar xren peroksidaza, vodorod peroksid va luminoldan tashkil topgan tizimning xemiluminesans kinetikasini aniqladi. Tizim tarkibiy qismlarining kontsentratsiyasi va hajmlari shunday tanlanganki, kuchli antioksidantlar (askorbin kislotasi) va o'rtacha quvvatdagi antioksidantlar (kversetin) o'lchash vaqtida (10 daqiqa) to'liq oksidlanadi. O'simlik namunalari mavjud bo'lganda xemiluminesans yorug'lik yig'indisining o'zgarishiga asoslangan TACni hisoblash usuli taklif qilindi va asoslandi. Xemiluminesans kinetikasining tahlili shuni ko'rsatdiki, o'rganilayotgan ob'ektlarda o'rtacha kuchli antioksidantlar, jumladan flavonoidlar va zaif antioksidantlar (tokoferol va boshqalar) ustunlik qiladi. O'rganilayotgan ob'ektlar uchun hisoblangan TAC qiymatlarini taqqoslash va ularning kimyoviy tahlil ma'lumotlari shuni ko'rsatdiki, bir xil miqdordagi antioksidantlarni o'z ichiga olgan mahsulotlar turlari bo'yicha turli xil nisbatlarda antioksidantlar tanani erkin radikallarning zararli ta'siridan himoya qilish qobiliyatida farq qilishi mumkin. . Ta'riflangan texnika har xil turdagi antioksidantlar aralashmasini o'z ichiga olgan o'simlik ob'ektlarini o'rganish uchun istiqbolli hisoblanadi.

Kalit so'zlar: erkin radikal, antioksidant, antioksidant faollik, umumiy antioksidant sig'im, xemiluminesans, luminol

Moliyalashtirish: ushbu ish Rossiya Ilmiy Jamg'armasi tomonidan qo'llab-quvvatlandi, grant №. 14-15-00375.

Tashakkur: mualliflar Lomonosov nomidagi Moskva davlat universitetidan Andrey Alekseevga eksperimentni o'tkazishda ko'rsatgan yordami uchun minnatdorchilik bildiradilar. Yozuvlarga murojaat qilish kerak: Jorj Vladimirov

Lomonosovskiy prospekti, d. 31, k. 5, Moskva, Rossiya, 119192; [elektron pochta himoyalangan] Qabul qilingan: 03/10/2016 Qabul qilingan: 18/03/2016

Organizmda hosil bo'lgan erkin radikallar hujayra membranalarining tuzilishini buzadi, bu esa, o'z navbatida, turli patologik holatlarning rivojlanishiga olib keladi. Radikallarning halokatli oksidlovchi ta'siri tananing antioksidant mudofaa tizimi tomonidan oldini oladi, bunda muhim rol past molekulyar birikmalarni o'ynang - radikallarning tutqichlari (tuzoqlari). Antioksidantlar manbalaridan biri dorivor o'simlik xom ashyosi, shuningdek, uning asosidagi preparatlar bo'lib, ularning antioksidant salohiyatini o'rganish ularning profilaktika va terapevtik ta'sirini oshirishga yordam beradi.

Antioksidantlarni aniqlashning asosiy usullari ishlarda ko'rib chiqiladi, ammo antioksidantlarning ta'rifi kimyoviy birikmalar o'rganilayotgan ob'ektning himoya xususiyatlarining to'liq tasvirini bermaydi: ular nafaqat u yoki bu antioksidantning miqdori, balki ularning har birining faolligi bilan ham belgilanadi. Antioksidant faollik yoki antioksidant faollik, AOA antioksidantning erkin radikal (kInH) bilan reaktsiyasi tezligi konstantasidir. Xemiluminesans (CL) usuli namunadagi antioksidantlar bog'laydigan radikallarning umumiy miqdorini (umumiy antioksidant sig'imi, TAU) va usuldan foydalanganda aniqlash imkonini beradi. matematik modellashtirish CL kinetikasi - shuningdek, antioksidantlar, ya'ni AOA bilan radikallarning hosil bo'lish tezligi va reaktsiyasi.

Jami antioksidant quvvatni aniqlash uchun xemiluminesans usulining eng keng tarqalgan modifikatsiyasi luminolni kimyoluminesans faollashtiruvchisi sifatida ishlatishga asoslangan. Luminol, vodorod peroksid va o'z-o'zidan parchalanish (termoliz) natijasida radikallar hosil qila oladigan birikma qo'shilgan namuna, masalan, 2,2"-azobis-(2-amidinopropan) dihidroklorid (ABAP) ichiga joylashtiriladi. xemiluminometrning hujayrasi:

Molekulyar kislorod ishtirokida R^ alkil radikali peroksil radikal ROO^ hosil qiladi:

ROO^ + LH2 ^ ROOH + LHv LH dan oraliq moddalar (luminol gidroperoksid va luminol endoperoksid) hosil bo'lishi orqali luminol oksidlanishining yakuniy mahsuloti - aminoftalik kislota molekulasi foton chiqaradigan elektron qo'zg'atilgan holatda hosil bo'ladi. , va buning natijasida xemiluminesans kuzatiladi. CL intensivligi foton ishlab chiqarish tezligiga mutanosibdir, bu esa o'z navbatida tizimdagi statsionar LH kontsentratsiyasiga mutanosibdir. Radikallar bilan o'zaro ta'sirlashganda, antioksidantlar tasvirlangan transformatsiyalar zanjirini to'xtatadi va foton shakllanishiga to'sqinlik qiladi.

Termolizga duchor bo'lgan birikmalar kimyoviy nurlanish usuli bilan namunaning antioksidant qobiliyatini tahlil qilishda radikallarning yagona mumkin bo'lgan manbai emas. Muqobil tizimlar xren peroksidaz-vodorod peroksid, hemin-vodorod peroksid, sitoxrom c-kardiolipin-vodorod peroksid va boshqalar. Peroksidazalar bilan luminol oksidlanish reaktsiyalarining sxemasi Kormier va boshqalarning ishida ko'rib chiqiladi. .

Ushbu tizimlar uchun CL kinetik egri reaktsiyaning ikki bosqichini aks ettiradi: CL intensivligining ortishi bosqichi va plato bosqichi yoki luminesansning asta-sekin pasayishi,

CL intensivligi doimiy yoki asta-sekin kamayadi. Qog'ozda egri chiziqlarning bu xususiyatini hisobga olgan holda umumiy antioksidant quvvatni o'lchashning ikkita yondashuvi tasvirlangan. TRAP (Total Reactive Antioxidant Potential) usuli CL kechikish t ni o'lchashga asoslangan va troloks yoki askorbin kislotasi kabi antioksidantlarni aniqlash uchun ishlatilishi mumkin: ular radikallar bilan yuqori reaksiya tezligi konstantasi bilan tavsiflanadi va shu sababli kuchli antioksidantlar deb ataladi. Yashirin davrda ular to'liq oksidlanish. TAR usuli (umumiy antioksidant reaktivlik) platoda yoki xemiluminesans egri chizig'ining maksimal darajasida xemiluminesansning q o'chish darajasini o'lchaydi:

Bu erda I - antioksidantsiz kimilyuminesansning intensivligi va 11 - antioksidant ishtirokidagi CL intensivligi. Ushbu usul, agar tizimda radikallar bilan o'zaro ta'sir qilish tezligi past bo'lgan, asosan, zaif antioksidantlar bo'lsa, qo'llaniladi - luminol konstantasiga nisbatan ancha past.

Antioksidantlarning ta'siri nafaqat t va c ko'rsatkichlari bilan tavsiflanadi. Ishlardan ko'rinib turibdiki, gemin-H202-luminol tizimidagi siydik kislotasi yoki sitoxrom c-kardiolipin-H202-luminol tizimidagi tokoferol, rutin va quercetin kabi antioksidantlarning ta'siri maksimal tezlikning o'zgarishi bilan tavsiflanadi. CL o'sishi (utx). Kinetikani matematik modellashtirish natijalari shuni ko'rsatadiki, bu antioksidantlarning radikallar bilan o'zaro ta'siri tezligi konstantalarining qiymatlari luminol konstantasi qiymatiga yaqin, shuning uchun bunday antioksidantlarni o'rta kuchli antioksidantlar deb atash mumkin.

Agar o'rganilayotgan material, xususan, o'simlik xom ashyosi faqat bitta turdagi antioksidantlarni o'z ichiga olgan bo'lsa, unda ularning tarkibini yuqorida sanab o'tilgan uchta ko'rsatkichdan biri (m, q yoki V) bilan tavsiflash mumkin edi. Ammo o'simlik xom ashyosida antioksidantlar aralashmasi mavjud. turli kuch. Ushbu muammoni hal qilish uchun ba'zi mualliflar formula bo'yicha hisoblangan ma'lum bir DE vaqti davomida xemiluminesans yorug'lik yig'indisining o'zgarishidan foydalanganlar.

DE = DE0 - DE,

bu erda DE0 va DE5 ma'lum vaqt uchun CL yorug'lik yig'indisidir? mos ravishda nazorat va sinov namunalarida. Vaqt tizimdagi barcha antioksidantlarning oksidlanishi, ya'ni sinov namunasining CL egri chizig'i nazorat namunasining CL egri chizig'i darajasiga yetishi uchun etarli bo'lishi kerak. Ikkinchisi tadqiqotchilar nafaqat luminesans yorug'lik yig'indisini yozibgina qolmay, balki CL kinetik egri chizig'ini etarlicha uzoq vaqt davomida yozib olishlarini taklif qiladi, bu har doim ham bajarilmaydi.

Barcha o'lchangan ko'rsatkichlar asbob va o'lchash shartlariga bog'liq bo'lganligi sababli, o'rganilayotgan tizimdagi moddaning antioksidant ta'siri odatda standart sifatida qabul qilingan antioksidantning ta'siri bilan taqqoslanadi, masalan, Trolox.

Tizim horseradish peroksidaz-vodorod peroksid ko'plab mualliflar tomonidan o'simlik materiallarining umumiy antioksidant qobiliyatini tahlil qilish uchun ishlatilgan. Ishlarda namunalardagi antioksidantlar miqdorini baholash uchun CL latent davri (TRAP usuli) ishlatilgan va ishlarda CL rivojlanish egri chizig'i ostidagi maydon ishlatilgan. Biroq, bu ishlar aniq asos bermaydi

OAUni baholash uchun u yoki bu parametrni tanlash.

Tadqiqotning maqsadi antioksidantlarning nisbati qanday ekanligini aniqlash edi har xil turlari TAU ga ta'sir qiladi va kimilyuminesans usulini o'simlik materiallarida TAU ni aniqroq aniqlash imkoniyatiga ega bo'ladigan tarzda o'zgartiring. Buning uchun o‘z oldimizga bir qancha vazifalarni qo‘yganmiz. Birinchidan, qaysi turdagi antioksidantlar o'rganilayotgan ob'ektlarning TAE ga asosiy hissa qo'shishini tushunish uchun o'rganilayotgan ob'ektlarning CL kinetikasini uch turdagi (kuchli, o'rta va kuchsiz) standart antioksidantlar kinetikasi bilan solishtirish. Ikkinchidan, TAE ga eng katta hissa qo'shadigan antioksidant ta'siriga nisbatan ushbu ob'ektlar ta'sirida CL yorug'lik yig'indisining pasayishini o'lchash orqali o'rganilayotgan ob'ektlarning TAE ni hisoblash.

MATERIALLAR VA USLUBLAR

Tadqiqot ob'ektlari "Krasnogorskleksredstva" OAJ (Rossiya) tomonidan ishlab chiqarilgan do'lana, tog 'kuli va atirgul mevalarining sanoat namunalari, shuningdek mualliflar tomonidan tabiiy o'sish sharoitida Moskva viloyatida to'plangan va haroratda quritilgan malina mevalari edi. 60-80 ° S, ular sharbati va bosim deformatsiyalarini izolyatsiya qilishni to'xtatmaguncha.

Xemiluminesans usuli bilan antioksidant sig'imini tahlil qilish uchun reagentlar: KH2PO4, 20 mM bufer eritmasi (pH 7,4); Horseradish ildizlaridan peroksidaza (faoliyat 112 birlik/mg, M = 44 173,9), 1 mM suv eritmasi; luminol (5-amino-1,2,3,4-tetrahidro-1,4-ftalazindion, 3-aminoftalik kislota gidrazid, M=177,11), 1 mM suvli eritma; vodorod periks (H2O2, M = 34,01), 1 mM suvli eritma; antioksidantlarning eritmalari (askorbin kislotasi, quercetin, tokoferol). Barcha reagentlar Sigma Aldrich (AQSh) tomonidan ishlab chiqarilgan.

Dolana, tog 'kuli va yovvoyi atirgul mevalaridan qaynatmalar va malina mevalaridan infuzion SSSR Davlat farmakopeyasining "Infuzionlar va qaynatmalar" umumiy farmakopeya maqolasida keltirilgan metodologiyaga muvofiq tayyorlangan.

Umumiy antioksidant quvvati PowerGraph 3.3 dasturidan foydalangan holda Lum-100 kimyoluminometrida (DISoft, Rossiya) kimyoluminesansni qayd etish orqali aniqlandi. O'simlik materiallarida TAU ni aniqlash uchun 1 mM konsentratsiyada 40 mkl luminol, 0,1 mkM konsentratsiyada 40 mkl xren peroksidaza, 10 dan 50 mkl gacha qaynatma yoki infuzion (kontsentratsiyaga qarab) va fosfat buferi. umumiy namuna hajmini 1 ml ga etkazish uchun zarur bo'lgan miqdorda. Kyuvet qurilmaga o'rnatildi va fon signalini kuzatgan holda CL qayd etildi. Fon signali ro'yxatga olingandan 48 soniya o'tgach, kyuvetaga 1 mM konsentratsiyali 100 mkl H2O2 qo'shildi va CL ro'yxatga olish 10 daqiqa davomida davom ettirildi. Har bir o'simlik ob'ektining turli konsentratsiyasi bilan to'rtta namuna tayyorlandi. Antioksidantlarning har biri uchun besh xil konsentratsiyada askorbin kislotasi, quercetin va tokoferol eritmalari uchun CL ham qayd etilgan. Keyinchalik, qaynatmalar va infuziyalar namunalarining TAU kversetin uchun qayta hisoblab chiqildi.

Luminol, horseradish peroksidaza va vodorod periks kontsentratsiyasi o'rtacha vaqt ichida (10 daqiqadan ko'p bo'lmagan) dorivor o'simlik materiallaridan suvli ekstraktlarning antioksidant qobiliyatini aniqlash uchun tanlangan. Bu vaqt ichida askorbat antioksidantlar va flavonoid quercetin (o'simlik materiallarining asosiy antioksidantlari) uchun xemiluminesans egri chiziqlari.

platoga yetdi, bu tizimdagi antioksidantlarning to'liq yo'q qilinishini ko'rsatdi. O'rganilayotgan namunalarning suyultirilishi va standart antioksidantlar eritmalarining konsentratsiyasi (rasmlar sarlavhalarida ko'rsatilgan) barcha CL kinetik egri chiziqlari bir xil asbob sezgirligida o'lchanadigan tarzda tanlangan.

Antioksidant quvvati antioksidantni o'z ichiga olgan moddaning qo'shilishi natijasida xemiluminesans kinetik egri chizig'i ostidagi maydon (AS) o'zgarishidan hisoblab chiqilgan. Buning uchun biz antioksidantsiz tizim uchun S0 ni hisoblab chiqdik va undan antioksidant qo'shilgan tizimni tavsiflovchi SS maydonini ayirdik. AS qiymati xemiluminometrning sezgirligiga va o'lchash shartlariga bog'liq. AS/C ■ V nisbati (bu erda C - kyuvetada o'rganilayotgan biologik materialning konsentratsiyasi, g/l va V - kyuvetaning hajmi, l) o'rganilayotgan materialning 1 g antioksidant qobiliyatini ifodalaydi, ya'ni. , o'simlik materiali.

Reaksiya aralashmasining bir xil hajmiga joylashtirilgan standart antioksidant, masalan, quercetin eritmasining antioksidant sig'imi ASa shunga o'xshash tarzda hisoblab chiqilgan. AS/CÄ ■ V nisbati (bu erda CA - kyuvetada antioksidantning og'irlik konsentratsiyasi, g/l) 1 g antioksidantning antioksidant qobiliyatini ifodalaydi.

Standart antioksidantlarning har biri uchun hisob-kitoblar chiziqli munosabatlar doirasida amalga oshirilganligiga va olingan natijalar takrorlanishiga ishonch hosil qilish uchun bir nechta konsentratsiyali eritmalardan signal qayd etilgan. Haqiqatan ham, konsentratsiya bo'yicha signalning chiziqli bog'liqligi (ASa = kA ■ CA) olindi, undan kA stoxiometrik koeffitsienti hisoblab chiqilgan. Fisher mezoniga ko'ra, standart antioksidantlar uchun olingan kA qiymatlari 0,975 ehtimollik bilan statistik ahamiyatga ega. Keyinchalik, to'rtta konsentratsiyadan olingan signal to'rtta o'simlik namunasining har biri uchun va biz olgan barcha namunalar uchun qayd etildi chiziqli bog'liqlik konsentratsiyadan signal (AS = k ■ C), undan k stoxiometrik koeffitsient hisoblangan. 0,975 (Fischer testi) ehtimoli bilan o'simlik namunalari uchun olingan k qiymatlari statistik ahamiyatga ega. Standart antioksidantning og'irligi (mg%) bo'yicha o'simlik materialining umumiy antioksidant qobiliyati formula bo'yicha topildi.

OAU = k ■ 105. k

Qiymatlar p da o'rtacha arifmetik ± standart og'ish (M ± 5) sifatida taqdim etildi.<0,05.

TADQIQOT NATIJALARI

Natriy askorbat (1-rasm) ishtirokida xemiluminesans kinetikasini o'rganish shuni ko'rsatdiki, bu antioksidant CL deyarli to'liq bostirilgan yashirin davr bilan tavsiflanadi. Uning davomiyligi tizimdagi antioksidant miqdori bilan mutanosibdir. Bunday holda, CL egri chizig'ining qiyaligi ham, platodagi CL intensivligi ham o'zgarmaydi. Bu askorbin kislotaning kuchli antioksidant bo'lib, tizimda hosil bo'lgan barcha radikallarni, shu jumladan luminol radikallarini ushlab turadiganligi va CL barcha askorbat oksidlanmaguncha rivojlanmasligi bilan izohlanadi.

Tokoferolning ta'siri (2-rasm) platoda CL intensivligining pasayishi bilan namoyon bo'ldi, bu zaif antioksidantlar uchun xos bo'lgan, garchi tokoferol eng ko'p biri hisoblanadi.

kuchli antioksidantlar. Ehtimol, bu nomuvofiqlik bizning tajribamizda erkin radikallar suvli eritmada bo'lganligi bilan bog'liq bo'lsa, tokoferolning ta'siri odatda qutbsiz muhitda o'rganiladi. Kardiolipin bilan sitoxrom c kompleksi radikallar manbai bo'lib xizmat qilgan va bu kompleks ichida luminol bilan reaksiya davom etgan ishda tokoferol o'rtacha kuchli antioksidant xususiyatlariga ega edi.

Kversetinning turli konsentratsiyalarining bizning tizimimizga ta'sirini o'rganib chiqdik (3-rasm) va uning va natriy askorbat va tokoferol uchun kinetik egri chiziqlarni taqqoslab, shuni ta'kidlash mumkinki, quercetinning asosiy ta'siri qiyalikning o'zgarishida namoyon bo'ladi. egri chiziqlar, ya'ni mo''tadil antioksidantlar uchun xos bo'lgan CL ning rivojlanish tezligi.

Barcha o'rganilgan damlamalar uchun CL egri chiziqlari (4-rasm) oxirida, ya'ni CL intensivligining bir oz pasayishi bilan quercetin uchun egri chiziqlarga o'xshaydi, ya'ni.

Vaqt, min

Guruch. 1. Natriy askorbatining xemiluminesans kinetikasiga ta'siri

Tizim tarkibiy qismlarining kontsentratsiyasi: luminol - 40 mkM, xren peroksidaza - 4 nM, vodorod periks - 100 mkM. Egri chiziqlar: 1 - nazorat namunasi; 2 - 0,05 mkM; 3 - 0,10 mkM; 4 - 0,15 mkM; 5 - 0,2 mkM; 6 - 0,25 mkM natriy askorbat.

plato. Ishda ko'rsatilganidek, bu xatti-harakatlar o'rta kuchli antioksidantlar uchun xosdir, bizning holatlarimizda polifenollar - flavonoidlar va taninlar kiradi. Malinali mevalarning infuzioni uchun (4-rasm, D), plato darajasida kemiluminesansning pasayishi sezilarli bo'lib, bu holda tokoferol bo'lgan zaif antioksidantlar uchun xosdir. Quercetin va tokoferol nuqtai nazaridan, malina mevasining infuzioni 4,7 ± 0,9 mkmol / g kvertsetin va 11,9 ± 0,8 mkmol / g tokoferolni o'z ichiga oladi.

O'simlik materiallaridan o'rganilgan to'rtta suvli ekstraktning turli kontsentratsiyasi uchun olingan xemiluminesans egri chiziqlarini solishtirganda, o'rta va kuchsiz antioksidantlarning namunalarning umumiy antioksidant qobiliyatiga qo'shgan hissasi quyidagi tartibda kamayishi ko'rsatilgan: malina mevasi infuzioni (1-rasm). 4, D), atirgul mevasi qaynatmasi (4-rasm, C), rovon mevalari (4-rasm, A), do'lana mevalari (4-rasm, B). Kyuvetada o'rganilayotgan moddaning C konsentratsiyasi bo'yicha AS qiymatlari va quercetin bo'yicha umumiy antioksidant quvvati qiymatlari jadvalda keltirilgan.

NATIJALARNING MUHOKAMASI

Tajribalar davomida olingan ma'lumotlar va ular asosida hisoblangan o'rganilayotgan ob'ektlarning TAU qiymatlari kimyoviy tahlil usullari yordamida aniqlangan ulardagi asosiy antioksidantlarning tarkibi bilan taqqoslandi. Turli ob'ektlardagi antioksidantlarning umumiy miqdori va TAU o'rtasidagi ijobiy bog'liqlik shubhasiz bo'lishiga qaramay, bu ko'rsatkichlar o'rtasida sezilarli farqlar mavjud. Misol uchun, agar flavonoidlar, taninlar va askorbin kislotasi tarkibining yig'indisini oladigan bo'lsak, u do'lana mevalarining qaynatmasidan tashqari barcha o'rganilgan ob'ektlar uchun hisoblangan TAU dan ko'p bo'lib chiqadi (jadval).

Boshqa tadqiqotchilar ham kimyoviy tahlil natijalari va xemiluminesans usuli bilan aniqlangan TAU qiymati ko'pincha mos kelmasligini ko'rsatdi. Ishda umumiy antioksidant quvvati aniqlangan

46 Vaqt, min

Men" "h chi----.

Guruch. 2. Tokoferolning xemiluminesans kinetikasiga ta'siri

Tizim tarkibiy qismlarining kontsentratsiyasi: luminol - 40 mkM, xren peroksidaza - 4 nM, vodorod periks - 100 mkM. Egri chiziqlar: 1 - nazorat namunasi; 2 - 0,01 mkM; 3 - 0,025 mkM; 4 - 0,06 mkM; 5 - 0,1 mkM; 6 - 0,2 mkM tokoferol.

46 Vaqt, min

Guruch. 3-rasm. Kversetinning xemiluminesans kinetikasiga ta'siri Tizim komponentlarining kontsentratsiyasi: luminol - 40 mkM, xren peroksidaza - 4 nM, vodorod peroksid - 100 mkM. Egri chiziqlar: 1 - nazorat namunasi; 2 - 0,02 mkM; 3 - 0,03 mkM; 4 - 0,04 mkM; 5 - 0,05 mkM; 6 - 0,06 mkM quercetin.

Vaqt, min

46 Vaqt, min

120 I 100 80 \ 60 40 20

46 Vaqt, min

Guruch. 4-rasm. Rovon mevalari (A), do'lana (B), yovvoyi gul (C) va malina mevasi infuzioni (D) qaynatmalarining kimilyuminesans kinetikasiga ta'siri. (A) Egri chiziqlar: 1 - nazorat namunasi; 2 - 0,002 g/l; 3 - 0,004 g/l; 4 - 0,006 g/l; 5 - 0,008 g/l rovon mevalari qaynatmasi. (B) Egri chiziqlar: 1 - nazorat namunasi; 2 - 0,005 g/l; 3 - 0,0075 g/l; 4 - 0,01 g/l; 5 - 0,0125 g/l dolana mevalaridan qaynatma. (C) Egri chiziqlar: 1 - nazorat namunasi; 2 - 0,001 g/l; 3 - 0,0015 g/l; 4 - 0,002 g/l; 5 - 0,0025 g/l gul dumbasining qaynatmasi. (D) Egri chiziqlar: 1 - nazorat namunasi; 2 - 0,001 g/l; 3 - 0,003 g/l; 4 - 0,004 g/l; 5 - 0,005 g / l malina infuzioni.

tizimda peroksidaz-luminol-vodorod peroksid triterpen birikmalarining tarkibi bilan bog'liq. Shu bilan birga, boshqa o'simlik tadqiqot ob'ekti bo'lgan o'sha mualliflarning ishlarida TAU va har qanday moddalar guruhi, shu jumladan flavonoidlar tarkibi o'rtasida hech qanday bog'liqlik kuzatilmagan.

Ushbu nomuvofiqliklar kamida uchta omil bilan bog'liq. Birinchidan, antioksidantlarning faolligi muhim, ya'ni o'simlik namunasini tashkil etuvchi turli antioksidantlar uchun ularning radikallar bilan o'zaro ta'sir qilish tezligi. Izmailovning fikricha, mexidol, tokoferol va quercetin uchun mos keladigan reaksiyalarning tezlik konstantalari 0,04: 2: 60 ga bog'liq. Ikkinchidan, kimyoviy reaksiyaga kiruvchi har bir antioksidant molekula turli xil miqdordagi radikallarni ushlab turishi mumkin. Ishga ko'ra, quercetin, siydik va askorbin kislotalar reaksiyaga kirishgan antioksidant molekula uchun mos ravishda 3,6 ± 0,1, 1,4 ± 0,1 va 0,5 ± 0,2 radikallarni ushlab turishgan (gemin-H202-luminol tizimi ishlatilgan). Uchinchidan, tadqiqot natijalariga ishda bo'lgani kabi o'simlik namunalarining o'zida ham peroksidaza faolligi, shuningdek namunalarda kaltsiy borligi ta'sir qilishi mumkin, bu ishda ko'rsatilganidek, ko'paytirishga qodir. muayyan sharoitlarda horseradish peroksidaza faolligi. Bu odatda ko'proq natijaga olib keladi

platoda nazorat egri chizig'iga qaraganda yuqori CL intensivligi, ammo biz buni kuzatmadik.

Birinchi omil yorug'lik yig'indisining o'zgarishi kabi parametrdan foydalanishni keskin cheklaydi, chunki xemiluminesansni o'lchash vaqti sinov namunasidagi barcha antioksidantlarni iste'mol qilish vaqtidan uzoqroq bo'lishi kerak. Ushbu momentning yondashuvini faqat kimilyuminesans kinetikasini o'lchash orqali baholash mumkin. Bundan tashqari, zaif antioksidantlarning OAE ga qo'shgan hissasi keskin kam baholanadi, chunki ularning to'liq oksidlanish vaqti qabul qilinadigan o'lchash vaqtidan (10-20 minut) bir necha baravar ko'p.

Antioksidantning stoxiometrik koeffitsienti bundan ham katta ahamiyatga ega. Ular tomonidan tutilgan n radikallar soni teng

Bu erda p - stexiometrik koeffitsient, Am - o'lchash paytida antioksidant konsentratsiyasining o'zgarishi, bizning holatlarimizda, sinov namunasidagi tekshiriluvchi moddaning dastlabki konsentratsiyasi.

Antioksidant yo'qligida va uning ishtirokida lyuminesansning yorug'lik yig'indisining farqi n ga proportsionaldir.Ushlab olingan radikallarning umumiy soni n = Y.p. m,

bu yerda ma'lum bir antioksidantning stexiometrik koeffitsienti, m - o'zgarish vaqtidagi konsentratsiyasi

Tadqiqot ob'ekti Flavonoidlar, mg%* Taninlar, mg%* Askorbin kislotasi, mg%* AS/C ■ 10-8, arb. birliklar OAU, mg% quercetin

Rovon mevalaridan qaynatma 8,87 ± 0,01 210,00 ± 10,00 0,67 ± 0,02 7,13 ± 0,96 56,53 ± 7,61

Atirgulning qaynatmasi 4,66 ± 0,04 850,00 ± 20,00 3,70 ± 0,12 16,60 ± 3,40 131,63 ± 27,26

Do‘lana mevalaridan qaynatma 3,01 ± 0,06 12,00 ± 3,00 0,23 ± 0,002 3,18 ± 0,29 25,20 ± 2,32

Quritilgan malina infuzioni 90,00 ± 4,00 40,00 ± 20,00 3,91 ± 0,08 6,65 ± 1,21 52,69 ± 9,56

Eslatma: * - adabiyot ma'lumotlari, . AS - namuna uchun yorug'lik summasining o'zgarishi, rel. birlik, C - kyuvetada namunaning konsentratsiyasi, g/l. Hisoblangan qiymatlar p da ishonchli<0,05. Число измерений для каждого образца - четыре.

reniy. Tushunarli radikallarning umumiy soni antioksidantlarning umumiy miqdoriga teng emas, chunki pt koeffitsientlari nafaqat birlikka teng emas, balki turli antioksidantlar uchun ham sezilarli darajada farqlanadi.

n qiymati antioksidant bo'lgan namuna va antioksidant bo'lmagan nazorat namunasi o'rtasidagi ma'lum vaqt davomida o'lchangan yorug'lik summalari farqiga proportsionaldir:

Bu erda k - bir xil o'lchash sharoitida doimiy bo'lgan koeffitsient.

Maqolada ko'rib chiqilgan usul antioksidantlarning umumiy hajmini aniqlashga imkon beradi, kimyoviy tahlil esa mahsulotdagi antioksidantlarning umumiy miqdorini aniqlashga imkon beradi. Shu sababli, kimyoluminesans usuli kimyoviy tahlillarga qaraganda ko'proq ma'lumotli ko'rinadi.

Horseradish peroksidaza, vodorod peroksid va luminoldan tashkil topgan tizimda xemiluminesans kinetikasini qayd etish orqali o'simlik xom ashyosining umumiy antioksidant qobiliyatini baholash uchun biz tanlagan shartlar (komponent konsentratsiyasi mos ravishda 4 nM, 100 mkM va 40 mkM); 20 mM fosfat buferi, pH 7,4),

10 daqiqada kuchli antioksidantlar (askorbin kislotasi) va o'rtacha antioksidantlarning (quercetin) oksidlanishini ta'minladi. Ushbu o'lchov davomiyligi qulay va o'lchovlarning kerakli sifatini ta'minlaydi.

Xemiluminesans kinetikasining tahlili shuni ko'rsatdiki, o'rganilayotgan ob'ektlarda (rovon, yovvoyi atirgul, do'lana mevalari va malina mevalari infuziyasi) asosiy antioksidantlar o'rta kuchli antioksidantlar, shu jumladan flavonoidlar va zaif kuchli antioksidantlar (tokoferol va boshqalar). ). Kimiluminesans yorug'lik yig'indisining pasayishiga asoslanib, o'rganilayotgan ob'ektlar uchun umumiy antioksidant quvvati hisoblab chiqilgan. Olingan TAU qiymatlarini kimyoviy tahlil natijalari bilan taqqoslash shuni ko'rsatdiki, turli nisbatlarda bir xil miqdordagi antioksidantlarni o'z ichiga olgan mahsulotlar tanani erkin radikallarning zararli ta'siridan samarali himoya qilish qobiliyatida farq qilishi mumkin. Ta'riflangan texnika turli xil antioksidantlar aralashmasini o'z ichiga olgan o'simlik ob'ektlarini o'rganish uchun istiqbolli hisoblanadi. Shu bilan birga, tadqiqotning soddaligi va arzonligi bilan ajralib turadi. Kimiluminesans kinetikasini o'lchashni reaksiyalarni matematik modellashtirish bilan birlashtirish nafaqat TAU ni aniqlash jarayonini avtomatlashtiradi, balki antioksidantlarning alohida guruhlarini indikatorga qo'shgan hissasini ham aniqlaydi.

Adabiyot

1. Proskurnina E. V., Vladimirov Yu. A. Erkin radikallar tartibga solish va patologik jarayonlarning ishtirokchilari sifatida. In: Grigoriev A. I., Vladimirov Yu. A., muharrirlar. Asosiy fanlar - tibbiyot. Biofizika. asal. texnologiya. Moskva: MAKS matbuoti; 2015. 1-jild. bet. 38-71.

3. Xasanov V. V., Ryjova G. L., Maltseva E. V. Antioksidantlarni o'rganish usullari. Kimyo. rast. xomashyo. 2004; (3): 63-75.

4. Vasilev R. F., Kancheva V. D., Fedorova G. F., Batovska D. I., Trofimov A. V. Kalkonlarning antioksidant faolligi. Reaktivlikni xemiluminesans yordamida aniqlash va reagentlar va oraliq mahsulotlarning energiyalari va tuzilmalarini kvant-kimyoviy hisoblash. Kinetika va kataliz. 2010; 51(4): 533-41.

6. Fedorova GF, Trofimov AV, Vasil "ev RF, Veprintsev TL. Peroksi-

Radikal vositachi kimilyuminesans: mexanik xilma-xillik va antioksidant tahlil uchun asoslar. Arkivoc. 2007; 8:163-215.

8. Bastos EL, Romoff P, Eckert CR, Baader WJ. H2O2-gemin bilan qo'zg'atilgan luminol chemiluminesans bilan antiradikal imkoniyatlarni baholash. J Agric Food Chem. 2003 yil 3 dekabr; 51 (25): 7481-8.

9. Vladimirov Yu. A., Proskurnina E. V. Erkin radikallar va hujayrali xemiluminesans. Muvaffaqiyatlar biol. kimyo. 2009; 49:341-88.

10. Vladimirov Yu. A., Proskurnina E. V., Izmailov D. Yu. Kinetik kimiluminesans erkin radikal reaktsiyalarni o'rganish usuli sifatida. Biofizika. 2011; 56(6): 1081-90.

11. Izmailov D. Yu., Demin E. M., Vladimirov Yu. A. Xemiluminesans kinetikasini o'lchash orqali antioksidant faollikni aniqlash. Fotobiologiya va fotomeditsina. 2011; 7(2):70-6.

12. Lissi EA, Pascual C, Del Castillo MD. 2,2"-Azo-bis(2-amidinopropan) termoliz natijasida hosil bo'lgan luminol luminesans. Bepul.

Radic Res Commun. 1992 yil; 17(5): 299-311.

13. Lissi EA, Pascual C, Del Castillo MD. SOD faolligini baholash uchun luminol luminesansining söndürülmesinden foydalanish bo'yicha. Bepul Radic Biol Med. 1994 yil iyun; 16(6): 833-7.

15. Lissi EA, Salim-Xanna M, Pascual C, Del Castillo MD. Luminol bilan kuchaytirilgan xemiluminesans o'lchovlaridan umumiy antioksidant potentsial (TRAP) va umumiy antioksidant reaktivligini baholash. Bepul Radic Biol Med. 1995 yil fevral; 18(2):153-8.

17. Cormier MJ, Prichard PM. To'xtatilgan oqim texnikasi bilan luminolning lyuminestsent peroksidlanish mexanizmini o'rganish. J Biol Chem. 1968 yil 25 sentyabr; 243(18): 4706-14.

21. Alekseev A. V., Proskurnina E. V., Vladimirov Yu. A. 2,2'-azo-bis (2-amidinopropan) yordamida faollashtirilgan xemiluminesans orqali antioksidantlarni aniqlash. Moskva davlat universitetining xabarnomasi. Ser. 2. Xim. 2012; 53 ( 3): 187-93.

24. SSSR Davlat farmakopeyasi SSSR Sog'liqni saqlash vazirligi XI nashr. Nashr. 2 “Tahlilning umumiy usullari. Dorivor o'simlik materiallari". M.: Tibbiyot; 1987. bet. 147-8.

25. Sergunova E. V., Sorokina A. A., Kornyushina M. A. Rosehip ekstrakti preparatlarini o'rganish. Dorixona. 2012; (2): 14-6.

26. Sergunova E. V., Sorokina A. A., Avrach A. S. Do'lana mevasini saqlash va suv olishning turli usullarida o'rganish. Dorixona. 2010; (5): 16-8.

27. Avrach A. S., Sergunova E. V., Kuksova Ya. V. Mevalarning biologik faol moddalari va oddiy malinaning suv ekstraktlari. Dorixona. 2014 yil; (1): 8-10.

28. Avrach A. S., Samylina I. A., Sergunova E. V. Do'lana mevalarining biologik faol moddalarini o'rganish - gomeopatik matritsali damlamalarni tayyorlash uchun xom ashyo. Shanba kuni. ilmiy tr. XXIV Moskva materiallari asosida. Intl. gomeopatist. konf. “Zamonaviy tibbiyotda gomeopatik usulni ishlab chiqish”; 2014 yil 24-25 yanvar; Moskva. M.; 2014. p. 146-7.

29. Sergunova E. V., Sorokina A. A. Turli xil saqlash usullarining dorivor o'simlik materiallaridagi biologik faol moddalar tarkibini o'rganish. Shanba kuni. XX Rossga asoslangan tezislar. nat. kong. "Odam va tibbiyot"; 2013 yil 15-19 aprel; Moskva. Moskva: EkoOnis; 2013. p. 184-90.

30. Alexandrova E. Yu., Orlova M. A., Neiman P. L. Horseradish ildizpoyalari va ildizlaridan olingan ekstraktlarda peroksidaza faolligini va uning turli ta'sirlarga barqarorligini o'rganish. Vestn. Moskva davlat universiteti. Ser. 2. Kimyo. 2006; 47(5):350-2.

1. Proskurnina EV, Vladimirov YuA. Free radikaly kak uchastniki regulyatornykh i patologicheskikh protsessov. In: Grigor "ev AI, Vladimirov YuA, muharrirlar. Fundamental" nye nauki - meditsine. Biofizicheskie meditsinskie texnologiyalari. Moskva: MAKS matbuoti; 2015.v. 1. p. 38-71. rus.

2. Chanda S, Dave R. Antioksidant faollikni baholash uchun in vitro modellari va antioksidant xususiyatlarga ega bo'lgan ba'zi dorivor o'simliklar: Umumiy ko'rinish. Afr J Microbiol Res. 2009 yil dekabr; 3(13): 981-96.

3. Xasanov VV, Ryjova G.L., Mal "tseva EV. Metodiya issledovaniya antioksidant. Ximija Rastitel "nogo Sir" ja. 2004; (3): 63-75. Rus.

4. Vasil "ev RF, K" "ncheva VD, Fedorova GF, B" "tovska DI, Trofimov AV. Antioksidantnaya aktivnost" xalkonov. Xemilyuminestsentnoe opredelenie reaktsionnoi sposobnosti i kvantovo-ximicheskii raschet energii i stroeniya reagentov va intermediatov. Kinetika va kataliz. 2010; 51(4): 533-41. rus.

5. Slavova-Kazakova AK, Angelova SE, Veprintsev TL, Denev P, Fabbri D, Dettori MA va boshqalar. Curcumin bilan bog'liq birikmalarning antioksidant potentsiali, xemiluminesans kinetikasi, zanjirni buzish samaradorligi, tozalash faolligi (ORAC) va DFT hisob-kitoblari bilan o'rganiladi. Beilstein J Org Chem. 2015 yil 11 avgust; 11:1398-411.

6. Fedorova GF, Trofimov AV, Vasil'ev RF, Veprintsev TL.Peroksi-radikal vositachi xemiluminesans: mexanik xilma-xillik va antioksidant tahlil uchun asoslar.Arkivoc.2007;8:163-215.

7. Fedorova GF, Menshov VA, Trofimov AV, Vasil'ev RF.O'simlik lipidlarining antioksidant xususiyatlari uchun oson xemiluminesans tahlili: asoslar va tasviriy misollar.Tahlilchi.2009 yil, 134 (10): 2128-34.

8. Bastos EL, Romoff P, Eckert CR, Baader WJ. H2O2-gemin tomonidan qo'zg'atilgan luminol tomonidan antiradikal imkoniyatlarni baholash

9. Vladimirov YuA, Proskurnina EV. Erkin radikaly i kletochnaya khemilyuminestsentsiya. Usp Biol Khim. 2009; 49:341-88. rus.

10. Vladimirov YuA, Proskurnina EV, Izmailov DYu. Kineticheskaya khemilyuminestsentsiya metodi izucheniya reaktsii svobodnykh radikalov. biofizika. 2011; 56(6): 1081-90. rus.

11. Izmailov DYu, Demin E.M., Vladimirov YuA. Opredelenie aktivnosti antioksidantov metodom izmereniya kinetiki khemilyuminestsen-tsii. Fotobiologiya va fotomeditsina. 2011; 7(2):70-6. rus.

12. Lissi EA, Pascual C, Del Castillo MD. 2,2"-Azo-bis(2-amidinopropan) termoliz natijasida hosil bo'lgan luminol luminesans. Free Radic Res Commun. 1992; 17 (5): 299-311.

13. Lissi EA, Pascual C, Del Castillo MD. SOD faolligini baholash uchun luminol lyuminestsensiyasini o'chirishdan foydalanish bo'yicha. Bepul Radic Biol Med. 1994 yil iyun; 16(6): 833-7.

14. Lissi EA, Escobar J, Pascual C, Del Castillo MD, Schmitt TH, Di Mascio P. Methemoglobin yoki oksihemoglobinning vodorod periks bilan reaktsiyasi bilan bog'liq ko'rinadigan chemiluminesans. Photochem Photobiol. 1994 yil noyabr; 60(5):405-11.

15. Lissi EA, Salim-Xanna M, Pascual C, Del Castillo MD. Luminol bilan mustahkamlangan kimiluminesans o'lchovlaridan umumiy antioksidant potentsial (TRAP) va umumiy antioksidant reaktivligini baholash. Bepul Radic Biol Med. 1995 yil fevral; 18(2):153-8.

16. Landi-Librandi AP, de Oliveira CA, Azzolini AE, Kabeya LM, Del Ciampo JO, Bentley MV va boshqalar. HRP-H2O2-luminol tizimi tomonidan liposomal flavonollarning antioksidant faolligini in vitro baholash. J Mikrokapsula. 2011; 28(4):258-67.

17. Cormier MJ, Prichard PM. Mexanizmni tekshirish

to'xtatilgan oqim texnikasi bilan luminolning lyuminestsent peroksidlanishi. J Biol Chem. 1968 yil 25 sentyabr; 243(18): 4706-14.

18. Chang CL, Lin CS, Lai GH. Fitokimyoviy xususiyatlar, erkin radikallarni tozalash faoliyati va beshta dorivor o'simlik ekstraktining neyroproteksiyasi. Evidga asoslangan komplement Alternativ Med. 2012; 2012: 984295. doi: 10.1155/2012/984295. Epub 2011 yil 10-avgust.

19. Chang CL, Lin CS. Terminalia chebula Retzius ekstraktlarining fitokimyoviy tarkibi, antioksidant faolligi va neyroprotektiv ta'siri. Evidga asoslangan komplement Alternativ Med. 2012; 2012: 125247. doi: 10.1155/2012/125247. Epub 2011 yil 5-iyul.

20. Georgetti SR, Casagrande R, Di Mambro VM, Azzolini AE, Fonseca MJ. Xemiluminesans usuli bilan turli flavonoidlarning antioksidant faolligini baholash. AAPS PharmSci. 2003; 5(2):111-5.

21. Alekseev AV, Proskurnina EV, Vladimirov YuA. Opredelenie antioksidantov metodom aktivirovannoi khemilyuminestsentsii s ispol "zovaniem 2.2" -azo-bis (2-amidinopropana). Moskva universiteti kimyo byulleteni. 2012; 53(3): 187-93. rus.

22. Pogacnik L, Ulrih NP. O'simlik ekstraktlarining antioksidant qobiliyatini aniqlash uchun optimallashtirilgan kimilyuminesans tahlilini qo'llash. Luminesans. 2012 yil noyabr-dekabr; 27(6):505-10.

23. Saleh L, Plieth C. Xemiluminesans inhibisyon tahlili bilan biologik namunalarda aniqlangan umumiy parametr sifatida umumiy past molekulyar og'irlikdagi antioksidantlar. Nat protokoli. 2010 yil sentyabr; 5(10): 1627-34.

24. SSSR vazirlik zdravooxraneniya. Gosudarsvennaya farmokopeya SSSR. 11-nashr. Iss. 2. “Obshchie metodikasi tahlili.

Lekarstvennoe rastitel "noe syr" e", Moskva: Medltsina, 1987, 147-8-bet. Rus.

25. Sergunova EV, Sorokina AA, Kornyushina MA. Izuchenie ekstraktsionnykh preparatov shipovnika. Dorixona. 2012; (2): 14-6. rus.

26. Sergunova EV, Sorokina AA, Avrach AS. Izuchenie plodov boyaryshnika razlichnykh sposobov konservatsii i vodnykh izvlechenii. Farmatsiya. 2010; (5): 16-8. rus.

27. Avrach AS, Sergunova EV, Kuksova YaV. Biologicheski aktivnye veshchestva plodov i vodnykh izvlechenii maliny obyknovennoi. Farmatsiya. 2014 yil; (1): 8-10. rus.

28. Avrach AS, Samylina IA, Sergunova EV. Izuchenie biologicheski aktivnykh veshchestv plodov boyaryshnika - syr "ya dlya prigotovleniya nastoek gomeopaticheskikh matrichnykh. "Razvitie gomeopaticheskogo metoda v sovremennoi meditsine" 14-Moskva xalqaro gomeopatik konferentsiya materiallari to'plami; 20-14 yanvar Moskva;

29. Sergunova EV, Sorokina AA. Izuchenie sostava biologicheski aktivnykh veshchestv v lekarstvennom rastitel "nom syr" e razlichnykh sposobov konservatsii. "Chelovek i lekarstvo" 20-Rossiya Milliy Kongressi materiallari; 2013 yil aprel 1519 yil; Moskva. Moskva: EkOOnis; 2013. p. 184-90. rus.

30. Aleksandrova EYu, Orlova MA, Neyman PL. Izuchenie peroksidaznoi aktivnosti v ekstraktakh iz kornevishcha i kornei khrena i ee stabil "nosti k razlichnym vozdeistviyam. Moskva universiteti kimyo byulleteni. 2006; 47 (5): 350-2. Rus.

diplom ishi

1.4 Antioksidantlar uchun tadqiqot usullari

antioksidant faollik tasniflanadi: namoyon bo'lgan AOA ni ro'yxatdan o'tkazish usullari bo'yicha (volümetrik, fotometrik, kimiluminesans, lyuminestsent, elektrokimyoviy); oksidlanish manbasining turi bo'yicha; oksidlangan birikmaning turi bo'yicha; oksidlangan birikmani o'lchash usuli bo'yicha.

Biroq, antioksidant faollikni aniqlashning eng mashhur usullari:

1 TEAC (trolox ekvivalenti antioksidant quvvati): usul quyidagi reaksiyaga asoslangan:

Metmioglobin + H 2 O 2 > Ferrilglobin + ABTS > ABTS * + AO.

Trolox ekvivalentlik usuli (TEAC) antioksidantlarning 2,2-azinobis radikal kationlarini (ABTS) kamaytirish qobiliyatiga asoslanadi va shu bilan spektrning uzun to'lqin uzunlikdagi qismida (600 nm) so'rilishini inhibe qiladi. Usulning muhim kamchiliklari radikalni olishning ikki bosqichli reaktsiyasidir. Bu tahlil qilish vaqtini uzaytiradi va tahlil uchun standartlashtirilgan reagentlar to'plamidan foydalanilganiga qaramay, natijalarning tarqalishini oshirishi mumkin.

2 FRAP (temir kamaytiruvchi antioksidant quvvat): usul quyidagi reaksiyaga asoslangan:

Fe (III) - Tripiridiltriazin + AO> Fe (II) - Tripiridiltriazin.

Temirni kamaytiruvchi/antioksidant qobiliyati (FRAP). Bu yerda Fe(III)-tripiridiltriazinning Fe(II)-tripiridiltriazinga qaytarilish reaksiyasidan foydalaniladi. Biroq, bu usul ba'zi antioksidantlarni, masalan, glutationni aniqlay olmaydi. Bu usul past molekulyar og'irlikdagi antioksidantlarni bevosita aniqlash imkonini beradi. Past pHda Fe (III) tripiridiltriazin kompleksining Fe (II) kompleksiga qisqarishi kuchli ko'k rangning paydo bo'lishi bilan birga keladi. O'lchovlar antioksidantlarning reaktsiya aralashmasida hosil bo'lgan reaksiya zarralarining oksidlovchi ta'sirini bostirish qobiliyatiga asoslanadi. Bu usul sodda, tez va bajarishda arzon.

3 ORAC (kislorod radikalini yutish qobiliyati): usul quyidagi reaktsiyaga asoslangan:

Fe (II) + H 2 O 2 > Fe (III) + OH * + AO> OH * + Luminol.

Kislorod radikallarini yutish qobiliyatini aniqlash (ORAC). Ushbu usulda substratning (fikoeritrin yoki flüoresein) floresansi qayd etiladi, bu uning ROS bilan o'zaro ta'siri natijasida yuzaga keladi. Agar sinov namunasida antioksidantlar mavjud bo'lsa, u holda nazorat namunasi bilan solishtirganda floresanlikning pasayishi kuzatiladi. Bu usul dastlab 1992 yilda Milliy qarish institutida doktor Guohua Cao tomonidan ishlab chiqilgan. 1996 yilda doktor Ronald Prayer bilan USDA qarish tadqiqot markazida qo'shma guruhga qo'shildi, bu erda yarim avtomatlashtirilgan usul mavjud edi. rivojlangan.

4 TRAP (jami radikal tuzoqqa qarshi antioksidant parametr): usul quyidagi reaksiyaga asoslanadi:

AAPH+AO>AAPH* + PL (PE).

Bu usul antioksidantlarning peroksil radikali 2,2-azobis (2-amidinopropan) dihidroxlorid (AAPH) bilan o'zaro ta'sir qilish qobiliyatidan foydalanadi. TRAP modifikatsiyalari analitik signalni ro'yxatga olish usullaridan iborat. Ko'pincha, tahlilning yakuniy bosqichida AAPH peroksi radikali lyuminestsent (luminol), floresan (diklorofloressein diasetat, DCFH-DA) yoki boshqa optik faol substrat bilan o'zaro ta'sir qiladi.

Suvda eruvchan E vitamini hosilasi Trolox (6-gidroksi-2,5,7,8-tetrametilkroman-2-karboksi kislotasi) TEAC, ORAC va TRAP usullari uchun standart sifatida ishlatiladi.

So'nggi paytlarda antioksidant faollikni baholash uchun elektrokimyoviy usullardan foydalanishga qiziqish ortdi. Ushbu usullar juda sezgir va tezkor tahlildir.

Ba'zi oziq-ovqat mahsulotlarining antioksidant faolligini baholash antioksidant moddalarning enol (-OH) va sulfgidril (-SH) guruhlari tufayli oksidlanish-qaytarilish reaktsiyalarida ishtirok etish xususiyatidan foydalanishga asoslangan potensiometriya usuli bilan amalga oshiriladi.

Eritmalarning antioksidant xususiyatlarini aniqlash antioksidantlarning mediator tizimi bilan kimyoviy o'zaro ta'siriga asoslanadi, bu esa uning oksidlanish-qaytarilish potentsialining o'zgarishiga olib keladi. Elektrokimyoviy hujayra K-Na-fosfat bufer eritmasi, vositachi tizimi Fe (III) / Fe (II) va oksidlanish-qaytarilish potentsialini o'lchashdan oldin murakkab elektrodni o'z ichiga olgan idishdir. Antioksidant faolligi g-ekv/l da baholanadi.

Antioksidant faollikni aniqlashning amperometrik usuli ma'lum bir potentsial ostida bo'lgan ishchi elektrod yuzasida tekshirilayotgan moddaning oksidlanishi paytida yuzaga keladigan elektr tokini o'lchashga asoslangan. Amperometrik usulning sezgirligi ham ishchi elektrodning tabiati, ham unga qo'llaniladigan potentsial bilan belgilanadi. Polifenollar, flavonoidlarning amperometrik detektorini aniqlash chegarasi nano-pikogrammalar darajasida, bunday past konsentratsiyalarda turli xil antioksidantlarning ularning birgalikda mavjudligida o'zaro ta'sir qilish ehtimoli kamroq, xususan, sinergizm fenomenining namoyon bo'lishi. . Usulning kamchiliklari uning o'ziga xosligini o'z ichiga oladi: bu sharoitda kislorodning elektroreduksiya potentsiallari hududida oksidlangan yoki kamaygan antioksidantlarni tahlil qilib bo'lmaydi. Usulning afzalliklari uning tezligi, prostata va sezgirlikni o'z ichiga oladi.

Elektrogeneratsiyalangan oksidlovchilardan foydalangan holda galvanostatik kulometriya usuli - bu usul yog'da eriydigan antioksidantlarni tahlil qilish uchun qo'llaniladi.

Askorbin kislotani aniqlashning turli usullari ishlab chiqilgan:

oddiy eritma immersion usuli bilan nikel (II) geksasiyanoferrat plyonkasi bilan o'zgartirilgan alyuminiy elektrod yordamida amperometrik usul;

indikator kukuni sifatida Wavel reaktivi va mis (II) bilan modifikatsiyalangan kremniy kislotasi kserogel yordamida askorbin kislotani qattiq fazali spektrofotometrik va vizual sinovdan aniqlash usuli;

askorbin kislotani xemilyuminessent bilan aniqlash rodamin B ning sulfat kislota muhitida seriy (IV) bilan xemiluminesans reaktsiyasiga ko'ra oqimli in'ektsiya usuli bilan amalga oshirilishi mumkin.

suvli va suvli-organik muhitda anodik voltammetriya yordamida 10 -8 -10 -3 g/sm 3 oralig'ida askorbin kislotani aniqlash.

Eng keng tarqalgani FRAP usulidir, chunki u ekspress, juda sezgir. So'nggi bir necha o'n yilliklarda FRAP usuli bo'yicha antioksidant faollikni aniqlashning ko'plab turlari ishlab chiqildi (1-jadval).

1-jadval FRAP usulini ishlab chiqish va uni turli ob'ektlarning antioksidant faolligini aniqlash uchun qo'llash

	Tahlil ob'ektlari	Eslatmalar
	qon plazmasi	t=4min. Reaksiya stoxiometriyasi va qo'shilish qobiliyati o'rganildi.
	Choy, vino	Polifenollar tufayli AOA ni aniqlash
		Turli xil choy turlarining AOA qiymatlari taqqoslanadi
Pulido, Bravo, Saura-Kaliksto	Model yechimlari	t=30min. Suvsiz erituvchining ta'siri aniqlandi
	O'simliklar
	qon, to'qima	PIA usuli. Chet moddalarning ta'siri tekshirildi.
Firuzi, Lakanna, Petruchchi e.a.	Model yechimlari	Turli AO larni tuzilishi va oksidlanish-qaytarilish potentsialiga qarab aniqlashning sezgirligi o‘rganildi.
Katalinich, Milos,	Har xil vinolar
Temerdashev, Tsyupko va boshqalar.	Model aralashmalari
Loginova, Konovalova	Dorilar. Tayyorgarlik	sinov usuli
Temerdashev, Tsyupko va boshqalar.	Quruq qizil vinolar	AOA ning vino sifatining boshqa ko'rsatkichlari bilan bog'liqligi
1-jadval davom etdi
	Model aralashmalari	Turli AO ni aniqlashning sezgirligi
Vershinin, Vlasova, Tsyupko	Model aralashmalari	Oksidlovchi moddaning etishmasligi bilan signalning qo'shilmasligi aniqlandi
Anisimovich, Deineka va boshqalar.	Model yechimlari	AOA baholash uchun kinetik parametrlar taklif etiladi.

Eslatmalar: an'anaviy tarzda etiketlangan: PIA-oqim-in'ektsiya tahlili, TPTZ-tripiridiltriazin, DIP-2,2, -dipiridil, PHEN-o-fenantrolin, DPA-piridindikarboksilik kislota, FZ-ferrozin, AA-askorbin kislotasi, CT-katexol, t - ta'sir qilish vaqti, min.

Suvli eritmalardagi oqsillar va polielektrolitlarning o'zaro ta'siri

Protein-polielektrolit komplekslarini tavsiflash uchun turli xil tahlil usullari qo'llaniladi. Instrumental usullar strukturaviy va optik xususiyatlar haqida ma'lumot beradi, shuningdek, PEC ulanishining dinamikasi va tabiatini aniqlaydi ...

d-metall birikmalarining bipolyar membranada suv molekulasining dissotsilanish tezligiga ta'siri

Yangi BPMlarni sintez qilish jarayonida sintez qilingan membranalarning elektrokimyoviy xususiyatlarini yaxshilashni ta'minlaydigan sintez sharoitlarini keyingi tanlash uchun olingan namunalarning xususiyatlarini o'rganishga katta e'tibor qaratish lozim...

Dizayner preparatlari va sintetik kannabinoidlar

O'simlik aralashmalarida sintetik kannabinoidlarni aniqlash turli xil fizik-kimyoviy usullar bilan amalga oshirilishi mumkin, masalan, gaz xromatografiyasi - massa spektrometriyasi, gaz, yupqa qatlam va yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi ...

Dorivor o'simlik materiallarida flavonoidlarni aniqlash usulini ishlab chiqish

Xinolinonlarning sintezi va farmakologik xossalari-2

Tadqiqot ob'ekti: Xinolinon-2. Tadqiqot usuli: “Marvin JS” kompyuter dasturi yordamida moddaning tuzilishi yaratildi. Keyinchalik, u qo'shimcha tekshirish uchun "http://www.way2drug.com/PASSOnline/predict.php" saytiga yuborildi...

Epoksi polimerning bug'lanish mahsulotlarini o'rganishning termospektral usuli

Qisqichbaqasimonlar qobig'idan yuqori darajada tozalangan xitozan olish texnologiyasi

Xitozanning molekulyar og'irligini aniqlash Xitosanning molekulyar og'irligi standart usul bo'yicha viskometrik tarzda aniqlandi. 0,05 va 0,5 g/dl konsentratsiyali eritmalar polimer kukunining tortilgan qismini asetat tamponida (0...) eritib tayyorlandi.

Tabiat bog'i hududining fizik-geografik xususiyatlari

Ixtiro oziq-ovqat sanoatiga tegishli bo'lib, umumiy antioksidant faolligini aniqlash uchun ishlatilishi mumkin. Usul quyidagicha amalga oshiriladi: tahlil qilinadigan modda 0,006 M Fe(III) - 0,01 M o-fenantrolin reaktivi bilan o'zaro ta'sir qiladi. Askorbin kislotasi (AA) 1:100 nisbatda qo'shilgan bir xil reaktiv bilan o'zaro ta'sir qiladi. Keyin kamida 90 daqiqa davomida inkubatsiya qilinadi va 510±20 nm da fotometrlanadi. Shundan so'ng, analitik signal qiymatining moddaning miqdoriga bog'liqligi o'rnatiladi va umumiy AOA qiymati hisoblanadi. Taqdim etilgan usul o'simlik materiallari va unga asoslangan oziq-ovqat mahsulotlarining umumiy antioksidant faolligini kamroq vaqt talab qiladigan va ishonchliroq aniqlash imkonini beradi. 2 w.p. f-ly, 1 kasal, 5 tab.

Ixtiro analitik kimyoga taalluqlidir va undan o'simlik materiallari va unga asoslangan oziq-ovqat mahsulotlarining umumiy antioksidant faolligini (AOA) aniqlashda foydalanish mumkin.

Choyning umumiy AOA ni aniqlashning ma'lum kulometrik usuli, mahsulotning suvli ekstraktlarini elektrogeneratsiyalangan brom birikmalari bilan o'zaro ta'siriga asoslangan (I.F. Abdulin, E.N. Turova, G.K. Budnikov Choy ekstraktining antioksidant qobiliyatini elektrogeneratsiyalangan brom bilan kulometrik baholash // Zhurn Kimyo, 2001 yil, 56-jild, 6-son, 627-629-betlar). Elektrogeneratsiyalangan brom birikmalarini titrant sifatida tanlash ularning turli reaksiyalarga kirishish qobiliyatiga bog'liq: radikal, oksidlanish-qaytarilish, elektrofil o'rnini bosish va ko'p bog'lar bilan qo'shilish. Bu antioksidant xususiyatlarga ega bo'lgan ko'plab biologik faol choy birikmalarini qamrab olish imkonini beradi. Ushbu usulning kamchiliklari antioksidant bo'lmagan moddalar bilan bromlanish reaktsiyasi ehtimoli va natijada umumiy AOA qiymatining elektr miqdori (kC / 100 g) birliklarida ifodalanishi, bu esa baholashni qiyinlashtiradi. natijalar.

Simob plyonkali elektrodda (Pat. IPC 7 G 01) 0,0 dan -0,6 V gacha bo'lgan potentsial diapazonda kislorodning elektroreduksiya oqimining nisbiy o'zgarishi bilan umumiy antioksidant faollikni aniqlashning ma'lum voltametrik usuli. N 33/01 Antioksidantlarning umumiy faolligini aniqlashning voltametrik usuli / E. I. Korotkova, Yu. Ushbu usulning nochorligi yon elektrokimyoviy reaktsiyalarning paydo bo'lishi bo'lib, bu antioksidantlarni aniqlash samaradorligini pasaytiradi, bu esa natijalarning ishonchliligini pasayishiga olib keladi.

Spektrofotometrik yoki chemiluminescent aniqlash (Pat. 2182706, Rossiya, IPC 7 G 01 N 33/15, 33/52, I. Pavuchenko, I. Pavuchenko) bilan malonik aldegid uchun lipid peroksidasyonu uchun profilaktik va davolash antioksidant agentlari umumiy AOA nazorat qilish uchun ma'lum bir usul. Basov A.A., Fedosov S.R. - No 2001101389/14; ariza 15.01.2001; nashr. 20.05.2002). Shu bilan birga, antioksidant faollik lipid peroksidlanish mahsulotlari darajasiga teskari proportsionaldir. Ushbu usulning nochorligini tahlil qilinadigan ob'ektlarning cheklangan doirasi deb hisoblash mumkin, chunki bu sharoitda faqat bitta guruhning antioksidantlari, lipidlar aniqlanadi.

O'simlik ekstraktining umumiy AOA ni aniqlashning ma'lum usuli, bu ekstraktni linetol va temir (II) sulfat bilan inkubatsiya qilish, UV nurlanishi bilan oksidlanish reaktsiyasini boshlash va triton X-100 ishtirokida tiobarbiturik kislota bilan keyingi o'zaro ta'sir qilishdan iborat. Ilova 97111917/13, Rossiya, IPC 6 G 01 N 33/00 Umumiy antioksidant faollikni aniqlash usuli / Rogojin VV - Ilova 08.07.1997; nashr. 10.06.1999). Spektrofotometriyani o'tkazishda 7:3 nisbatda etanol va xloroform aralashmasi ishlatiladi. Biologik materialning AOA qiymati ekstrakti bo'lgan namunadagi reaksiya mahsuloti - malondialdegidning prooksidant bilan namunaga to'planishi nisbati bilan aniqlanadi. Ushbu usulning nochorligi ultrabinafsha nurlanishida yon reaktsiyalar ehtimoli bo'lib, bu tahlil natijalarining ishonchliligini pasaytiradi.

Umumiy AOA ni aniqlashning sanab o'tilgan usullari bir qator kamchiliklarga ega: yuqori mehnat zichligi, past ishonchlilik, umumiy AOA ning o'lchangan qiymati bog'liq emas va hech qanday an'anaviy modda bilan taqqoslanmaydi.

Da'vo qilingan ixtiroga eng yaqin analog bu luminol bilan oksidlovchi vosita vodorod periks (M.X. kanareyka o'ti xemiluminesans bilan) ishtirokida reaksiyaga kirishganda paydo bo'ladigan xemiluminesansni o'lchash orqali dorivor o'simliklarning umumiy AOA ni aniqlash usulidir. // Jurnal. Analitik kimyo, 2004, V.59, No 1, B.84-86). Umumiy AOA ni miqdoriy baholash uchun dorivor xom ashyo ekstraktining pasaytirish qobiliyati va kuchli antioksidant - askorbin kislotaning 25-110 mkg miqdoridagi faolligi solishtirildi. Yuqoridagi usullar bilan taqqoslaganda, prototipda vodorod periks oksidlovchi vosita sifatida keng ko'lamli antioksidantlar bilan o'zaro ta'sir qiladi va ob'ektning umumiy AOA ning o'lchangan qiymati aniqlanadi va askorbin kislotaga nisbatan ifodalanadi. umumiy antioksidant, bu boshqa kamchiliklarni saqlab, ishonchli natijalarga erishish imkonini beradi. Kamchiliklar, shuningdek, usulda ishlatiladigan uskunaning murakkabligini ham o'z ichiga oladi.

Da'vo qilingan ixtironing texnik maqsadi o'simlik materiallari va unga asoslangan oziq-ovqat mahsulotlarining umumiy antioksidant faolligini aniqlash uchun kamroq vaqt talab qiladigan va ishonchli usulni ishlab chiqishdir.

Texnik muammoni hal qilish uchun tahlil qiluvchi moddani 0,006 M Fe (III) reaktivi - 0,01 M o-fenantrolin va 1:100 nisbatda qo'shilgan bir xil reaktiv bilan askorbin kislotasi (AA) bilan o'zaro ta'sir qilish taklif etiladi. , kamida 90 daqiqa davomida inkubatsiya qilinadi, 510±20 nm da fotometrlanadi, so'ngra analitik signalning moddaning miqdoriga bog'liqligini aniqlash va umumiy AOA ni hisoblash. Xususan, hisoblash o'rganilayotgan ob'ekt va askorbin kislotasi o'rtasidagi miqdoriy muvofiqlik tenglamasidan olingan (I) formula bo'yicha amalga oshirilishi mumkin:

bu yerda a, c - analitik signalning AA miqdoriga bog'liqligi uchun regressiya tenglamasidagi koeffitsientlar;

a", c" - analitik signalning o'rganilayotgan ob'ekt miqdoriga bog'liqligi uchun regressiya tenglamasidagi koeffitsientlar;

x quyosh. - o'rganilayotgan qaytaruvchi (namuna) massasi, mg.

Ushbu sharoitlarda tavsiya etilgan reagentdan foydalanish bizga chiziqli diapazonni kengaytirishga va belgilangan miqdordagi askorbin kislotasining pastki chegarasini kamaytirishga imkon berdi. Taklif etilayotgan muhim xususiyatlar majmuasi unga asoslangan keng assortimentdagi o'simlik materiallari va oziq-ovqat mahsulotlarining umumiy AOA ni aniqlash imkonini beradi.

Miqdoriy muvofiqlik tenglamalari analitik signalning askorbin kislota miqdoriga bog'liqligini va antioksidant faolligi teng bo'lishi sharti bilan analitik signalning o'rganilayotgan ob'ekt miqdoriga bog'liqligini bog'laydi.

Analitik signalning kattaligini fotometrik o'lchash natijalarini eng kichik kvadratlar usuli bilan qayta ishlagandan so'ng (K. Derffel Statistics in analitik kimyo. - M .: "Mir", 1994. S. 164-169; A.K. Charykov Matematik ishlov berish. kimyoviy analiz natijalari - L .: Kimyo, 1984. S.137-144) bu bog'liqliklar chiziqli regressiya funksiyasi bilan tasvirlangan: y=ax+b, bu erda a - regressiya koeffitsienti, b - erkin a'zo. Regressiya tenglamasidagi a koeffitsienti to'g'ri chiziqning x o'qiga qiyaligi tangensiga teng; koeffitsient b - y o'qi bo'ylab boshlang'ich (0,0) dan birinchi nuqtagacha bo'lgan masofa (x 1 , y 1).

a va b koeffitsientlari quyidagi formulalar bo'yicha hisoblanadi:

AS ning ma'lum bir vaqtda askorbin kislota miqdoriga bog'liqligi uchun regressiya tenglamasi quyidagi ko'rinishga ega:

y AK \u003d a x AK (mg) + b,

AS ning o'rganilayotgan ob'ekt (kamaytirish agenti) miqdoriga bog'liqligi uchun regressiya tenglamasi:

y VOST \u003d a "x VOST (mg) + b",

bu yerda AK uchun, VOST uchun fotometrik eritmaning optik zichligi;

x AK (mg), x VOST (mg) - eritmadagi askorbin kislota (qaytaruvchi vosita) kontsentratsiyasi;

so'ngra, funktsiyalar qiymatlarini tenglashtirib, o'rganilayotgan ob'ektning antioksidant faolligini askorbin kislota miqdori (mg) birliklarida hisoblash uchun formula (I) ni olamiz.

Chizma analitik signalning qaytaruvchi vosita miqdoriga bog'liqligini ko'rsatadi.

Tahlil qilingan eritmalarning optik zichligi KFK-2MP fotoelektrik kolorimetrida o'lchandi.

Ma'lumki (F. Umland, A. Yasin, D. Tirik, G. Vunsh kompleks birikmalari analitik kimyoda - M.: Mir, 1975. - 531 b.) o-fenantrolin temir bilan suvda eruvchan xelat hosil qiladi ( II) qizil-to'q sariq rang, u l=512 nm da maksimal yutilish bilan tavsiflanadi. Shuning uchun taklif qilingan usulda fotometriya l=510±20 nm da olib boriladi.

Reagent tarkibini va uning reaksiyaga kiritilgan miqdorini optimallashtirish Lotin kvadrati usulidan foydalangan holda tajribani multifaktorli rejalashtirish natijalari asosida amalga oshirildi, bu har bir tajribada o'rganilayotgan barcha omillarni o'zgartirishdan iborat edi va har bir Har bir omil darajasi faqat bir marta boshqa omillarning turli darajalariga javob beradi. Bu har bir o'rganilayotgan omil ta'sirini alohida aniqlash va baholash imkonini beradi.

Quyidagi omillar ishlatilgan: Fe (III), o-fenantrolin miqdori va reaksiyaga kiritilgan reaktiv hajmi. Omillarning kombinatsiyasi analitik signalning (AS) keng doiradagi chiziqliligini, bir tomondan, etarli sezgirlik bilan, ikkinchi tomondan, reaktivning vaqt o'tishi bilan barqarorligini ta'minlashi kerak. Bu har bir omil uchun quyidagi darajalarni ajratib ko'rsatish imkonini berdi:

Fe (III) miqdori: 0,003 M (A 1); 0,006 M (A 2); 0,009 M (A 3);

o-fenantrolin miqdori: 0,01 M (B 1); 0,02 M (B 2); 0,03 M (B 3);

reaktiv hajmi: 0,5 ml (C 1); 1,0 ml (C 2); 2,0 ml (C 3) (1-jadval).

Faktor darajalarining optimal kombinatsiyasini tanlash uchun AS ning askorbin kislota miqdoriga kalibrlash bog'liqliklari 10 dan 150 mkg oralig'ida olingan (bu funktsiyaning chiziqliligini tasdiqlash uchun zarur), olingan bog'liqlikning regressiya tenglamasi edi. hisoblab chiqilgan va keyin ma'lum miqdorda (120 mkg) askorbin kislotada AS qiymati. Shunday qilib, reaktivning har bir tarkibi (A, B omillari) uchun AC qiymati maksimal bo'lgan hajm (C omil) tanlangan. Bu ko'rib chiqilayotgan kombinatsiyalar sonini to'qqiztagacha kamaytirish imkonini berdi (2-jadval).

Har bir daraja uchun jami ASni taqqoslab, maksimal qiymatga ega bo'lgan miqdorlar aniqlandi: SA 2 (0,991); SB 1 (1,066); SC 2 (1,361). Bu reaktiv tarkibi optimal degan xulosaga kelish imkonini berdi: 0,006 M Fe (III) - 0,01 M o-fenantrolin, uning hajmi reaksiyaga kiritilgan, 100 ml eritma uchun 1,0 ml.

Reagentning optimal konsentratsiyasida biz AS ning askorbin kislota va tabiiy ob'ektlarda (tanin, rutin, quercetin) keng tarqalgan ba'zi qaytaruvchi moddalar kontsentratsiyasiga bog'liqligi o'zgarishini reaksiya aralashmasining turli inkubatsiya vaqtlarida o'rgandik (30, 60). , 90, 120 min). O'rganilayotgan barcha qaytaruvchi moddalar uchun AS ning ularning tarkibiga bog'liqligi 10-150 mkg oralig'ida chiziqli (chizmaga qarang) va AS qiymati inkubatsiya vaqtiga bog'liqligi aniqlandi (3-jadval).

Chizmadan ko'rinib turibdiki, rutin ta'sirida AC o'zgarishi ahamiyatsiz, tanin yaqinlashadi va kversetin askorbin kislotaga bir xil bog'liqlikdan oshadi. Barcha o'rganilgan qaytaruvchi moddalar uchun inkubatsiya vaqtidan boshlab AC o'zgarishini ko'rib chiqayotganda (3-jadval), analitik signalning vaqt o'tishi bilan barqarorlashuvi 90 daqiqadan boshlab kuzatilishi aniqlandi.

3-jadval Vaqt o'tishi bilan kamaytiruvchi agentlarning AS o'zgarishi
Sinov moddasi	m moddalar, mg / sm 3	Analitik signal
Sinov moddasi	m moddalar, mg / sm 3	Reaksiya aralashmasini inkubatsiya qilish vaqti, min
30	60	90	120
S vitamini	10	0,038	0,042	0,044	0,044
100	0,340	0,352	0,360	0,363
Tanin	10	0,029	0,037	0,042	0,043
100	0,280	0,295	0,303	0,308
Rutin	10	0,013	0,016	0,019	0,019
100	0,150	0,166	0,172	0,175
Quercetin	10	0,031	0,044	0,051	0,053
100	0,420	0,431	0,438	0,442

Aniqlangan AOA qiymatining yig'indisi xususiyatini isbotlash uchun reaktiv Fe (III) - o-fenantrolinning model eritmalariga ta'siri o'rganildi, ular tarkibiga qaytaruvchi moddalar: tanin, rutin, quercetin va turli nisbatlarda askorbin kislota kiradi. 4-jadvalda namunaviy aralashmalarni tahlil qilish natijalari keltirilgan.

4-jadval Model aralashmalari tahlili natijalari (P=0,95; n=3)
Aralashmaning tarkibiy qismlari soni	Jami AOA, hisoblangan, mcgAA	Jami AOA, topilgan, mcgAA
tanishtirdi	Jami AOA, hisoblangan, mcgAA	Jami AOA, topilgan, mcgAA	AK nuqtai nazaridan
AK	Tanin	Rutin	Quercetin	AK	Tanin	Rutin	Quercetin
-	20	20	20	-	16,77	9,56	32,73	59,06	57,08
-	10	10	10	-	8,35	4,77	16,41	29,53	26,95
-	50	10	10	-	42,02	4,77	16,41	63,20	55,04
-	10	50	10	-	8,35	23,93	16,41	48,69	50,06
-	10	10	50	-	8,35	4,77	81,70	94,82	91,61
-	30	10	10	-	25,19	4,77	16,41	46,37	39,24
-	10	30	30	-	8,35	14,35	49,06	71,76	73,47
20	20	20	20	20	16,77	9,56	32,73	79,06	96,29
50	10	10	10	50	8,35	4,77	16,41	87,95	93,07
10	50	10	10	10	42,02	4,77	16,41	73,20	78,15
10	10	50	10	10	8,35	23,93	16,41	58,69	78,74
10	10	10	50	10	8,35	4,77	81,70	104,82	121,45
30	30	10	10	30	25,19	4,77	16,41	76,37	84,59
10	10	30	30	10	8,35	14,35	49,06	81,76	103,31

Umumiy AOA ning nazariy qiymatini hisoblash teng antioksidant faollik sharoitida o'rganilayotgan qaytaruvchining askorbin kislotaga nisbatan antioksidant qobiliyatini tavsiflovchi miqdoriy moslik tenglamalari bo'yicha amalga oshirildi: .

Eksperimental (topilgan) AOA qiymati AS ning askorbin kislota miqdoriga bog'liqligi uchun o'rtacha regressiya tenglamasi yordamida hisoblab chiqilgan. 4-jadvalda keltirilgan natijalardan ko'rinib turibdiki, eksperimental ravishda olingan AOA qiymatlari nazariy jihatdan hisoblanganlar bilan qoniqarli darajada mos keladi.

Shunday qilib, AOA ning aniqlangan qiymati umumiy ko'rsatkich bo'lib, miqdoriy moslik tenglamalari yordamida uning qiymatini aniqlash to'g'ri bo'ladi.

Taklif etilgan usul haqiqiy namunalarda sinovdan o'tkazildi. Haqiqiy namuna yoki uning ekstraktining umumiy AOA ni aniqlash uchun AS ning analit va askorbin kislota miqdoriga kalibrlash bog'liqligi reaktsiya aralashmasining kamida 90 minutlik inkubatsiya vaqtida olingan. Umumiy AOA ni hisoblash formula (I) bo'yicha amalga oshirildi va sinov ob'ektining grammiga mg askorbin kislotasida (mgAA / g) ifodalangan.

Taklif etilgan usulning to'g'riligini tasdiqlash uchun ushbu namunalar askorbin kislotasi (GOST 24556-89 Meva va sabzavotlarning qayta ishlangan mahsulotlari. S vitaminini aniqlash usullari) va ustunlik qiluvchi reduktorlar miqdorini baholagan holda ma'lum usullar bo'yicha sinovdan o'tkazildi: choyda - tanin (GOST 19885-74 Choy. Tarkibni tanin va kofeinni aniqlash usullari), kuşburnularda - organik kislotalar miqdori (GOST 1994-93 Kuşburnu. Texnik xususiyatlari) (5-jadval).

1 Bolshakova L.S. bittaMilentiev V.N. 2Sannikov D.P. 3Kazmin V.M. 2

1 Oryol davlat iqtisodiyot va savdo instituti

2 Federal davlat byudjet muassasasi "Orlovskiy" Kimyoviylashtirish va qishloq xo'jaligi radiologiyasi markazi

3 Federal davlat byudjeti oliy kasbiy ta'lim muassasasi "Davlat universiteti - o'quv, ilmiy va ishlab chiqarish majmuasi"

Oziq-ovqat moddalarining antioksidant faolligini baholash uchun xemiluminesansdan foydalanish imkoniyati o'rganildi. Taklif etilayotgan usul ishqoriy muhitda luminolning xemilyuminessensiyasiga asoslangan bo'lib, uning intensivligi kimiluminesans namunadagi peroksidlar miqdoriga bog'liq. Xemiluminesans dozalash pompasi, yorug'lik o'tkazmaydigan kamera, shisha vakuumli fotoko'paytiruvchi trubka va kompyuter tizimini o'z ichiga olgan ishlab chiqilgan qurilma yordamida qayd etildi. Xemiluminesansni kuchaytirish uchun luminolga kaliy ferrisiyanid eritmasi qo'shildi. Xemiluminesans intensivligidagi o'zgarishlar tahlil qilingan namunani luminol eritmasiga kiritish vaqtida qayd etilgan. Tahlil qilingan namuna sifatida quruq past haroratli distillash orqali olingan karahindiba ekstrakti ishlatilgan. Uning tarkibida yuqori antioksidant faolligi bilan mashhur fenolik birikmalar mavjud. Xemiluminesans usuli yordamida turli oziq-ovqat birikmalarining antioksidant xususiyatlarini aniqlash mumkinligi aniqlandi.

Bibliografik havola

Panichkin A.V., Bolshakova L.S., Milentiev V.N., Sannikov D.P., Kazmin V.M. XEMILYUMİNESSENSIYADAN OZIQ NOVTALARNING ANTIOKSIDANT XUSUSIYATLARINI BAHOLASH UCHUN FOYDALANISH // Ratsional ovqatlanish, oziq-ovqat qo'shimchalari va biostimulyatorlar. - 2014. - No 6. - B. 36-37;
URL: http://journal-nutrition.ru/ru/article/view?id=283 (kirish sanasi: 17.12.2019). "Tabiiy tarix akademiyasi" nashriyoti tomonidan chop etilgan jurnallarni e'tiboringizga havola qilamiz 1 Milentiev V.N. 2Sannikov D.P. 3Kazmin V.M. 2

1 Oryol davlat iqtisodiyot va savdo instituti

2 Federal davlat byudjet muassasasi "Orlovskiy" Kimyoviylashtirish va qishloq xo'jaligi radiologiyasi markazi

3 Federal davlat byudjeti oliy kasbiy ta'lim muassasasi "Davlat universiteti - o'quv, ilmiy va ishlab chiqarish majmuasi"

kimyoluminesans

antioksidant faollik

peroksidlar

ozuqa moddalari

1. Vasilev R.F. Kimyoviy porlash // Kimyo va kimyogarlar, 21.01.10. – URL: http://chemistry-chemists.com. (kirish sanasi: 22.08.13).

2. Vladimirov Yu.A. Erkin radikallar va antioksidantlar // Vestn. RAMN. - 1998. - No 7. - B. 43-51.

3. Kondrashova E.A. Xemiluminesans ferment immunoassayning eng sezgir usuli sifatida va uni qo'llash.Klinik laboratoriya diagnostikasi. - 1999. - No 9. - B. 32.

4. Lyubimov, G.Yu. Xemiluminesans tahlili // Immunologiya. - 1991. - No 1. - B. 40–49.

5. Mayanskiy A.N., Nevmyatullin A.L., Chebotar I.V. Fagotsitoz tizimidagi reaktiv xemiluminesans // Mikrobiologiya. - 1987. - No 1. - S. 109–115.

6. Sherstnev M.P. Hujayra kimyoluminesans hosil bo'lishining kaltsiyga bog'liq va kaltsiyga bog'liq bo'lmagan yo'llari.Xemiluminesans masalalari. - 1991. - No 2. - S. 1–4.

Bugungi kunda kimyoluminesans kimyo, fizika va biologiya o'rtasidagi chegarada joylashgan fanning katta sohasidir. Xemiluminesans bilan kimyoviy energiyani elektromagnit tebranishlar energiyasiga to'g'ridan-to'g'ri aylantirish mavjud, ya'ni. dunyoga. Kimiluminesansdan foydalanib, reaksiya qanday borishini, uning mexanizmi nimadan iboratligini, texnologik jarayonlarni samarali va oqilona o'tkazish uchun zarurligini bilib olish mumkin. Agar har qanday kimyoviy mahsulotni olishning texnologik jarayoni xemiluminesans bilan birga bo'lsa, unda uning intensivligi jarayon tezligining o'lchovi bo'lib xizmat qilishi mumkin: reaksiya qanchalik tez bo'lsa, porlash shunchalik yorqinroq bo'ladi. Xemiluminesans reaksiyasi jarayonida energiyaga boy mahsulotlar olinadi, keyinchalik ular yorug'lik chiqarish orqali energiya chiqaradi, ya'ni kimyoviy energiya elektromagnit nurlanish energiyasiga aylanadi.

Tadqiqotning maqsadi oziq-ovqat moddalarining antioksidant faolligini baholash uchun xemiluminesansdan foydalanish imkoniyatini o'rganish edi.

Tadqiqot natijalari va muhokama

Oziq-ovqat moddalarining antioksidant faolligini baholash muammosi juda dolzarbdir. Muayyan mahsulotning foydaliligini ko'rsatish uchun "antioksidant faollik" atamasidan foydalanish ko'pincha kimyoviy va biokimyoviy dalillarsiz amalga oshiriladi. Qoida tariqasida, har qanday moddaning antioksidant faolligi peroksid qiymatini kamaytirish samaradorligini anglatadi. Peroksid qiymati tushunchasining o'zi ham uning kimyoviy mohiyatini to'liq ochib bermaydi, chunki u ma'lum bir oziq-ovqat mahsulotining metabolizm bosqichlarining kinetikasi va termodinamikasiga to'liq mos kelmaydi. Bundan tashqari, bu qiymat yog'lar shaklida lipidlarni tavsiflash uchun ishlatiladi. Shu bilan birga, organizmdagi oksidlanish va peroksidlarning shakllanishi jarayonlari nafaqat yog'larni ishlatish bilan, balki boshqa mahsulotlar bilan ham sodir bo'ladi. Boshqacha qilib aytadigan bo'lsak, ma'lum bir mahsulotdagi peroksidning tarkibini qandaydir tarozida "tortishgan" deb aytish mumkin, bunda "mos og'irlik" peroksidlar bilan oksidlangan yodid ionining kislotali muhitdagi kontsentratsiyasi birligidir. buning natijasida molekulyar yod hosil bo'ladi:

I- - e → I; (bir)

I + I → I20. (2)

Molekulyar yod natriy tiosulfat o'z ichiga olgan eritma bilan titrlanganda uning kontsentratsiyasi aniqlanadi va natijada yodid ionlarining oksidlovchi moddalari miqdori aniqlanadi, ya'ni. peroksid birikmalari, bu aslida peroksid soni deb ataladi. Ushbu turdagi "tortishish" yordamida peroksid qiymatini aniqlash rasmda ko'rsatilgan reaktsiyaga asoslanadi. bitta.

Guruch. 1. Natriy tiosulfat yordamida peroksid qiymatini aniqlash

Shunday qilib, peroksidlarning kontsentratsiyasi tenglamadan aniqlanadi

S(I2) = s(C[-O-O-]), (3)

bu erda s - molekulyar yod konsentratsiyasi va peroksidlar konsentratsiyasi o'rtasidagi korrelyatsiya koeffitsienti.

Mahsulotlardagi peroksidlarni aniqlashning tavsiya etilgan usuli ishqoriy muhitda luminolning (C[lm]) xemilyuminesansiyasiga asoslanadi, uning intensivligi (Ichl) peroksidlarning (C[-O-O-]) konsentratsiyasiga bog'liq. kimyoluminesans namunasi:

IHL. = chchl ō, (4)

bu yerda chchl - xemiluminesansning kvant unumi; ō - peroksidlar ishtirokidagi reaksiya tezligi:

khlC[-O-O-] C[lm] = ō, (5)

Bu erda kchl - reaksiya tezligi doimiysi yoki:

C[lm] kchl chchl = K, (6)

IXL = K C[-O-O-]. (7).

Peroksidlar miqdori (-O-O-) yorug'lik yig'indisi (S) bilan aniqlanadi:

S ning qiymati xemiluminesans reaktsiyasida peroksid iste'molining to'liqlik darajasiga bog'liq.

Doimiy K ni aniqlash uchun yorug'lik yig'indisi S ning peroksid kontsentratsiyasiga bog'liqligi uchun kalibrlash egri chizig'i tuziladi, bu titrlash orqali aniqlanadi:

S = f (C[-O-O-]). (9)

Vodorod periks H2O2 peroksid sifatida ishlatiladi.

Keyin (3) va (9) tenglamadan olingan ma'lumotlar solishtiriladi. s va K ni solishtirish asosida ushbu usullar bilan peroksidlarni aniqlashda yotgan reaksiya mexanizmlarining kelishilganligi haqida xulosa chiqariladi. Peroksid konsentratsiyasining ushbu oralig'ida p va K ning haqiqatan ham bir-biriga mos kelishi aniqlandi va shuning uchun ular peroksid qiymatini aniqlash uchun ishlatilishi mumkin.

Xemiluminesans luminol (5-amino-1,2,3,4-tetrahidro-1,4-ftalazindion, 3-aminoftalik gidrazid, H2L) bo'lgan ishqoriy muhitda kuzatildi. U xemiluminesans moslamasi, jumladan, shisha vakuumli fotomultiplikator yordamida yozib olingan. Fotoko‘paytirgich fotoko‘paytirgich signalini kuchaytiruvchi blokga (9) ulangan yuqori voltli rektifikator (7) orqali quvvatlanadi, bu esa kompyuter monitorining displeyida (5) qayd etiladi.

Guruch. 2. Tahlil qilinayotgan mahsulotning ximiluminesansini ro'yxatga olish: 1 - dozalash pompasi; 2 - yorug'lik o'tkazmaydigan kamera; 3 - oyna; 4 - kyuvet; 5 - kompyuter tizimi; 6 - fotoko'paytirgich; 7 - yuqori kuchlanishli rektifikator; 8 - xemiluminesans nurlanishning spektral hududini aniqlash imkonini beruvchi qurilma; 9 - fotomultiplikator signalini kuchaytiruvchi blok

Tahlil qilingan namunani luminolning xemiluminesans eritmasi bo'lgan kyuvetaga (4) kiritish uchun dozalash pompasi (1) kerak. Bu dispenser kimyoluminesans eritmasi bilan AOK qilingan namuna uchun aralashtirgich vazifasini bajaradi. Kimiluminesansning reaktsiya tezligi va intensivligini oshirish uchun luminolga kaliy ferrisiyanid eritmasi qo'shildi. Aralashtirish nasos bilan eritma suyuqligi orqali havo pompalanishi natijasida olingan havo pufakchalari orqali amalga oshiriladi. Shaffof kamerada (2) joylashgan oyna (3) shaffof bo'lmagan kameraga o'rnatilgan fotoko'paytirgichning (6) fotokatodiga tushgan xemilyuminessent nurlanishning yorug'likni yaxshiroq yig'ish uchun xizmat qiladi. Dispenser tajribalar paytida yorug'lik o'tkazmaydigan kamerani (2) ochmasdan, suyuqlikning kerakli tarkibiy qismlarini kyuvetaga kiritish imkonini beradi. Bunda bu suyuqliklar kyuvetaga (4) shisha yoki plastmassa naychalar orqali kiradi. Kompyuter tizimi luminesans intensivligining I ning t vaqtiga bog'liqligini, ya'ni xemiluminesans kinetikasini qayd etish imkonini beradi:

Kompyuter tizimi I = f(t) funksiyadagi yuksalish va pasayish konstantalarini aks ettiradi, ular xemiluminesansni yuzaga keltiruvchi reaksiyalarning tezlik konstantalari, ya’ni ularning kinetikasi bilan konjugatsiyalanadi. Xemilyuminessent kameraga qurilma (8) kiritilgan bo'lib, u kimyoviy nurlanishning spektral mintaqasini, ya'ni bog'liqligini aniqlashga imkon beradi:

I = f1(l). (o'n bir)

Ushbu blok disk ko'rinishidagi kasseta bo'lib, unda chegara filtrlari o'rnatiladi. Yorug'lik filtrlarining o'zgarishi diskli kassetani yorug'lik filtrlari tekisligi markazlarini va fotoko'paytirgichning fotokatodining tekisligini bog'laydigan gorizontal o'q atrofida aylantirish orqali amalga oshiriladi.

O'lchov jarayoni quyidagicha amalga oshiriladi:

1. Fotoko'paytirgichning uning ta'minot kuchlanishining o'zgarishiga va uning katodiga tushadigan etalon yorug'lik manbai intensivligining o'zgarishiga munosabati o'rnatiladi.

2. Kyuvetaga luminolning ishqoriy muhitdagi eritmasi solinadi.

3. Dispenser tahlil qilingan namuna bilan to'ldiriladi.

4. Xemiluminesans intensivligining t vaqtga bog'liqligi qayd etiladi. Xemiluminesans t1 vaqtgacha, I1 ning t vaqtidan o'zgarishi minimal bo'lguncha nazorat qilinadi: I1 = f1(t).

5. Tahlil qilingan eritmaning bir qismi dispenser yordamida oziqlanadi.

6. Tahlil qilinayotgan namunaning xemiluminesansligi kuzatiladi, uning kinetikasi I = f(t).

Shaklda. 3-rasmda tahlil qilinadigan eritma kiritilgandan so'ng (I = f(t)) grafik bilan konjugatsiyalangan (I1 = f1(t)) funktsiyalarning bog'liqligi grafigi ko'rsatilgan.

Shakldan ko'rinib turibdiki. 3, luminolning xemiluminesans intensivligi o'zgaradi: tahlil qilinadigan namuna qo'shilgandan so'ng, luminesansning keskin ko'tarilishi keskin pasayadi.

Luminolning oksidlanishida xemiluminesansning kuchayishi peroksidlar hosil bo'lishi bilan bog'liq bo'lganligi sababli, tahlil qilinadigan namuna kiritilgandan so'ng xemiluminesans intensivligining pasayishi ularning sonining kamayishini ko'rsatadi. Shuning uchun tahlil qilingan namunani tashkil etuvchi birikmalarda antioksidant faollik mavjudligi haqida gapirish mumkin.

Shuni ta'kidlash kerakki, tahlil qilingan namuna sifatida yuqori antioksidant faolligi bilan mashhur fenolik birikmalarni o'z ichiga olgan quruq past haroratli distillash orqali olingan karahindiba ekstrakti ishlatilgan.

Guruch. 3-rasm. (I1 = f1(t)) grafigi (I = f(t)) bilan konjugatsiyalangan funksiyalarning qaramlik grafigi, tahlil qilinadigan eritma kiritilgandan keyin.

Bundan tashqari, tajriba davomida xemiluminesans yordamida haddan tashqari suyultirilgan tizimlardagi peroksidlar miqdorini aniqlash mumkinligi aniqlandi, bu mahsulotlarning oksidlanish boshlanishini baholash uchun muhim ahamiyatga ega, masalan, ularni saqlash paytida.

Shunday qilib, olib borilgan tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, ishqoriy muhitda luminolning kimyoluminesansiga asoslangan mahsulotlardagi peroksidlarni aniqlash usuli oziq-ovqat moddalarining antioksidant faolligini baholashga imkon beradi va turli xil oziq-ovqatlarning antioksidant xususiyatlarini aniqlash uchun ishlatilishi mumkin. birikmalar.

Taqrizchilar:

Litvinova E.V., texnika fanlari doktori, texnologiya, tashkil etish va oziq-ovqat gigienasi kafedrasi professori, OrelGIET, Orel;

Kovaleva O.A., biologiya fanlari doktori, FSBEI HPE "Oryol davlat agrar universiteti" INITs direktori, Orel.

Asar tahririyat tomonidan 2013 yil 8 noyabrda olingan.

Bibliografik havola

Panichkin A.V., Bolshakova L.S., Milentiev V.N., Sannikov D.P., Kazmin V.M. XEMILYUMİNESSENSIYANI OZIQ NOVTALARNING ANTIOKSIDANT XUSUSIYATLARINI BAHOLASH UCHUN FOYDALANISH // Fundamental tadqiqotlar. - 2013. - 10-11-son. – S. 2436-2439;
URL: http://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=32810 (kirish sanasi: 17.12.2019). "Tabiiy tarix akademiyasi" nashriyoti tomonidan chop etilgan jurnallarni e'tiboringizga havola qilamiz.